한국인의 유전적 분석에 기반한 레티놀에 대한 항자극 전략: 유전학적 하향식 접근법 Ⅱ

3.3. 제형의 항자극 효능; 인간 테스트

기반으로자극 방지 물질유전자 분석을 통한 in vitro 실험을 통해 검증된 AF(자극 방지 포뮬러) 글루코사민 0.1%, 트레할로스 2%, 엑토인 2%, 수크랄페이트 0.1%, 오메가-9 1% 및 {{8 }}t-부틸 사이클로헥산올 0.7%, 레티놀 포함. (활성 농도로 표준화) 먼저 AF의 효과를 정량적으로 검증하기 위해 7명의 개인을 대상으로 파일럿 연구를 수행했습니다. 테스트 기간 동안 개인에 대한 각 유형의 자극에 대한 자극 점수를 합산했을 때 대조군 레티놀 크림과 비교하여 AF는 레티놀로 인한 자극, 특히 표피 탈락(66.67% 감소), 화끈거림(68.42%)을 효과적으로 감소시키는 것으로 나타났습니다. ), 따끔거림(68.97%), 이러한 증상의 개선은 통계적으로 유의미했습니다(그림4ㅏ). 흥미롭게도 피실험자들은 10일 이후, 심지어 2주에 걸쳐도 상당한 박리와 건조함을 겪었음에도 불구하고 테스트 기간 동안 건조함을 느끼지 못했다고 주장했습니다. 이러한 관찰은 레티노산이 위약(18일)에 비해 감소된 각질층 교체율(15.8일)을 나타내어 치료 9일 후 피부 건조를 유발하고 18일까지 지속된다는 이전 연구와 일치한다.56]

그림 4. AF의 자극 효능을 묘사하는 개략도 및 플롯. 패널(ad)은 소규모 파일럿 연구(n=7)의 결과를 나타냅니다. 왼쪽 개략도는 TEWL 및 피부 발적 측정을 위해 평가된 얼굴의 테스트 일정 및 절차 및 테스트 영역(빨간색 점) 결과를 보여줍니다. (a) 시험 기간 동안 피험자가 경험한 자극 점수의 평균. (b) 각 시점의 전체 자극 점수. 과자극 점수"는 개인이 경험한 모든 유형의 자극 점수의 합을 의미한다. (C) 개인의 총 자극 점수. 시험 기간 동안 개인이 경험한 각 유형의 자극에 대한 총 점수는 평균이다. 전체 점수 "를 각 시점별로 합산했습니다. (d) 색도계와 테와메테이로 측정한 피부 발적 및 경표피 수분 손실(IEWL)을 개인별 증가 비율(%)을 평균화하였다. (e) 레티놀에 의한 자극 발생률. 테스트 인간 피험자는 자신의 피험자 5가지 기준에 따라 "레티놀 기반 크림이 자극적인지 여부"라는 이분법적인 질문을 받았습니다. 통계적 유의성을 조사하기 위해 카이제곱 검정을 수행했습니다. (p-값: 2.17906E-10): * p-값 ​​< 0.05** p-값< 0.001, AF,레티놀로 인한 자극에 대한 항자극 포뮬라; 오류 막대가 표시됩니다.

자극 방지 물질 얻기Cistanche 화장품 소재

다음으로 시간 경과에 따른 전반적인 자극 점수를 조사했습니다(그림 4b). 예상할 수 있듯이 자극은 레티놀 크림을 적용한 후 몇 분 이내에 관찰되었고 몇 시간 후에 감소했습니다. 우리는 AF가 특히 크림을 세 번째 적용한 후 자극을 효과적으로 감소시키는 것을 발견했습니다. 레티놀 크림 도포를 중단한 후에도 자극의 정도가 증가한 반면, AF의 항자극 효과는 유지되어 시술 후 레티놀로 인한 자극을 완화시켰습니다. 전반적으로 AF는 테스트 기간 동안 개인의 총 자극 점수를 58.3% 감소시켰습니다(그림 4c).

7일째에 TEWL과 발적을 측정했습니다(그림 4d). AF는 TEWL의 증가와 레티놀에 의해 유발된 발적을 모두 감소시켰습니다. 발적의 평균 증가(a*)는 AF의 경우 8.31%, 대조군의 경우 8.31%였습니다. 피부 혈관 확장의 임상적 특징인 피부 발적은 염증의 지표이다[57]. 이전 연구에서는 레티노이드가 섬유아세포에서 MCP-1 및 IL-8의 방출에 의해 매개되는 피부 염증을 유발하는 것으로 나타났습니다. 이전 섹션에서 볼 수 있듯이 레티놀이 피부 혈관 확장의 주요 동인인 대식세포(IL-4R의 과발현)를 활성화한다는 점은 주목할 만합니다[9].

