신장의 Cistanche Tuberosa의 생리 활성 물질 및 원산지 차이 분석

초록: 6대 생산 지역시스탄체 튜불로사타클라마칸 사막을 연구대상으로 선정하여 부위별(뿌리, 중간, 윗부분) 생리활성물질 및 항산화 활성을 파악하여 다변량 통계분석을 실시하였다. 그 결과 생산 지역의 차이가 Cistanche tubulosa의 생리 활성 물질(총 폴리페놀,

총 플라보노이드, 총 트리테르펜, 총 다당류, 총 프로안토시아니딘, 에키나코사이드 및 버바스코사이드의 함량) 및항산화 작용모두 상당한 영향을 미쳤으며,생리 활성 물질다른 부분에서.시스탄체 튜불로사다른 기원에서 강한항산화 작용시험관 내에서 DPPH 자유 라디칼 소거율(IC50 DPPH )의 IC50은 7mg/mL 미만이고, ABTS 자유 라디칼 소거율(IC50 ABTS )의 IC50은 3mg/mLmL 미만입니다. 상관관계 분석 결과 Cistanche tubulosa의 IC50 DPPH는 총 폴리페놀과 유의한 음의 상관관계가 있었고에키나코사이드내용물; IC50 ABTS는 총 폴리페놀, 총 다당류, 에키나코시드 및버바스코사이드내용물. 주성분 분석은 분산누적기여율이 80인 3개의 주성분을 추출하였다. 57퍼센트 ; 클러스터 분석은 샘플을 3개의 그룹으로 나누었습니다. 생산지별 Cistanche tubulosa의 종합 점수 순서는 Kashi Jiashi County(0. 445), Alar City(0. 313), Hotan Moyu County(0.051), Turpan Shanshan County입니다. (-0. 057), Hotan Yutian County(-0. 071), Bayingolengolengqiemo County(-0. 680).

Keywords: Cistanche tubulosa; 생리활성 물질; 생산 지역의 차이; 종합평가

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소개

Cistanche tubulosa(Schrenk) Red Willow Dayun[1]으로도 알려진 Wight는 Cistanche deserticola와 함께 Cistanche deserticola의 근원 식물로 중화인민공화국 약전에 포함되었으며 "Food and Medicine" 카탈로그에 포함되었습니다. 2018년 국가위생건강위원회[2]시스탄체 튜불로사폴리페놀, 다당류, 페닐에탄올 배당체, 이리도이드 및 그 배당체 등과 같은 다양한 생물학적 활성 물질을 포함합니다. 혈중 지방 감소[6], 면역 조절[7], 신경 보호[8], 골다공증 예방[{{3] }}], 완하제 [11-12], 기억력 향상 [13] 및 기타 기능 활동으로 "사막 인삼"이라는 명성을 얻었습니다.

시스탄체 튜불로사Tamarix 식물의 뿌리에만 기생하며 우리나라 신장의 Hetian, Kashgar, Aksu 및 기타 Taklamakan Desert 주변 지역에 분포합니다. 연구[14]는 서로 다른 지리적 위치가 서로 다른 빛, 강수량, 온도 및 토양 조건을 가지고 있으며 식물의 성장, 발달 및 고유 품질에 다양한 영향을 미칠 것임을 발견했습니다. "중화인민공화국 약전"은 주로 다음을 사용합니다. Cistanche tubuloside의 품질을 평가하는 지표로 echinacoside와 verbascoside의 함량[2]이 있지만 Cistanche tubatus의 생리 활성 물질은 더 복잡합니다. , 총플라보노이드, 총다당류, 총트리테르펜, 총프로안토시아니딘 등은 광범위한 약리작용을 갖는다. 따라서 다지표 품질평가 방법은 관자나무 약재의 품질을 보다 종합적으로 평가할 수 있다[1]. 이를 바탕으로 본 논문은 신장 자치구의 타클라마칸 사막에 주목하고자 한다.시스탄체 튜불로사연구대상으로 하는 생리활성물질의 종류, 함량 및 항산화 활성Cistanche tubulosa서로 다른 생산지에서 조사하고 상관 분석, 주성분 분석 및 체계적 군집 분석을 사용하여 신장의 여러 생산 지역을 명확하게 하기 위해 포괄적인 평가를 수행했습니다. Cistanche tubulosa의 품질 차이는 Cistanche tubulosa 및 그 제품의 품질 관리를 강화하고 Cistanche tubulosa의 심층 가공 및 포괄적인 개발 및 활용을 촉진하기 위한 이론적 지원 및 참조를 제공합니다.