TEWL 분석에서, AF에 기초한 레티놀 크림은 피험자 개별적으로 TEWL을 19.07% 증가시켰고, 대조군 레티놀 크림은 TEWL을 42.54% 증가시켰습니다. 이러한 임상적 관찰은 레티노이드가 쥐와 인간의 생체 내에서 일시적으로 TEWL의 증가를 유도한다는 이전 보고서와 유사합니다[42,58]. 비록 통계적 유의성은 낮았지만 AF가 TEWL과 홍조 증가에 대한 완화 효과를 기대할 수 있습니다.

또한 반경이 1mm인 팁이 있는 algometer를 사용하여 압력-통증 임계값을 측정했습니다(그림 S2, 보충 자료 참조). 건선 환자의 민감한 피부는 정상인에 비해 욕창 역치가 감소한 것으로 보고되었습니다[59]. 레티놀 크림 치료 전과 후 개인의 역치 차이를 평균화했습니다. 레티놀은 압력-통증 역치(PPT)를 감소시켰고, AF는 대조군에 비해 감소된 PPT를 유의하게 증가시키는 것으로 관찰되었습니다. 이는 TRPV1에 대한 AF의 항염증 및 길항 효과에 의해 매개되는 것으로 보입니다. 이전 연구에서는 신경성 염증이 피부 침해수용기의 기계적 감작과 매우 관련이 있으며[60], 기능성 TRPV1이 결여된 마우스는 유해한 기계적 자극에 대해 약화된 기계적 통각과민을 나타냄을 보여주었습니다[61]. 한 인간 임상 연구는 또한 TRPV1 길항제(V116517)가 다양한 조건에서 피부의 PPT를 상당히 증가시키는 것으로 나타났습니다[62].

독립군에서 AF의 항자극 효과를 확인하기 위해 27세에서 50세 사이의 남성 44명과 여성 47명으로 구성된 모든 인간 피험자를 그룹화했습니다. 실험 대상자들은 자신의 주관적인 기준에 따라 "레티놀 기반 크림이 자극적인지 아닌지"라는 이분법적인 질문을 받았습니다. 이 반응 비율은 AF의 항자극 효과를 도출하기 위해 일반 레티놀 크림을 사용한 173명의 개인을 대상으로 한 1차 대규모 임상 평가의 반응 비율과 비교하였다. 레티놀 유발 자극의 발생률을 계산하고 비교했습니다 (그림 4e).

일반 레티놀 크림을 사용한 그룹에서는 발생률이 64.43%인 반면, AF-레티놀 크림을 사용한 그룹에서는 발생률이 21.35%로 65.80% 감소한 것으로 나타났다.

3.4. 레티놀 유발 자극에 대한 다유전자 위험 예측 모델

AF의 항자극제가 관련 유전자에서 스크리닝됨에 따라 다중 위치 레티놀 유발 자극의 누적 유전 효과를 평가하기 위해 다유전자성 위험 예측 모델을 구축했습니다. |D'| 기반의 LD 분석 후 선별된 26개의 유의한 SNP를 사용하여 다유전자성 위험도 예측 모델을 구축하였다. 및 SNP 사이의 r2 값(한 SNP의 대립유전자가 다른 SNP의 대립유전자와 유전되거나 상관되는 정도에 대한 계수).

Then, the risk scores of all 159 samples were visualized. The test subjects of the second large-scale clinical test were arbitrarily categorized into three groups: high (>75, 31명), 중간(65–75, 33명), 저위험 점수(<65, 27 individuals) (Figure S3, see Supplementary Materials). As characteristics of retinol-induced irritation in each group, the high-risk score group exhibited dryness and desquamation after the last third treatment of retinol compared to the other groups (Figure S4, see Supplementary Materials). This result supports our hypothesis that skin barrier disruption with increased TEWL plays an important role in retinoid-induced irritation, as SLS exhibited similar clinical features and anatomical changes [63].

그림 5a에서 볼 수 있듯이 고위험 점수를 가진 그룹은 다른 그룹 중에서 가장 자극을 경험한 참가자로 구성되었습니다. "소양증"은 다른 그룹에 비해 고위험 점수 그룹에서 가장 지배적인 유형의 자극이었습니다. 고위험군 참가자는 레티놀 투여 1일째에 가려움증을 가장 많이 경험하였고 시간이 지남에 따라 가려움증의 정도가 점차 감소하였다. 고위험 점수 그룹은 히스타민 및 비만 세포 매개 시스템과 관련된 알레르기 유사 증상을 경험하는 것으로 보였습니다(그림 S4, 보충 자료 참조).