1. 1. 3 주요 기기 및 장비 파일럿3-6 m형 동결건조

Beijing Boyikang Experimental Instrument Co., Ltd.에서 제작한 원심분리기; Shanghai Anting Scientific Instrument Co., Ltd.에서 생산한 TGL-20B 원심분리기; Shanghai Qinghua Technology Instrument Co., Ltd.에서 생산한 756형 UV-가시광선 분광광도계; LC-20AB 고효율 액체 크로마토그래피는 일본 Shimadzu Corporation에서 생산했습니다. Synergy H1 다기능 마이크로플레이트 판독기는 Porton Instruments Co., Ltd.에서 생산했습니다.

1.2 생물학적 활성 물질의 결정

1. 2. 1 총 폴리페놀 함량 측정 FH Li et al. [17]. 검액의 조제 : 검체의 무게를 0.50g으로 하고 추출용매로 에탄올용액을 70%(지정하지 아니한 경우에는 부피분율을 말함), 고액비는 1로 한다. ：40(g/mL, 이하 동일.), 60도, 250W 초음파 장치에서 40분간 추출하고 냉각하고 4000r/min에서 10분간 원심분리하여 상등액을 모아 50mL로 희석하여 둔다. 검액 1 mL를 취하여 10% 폴리놀용액 5 mL를 넣어 진동시켜 잘 흔들어 섞은 다음 15분간 방치한 후 7.5% Na2CO3용액 4 mL를 넣어 진동시켜 잘 흔들어 섞은 다음 1분간 암소에 방치한다. 20 분. 1분 후 흡광도(A765)를 측정하여 갈산당량(mg GAE/g DW)으로 표시한다.

1. 2. 2 총 플라보노이드 함량 측정

Zhang Wenye et al.의 방법을 참조하십시오. [18]. 10 mL 갈색 메스플라스크에 시료용액(1.2.1과 동일) 1 mL를 취하여 질량분율이 5%인 NaNO2용액 0.3 mL를 넣고 진동하면서 흔든다. 15분간 방치한 후 0.3mL를 가한다. 10% Al(NO3)3 용액 4mL와 4% NaOH 용액 4mL를 만들어 50% 에탄올 용액으로 10mL로 희석하고 흔든다.

잘 흔든 다음 암소에서 20분간 방치한 후 흡광도(A510 )를 측정하여 그 결과를

과일은 루틴 당량(mg RE/g DW)으로 표시됩니다.

1. 2. 3 총 트리테르펜 함량 측정

He Ce et al.의 방법을 참조하십시오. [19]. 검액(1.2.1과 동일) 0.4 mL를 취하여 수욕상에서 증발건고하고 1.5% 바닐린빙초산용액 0.4 mL를 가하여 과염소산 1.6 mL를 70도 수욕에서 15분간 식힌 다음 초산에틸 5 mL를 넣어 10분간 방치하고 흡광도(A560)를 구하여 올레아놀산당량(mg OAE)으로 표시한다. /g DW).

1. 2. 4 총 다당류 함량 측정

Zhang Yadan et al.의 방법을 참조하십시오. [20]. 시료액의 준비 : 시료 1.00g을 칭량하고, 탈이온수를 추출용매로 사용하였으며, 고체:액체의 비율은 1:30, 60도, 250W 초음파 장치에서 50분간 추출, 냉각 4000 r/min 조건에서 10분 동안 원심분리하여 추출하고 상층액을 모은 후 95% 에탄올용액의 4배 부피를 가하고 4도에서 12시간 방치한 후 5000 r/min으로 원심분리하여 침전물을 아세톤, 에테르, 무세정 물과 에탄올로 2회 세척하고 적당량의 탈이온수를 넣어 재용해한 후 탈단백(Sevage법) 및 탈색소(활성탄법) 처리하여 10 mL로 희석하여 10 mL로 한다. 테스트. 검액 1 mL를 취하여 6% 페놀용액 0.6 mL 및 농H2SO4 3 mL를 차례로 넣고 진동하면서 잘 흔들어 섞은 후 끓는 수욕조에 10분간 방치하고 식힌 다음 흡광도를 측정한다(A490) , 그 결과를 포도당 당량(mg DE/g DW)으로 표현하였다.

1.2.5 프로안토시아니딘 함량 측정

Lu Xiao et al.의 방법을 참조하십시오. [21]. 샘플 용액의 준비: 샘플 0.50g의 무게를 측정하고 80% 에탄올을 첨가합니다.

이 용액을 추출 용매로 고액비 1:30으로 사용하였다. 초음파 장치에서 50도, 250W에서 40분간 추출하였다. 냉각 후, 4000 r/min에서 10분 동안 원심분리하였다. 상청액을 모으고 부피를 50 mL로 조정하였다. ,여분의.

검액 0.5 mL를 취하여 4% 바닐린-메탄올용액 3 mL 및 농염산 1.5 mL를 차례로 넣어 15분간 반응시킨 후 흡광도(A500 )를 측정하여 그 결과를 구한다. 프로안토시아니딘 등가물(mg PCE/g DW)로 표현한다.

1. 2. 6 에키나코사이드 및 버바스코사이드 함량 측정

Xu Mingjun 등의 방법을 참조하십시오. [22]. 시료액의 조제 : 시료 1.00g을 달아 추출용매로 80% 에탄올용액을 사용하고 고체:액체의 비율은 1:30, 60도에서 추출, 250W 초음파 장치를 40분 동안 방치하고 식힌 다음 4000 r에서 추출하고 1/min의 조건에서 10분간 원심분리하여 상등액을 모아 50 mL로 희석하여 둔다. 크로마토그래피 컬럼은 Alltima C18 컬럼(4.6mm×250mm×5μm), 이동상은 0.4% 수성 포름산(A)-아세토니트릴(B), 컬럼 온도는 25℃, 유속은 1.00 mL/min, 주입 부피는 10 μL, 검출 파장은 330 nm였다. 정량 분석은 외부 표준 방법으로 수행되었습니다.

1.2.7 시험관 내 항산화 활성 측정 시료 용액 준비: 무게

1. 60% 에탄올 용액을 추출 용매로 하여 시료 20g을 추출하였으며, 고체와 액체의 비율은 1:25였다. 초음파 장치에서 60도, 250W에서 40분 동안 추출했습니다. 냉각 후, 4500 r/min에서 15분 동안 원심분리하였다. , 상청액을 수집; 적절한 양의 상청액을 취하여 60% 에탄올 용액으로 희석하여 1mg/mL, 3mg/mL, 5mg/mL, 10mg/mL, 20mg/mL, 30mg/mL, 40mg의 액체 농도를 샘플링합니다. /mL, 테스트할 수 있습니다.

1) DPPH 자유 라디칼 소거 능력. Xu Chunping[23]의 방법을 참조하십시오. 시료용액 1{{10}} μL를 취하여 DPPH용액 250 μL를 넣고 잘 섞은 후 미량적정판에 넣고 실온에서 25분간 차광한 후 60% 에탄올용액을 사용한다. 블랭크 컨트롤로 흡광도(A517 )를 측정하고 다음 공식에 따라 DPPH를 계산합니다. 자유 라디칼 소거율. DPPH 자유 라디칼 소거율=1-A1-A2A0( ) × 100% 공식에서: A0는 시료 용액(공백 대조군) 대신 60% 에탄올 용액의 흡광도입니다. A1은 DPPH 용액과 혼합된 시료 용액의 흡광도입니다. A2는 DPPH 용액 대신 무수 에탄올의 흡광도입니다.

2) ABTS 자유 라디칼 소거 능력. Kong Yuting 등의 방법을 참조하십시오. [24]. ABTS의 모액은 과황산칼륨(최종농도: 2.45mmol/L)과 ABTS(최종농도: 7mmol/L)의 탈이온수 혼합용액을 사용하여 암실에서 25도에서 12시간 방치하였다. ABTS 모액을 사용하기 전에 흡광도(A734)가 ABTS 작업액인 0.7{{10}}±0.05가 되도록 탈이온수로 희석한다. 10 μL 샘플 용액(1 ~ 40 mg/mL)을 취하여 microtiter plate에 추가한 다음 200 μL ABTS 작업 용액을 추가하고 실온에서 30분 동안 어두운 곳에 보관하고 60% 에탄올 용액을 바탕 대조군으로 사용 , ABTS 자유 라디칼 소거율을 계산하기 위해 다음 공식에 따라 A734를 측정합니다. ABTS 자유 라디칼 소거율=1-A′1-A′2A0( ) × 100% 여기서 A′1은 검액과 ABTS 용액을 혼합한 후의 흡광도, A'2는 ABTS 용액 대신 탈이온수의 흡광도입니다.

1.3 데이터 분석

모든 데이터는 병렬로 3회 측정하였으며 결과는 (평균±표준편차)로 표현하였다. Origin 2019는 주성분 분석 및 체계적 군집 분석에 사용되었으며, SPSS Statistics 26은 분산 분석에 사용되었습니다. 피<0. 05 indicated a significant difference.