Figure 5. Bar plots illustrating polygenic risk score model and validation. 3300 IU retinol cream with AF to 91 individuals lest subjects were categorized into three groups: high-risk score (>75, 31명), 중간 위험 점수(65-75, 33명), 저위험 점수(<65,27 individuals) (a) irritation score of each type of irritation for three risk score groups. The scores for types of irritation of individuals during the test period were summed and averaged by risk score groups. (b) The total score during the test period. (c) Comparison of the occurrence rate of irritation in each risk-score group. The dichotomous question of whether retinol cream is irritant: Y/N was asked to test subjects. In the first clinical evaluation, retinol without AF was given. Retinol with AF was given in the second clinical evaluation.

테스트 기간 동안 총 점수는 저위험, 중위험 및 고위험 점수 그룹에 대해 각각 6.370 및 10.161로 계산되었습니다(그림 5b). AF의 효능은 polygenic risk score model에 따라 조사되었다.

결과는 AF가 레티놀로 유발된 자극을 완화시켰으며, 효능은 다유전자성 위험 점수 모델을 사용하여 예측할 수 있음을 입증했습니다(그림 5c).

결과적으로, 이러한 실험 결과 및 관찰은 AF의 항자극 효과를 입증할 뿐만 아니라 개인의 유전 정보를 기반으로 레티놀 유발 자극에 대한 감수성을 추정하여 적절한 레티놀 용량을 제안하는 것이 적용 가능함을 시사하며, 최종적으로 순응도가 높은 환자에게 가장 최적화된 사용 프로토콜.

3.5. 추가 고려사항 급성 대 만성 자극?

앞서 언급한 바와 같이, 레티놀에 민감한 개인에게서 급속한 화끈거림과 따끔거림, 가려움증, 급속 확산 부종 및 발진을 포함하는 알레르기 유사 반응이 관찰되었습니다. 몇 분, 때로는 몇 초 안에 일어나는 이러한 반응은 주로 케라티노사이트나 섬유아세포[9] 또는 T 세포, B 세포 또는 상보적 활성화가 주로 관련됩니다. 피부 장벽 파괴가 자극의 주요 원인이라는 것은 부인할 수 없지만, 즉각적으로 발생하는 급성 자극을 완전히 설명하지는 못합니다.

1차 임상 평가에서 피험자의 약 5%가 위에서 언급한 격렬하고 심각한 반응을 경험하고 시험에서 제외되는 것으로 관찰되었습니다. 그러나 인종, 성별, 연령에 따른 레티노이드 과민증에 대한 자세한 조사는 이루어지지 않았으며, 아시아인 인구가 이러한 반응에 더 취약한 것으로 보고되어 있어 빠른 유발 자극에 대한 고려가 필요합니다. 레티노이드 기반 제품의 추가 개발. 우리의 인체 실험 결과는 신경성 염증 또는 유사한 즉각적인 메커니즘이 레티놀 유발 자극에도 관여한다는 것을 시사합니다. 작열감과 자통은 세 그룹 모두에서 몇 분 이내에 각 레티놀 처리에서 우세하게 관찰되었으며 시간이 지남에 따라 억제되었습니다.

여기에서 고려해야 할 몇 가지 사항이 있습니다.

1. 앞서 보고된 바와 같이, 레티놀은 레틴알데히드(레티날) 및 레티노산으로 전환되어 RAR 또는 RXR 결합이 관여하는 생체이용률을 가질 수 있습니다.

2. 그러나 피부에서 레티노이드의 항상성은 매우 엄격하게 조절되고[64], 역설적으로 레티놀이 in vitro 및 ex vivo에서 retinoic acid로 전환된다는 것이 실험적으로 입증되지 않았다[65,66].

3. 레티놀 치료 시 섬유아세포 또는 각질세포는 RAR과 레티노산의 상호작용을 통해 IL-1 또는 IL-6을 생성하여 몇 분 안에 주변 피부 면역 체계를 활성화합니다. 전환되어야 합니다.

이러한 고려 사항을 바탕으로, 몇 분 이내의 급성 자극이 히스타민-비만 세포 시스템 또는 신경성 염증에 의해 즉각적으로 유발될 수 있으며, 이는 결과적으로 광범위하고 광범위한 염증을 유발하여 장기적인 자극으로 이어질 수 있다는 것이 더 합리적으로 보입니다.

4. 결론