Chinese Materia Medica Ⅱ의 지문기술 연구진행 및 응용

1.2 전기화학적 지문

전기화학은 피험 물질의 전기화학적 성질과 원리를 바탕으로 한 간단한 분석 방법으로, 비용이 저렴하고 민감도가 높으며 소모품이 거의 필요하지 않다[19]. 그러나 이 방법에는 특정 한계가 있으며 현재 테르펜(예: Angelica sinensis), 플라보노이드(예: Scutellaria baicalensis), 알칼로이드(예: Aconite) 및 안트라퀴논(예: 대황과 같은) 전기화학 반응을 겪을 수 있습니다.

Wu Diet al. [20]은 전기화학적 지문을 사용하여 Scutellaria baicalensis Georgi의 최적 추출 과정을 확립하여 한약재를 합리적으로 사용하는 좋은 방법을 제시했습니다. Shi Huihuiet al. [21]은 Belousov-Chabotinsky (BZ) 반응 화학 진동 기술을 사용하여 실험 결과에 온도, 회전 속도 및 첨가된 약재 수의 영향을 조사하고 합리적인 실험 조건을 확립하여 Magnolia biondii Pamp의 전기화학적 지문을 얻었습니다. ., Magnolia biondii의 품질 관리를 위한 새로운 방법을 제공합니다. Zou Guihuaet al. [22] Codonopsis pilosula (Franch.) Nannf의 비선형 전기화학적 지문을 확립했습니다. 및 겐티아나 마크로필라 폴(Gentiana Macrophylla Pall). 두 약재의 전기화학적 지문은 시각적으로 서로 다르며, 이는 더덕과 겐티아나 마크로필라를 구별하는 간단하고 효과적인 방법으로 사용될 수 있습니다. Dai Hongxiaet al. [23]은 성장 기간이 1년, 2년, 3년인 Angelica sinensis (Oliv.) Diels 20개 배치에 대해 전기화학적 분석을 수행했습니다. 주성분 분석과 결합하여 서로 다른 성장 기간에 Angelica sinensis의 전기화학적 지문 및 진동 매개변수(진동 유도 시간, 최대 전위, 진동 수명, 최대 진폭, 정지 전위 및 주기 수 포함)가 크게 다른 것으로 나타났습니다. 이는 다양한 시기에 당귀를 식별하는 기초로 사용될 수 있습니다.

CHINESE MATERIALMEDICAL HERB CISTANCHE HPLC 지문

1.3 크로마토그래피 지문

1.3.1 박층 크로마토그래피

박층 크로마토그래피는 서로 다른 화학 성분에 대해 동일한 흡착제의 서로 다른 흡착 용량에 의존하여 분리를 달성하는 크로마토그래피 방법입니다. 한약 식별에 가장 일반적으로 사용되는 방법으로 조작이 쉽고 장비가 간단하며 감도가 좋고 비교 가능성이 높으며 특이성이 강하고 발색이 용이하다는 장점이 있습니다. 약재의 진위 여부는 박층판에 얼룩이 있는지 여부에 따라 판단할 수 있습니다. 반점의 색의 깊이와 크기는 약재의 품질을 어느 정도 반영할 수 있다[24]. 현재 고성능 박층 크로마토그래피(HPTLC)는 단순성, 정확성, 저비용, 고효율 및 신속성으로 인해 한약 제품을 정성적, 정량적으로 식별하기 위해 고성능 액체 크로마토그래피(HPLC)를 대체하는 데 자주 사용됩니다. HPTLC 지문은 분해능이 더 좋고, 더 짧은 시간에 약물의 활성 성분을 합리적이고 정확하게 추정할 수 있습니다[25]. 그러나 영향을 미치는 요인(습도, 온도 등)이 많아 HPLC에 비해 결과의 재현성이 떨어집니다. Loescheret al. [26]은 HPLC와 HPTLC를 사용하여 Calendula officinalis 추출물을 분석한 결과, HPTLC보다 HPLC가 정량 분석에 더 적합하다는 것을 확인했습니다.

이 효과에 대응하여 Li Xiangjun et al. [27]은 온도의 영향을 줄이기 위해 냉장고나 밀봉된 온도 조절 장치에서 현상 실험을 수행하고 습도를 조절하기 위해 현상 실린더의 한쪽 끝에 다양한 비율의 황산을 첨가하는 것을 포함하여 일련의 해당 솔루션을 만들었습니다.

중국 재료 의료 허브 CISTANCHE HPLC LABLE

Patilet al. Catsia tora Linn의 석유 에테르 추출물의 HPTLC 지문을 확립했습니다. 그 결과 잎, 씨앗, 꽃에는 각각 10종, 7종, 11종의 성분이 함유되어 있는 것으로 나타났다. 이 방법을 사용하면 Catsia tora Linn의 진위 여부를 확인할 수 있습니다. Xiao Honghuaet al. [29]는 질량 분석법과 결합된 박층 크로마토그래피를 사용하여 Cimicifuga foetida L.에서 크로몬, 유기산 및 트리테르페노이드 사포닌의 박층 크로마토그래피 지문을 확립하고 16개 배치에 대해 유사성 분석, 클러스터 분석 및 주성분 분석을 수행했습니다. Cimicifuga의 품질 관리를 위한 기초를 제공하는 5개 소스의 Cimicifuga 샘플입니다.

Guzelmericet al. [30] Matricaria chamomilla L.의 활성 마커인 apigenin{10}}glucoside의 HPTLC 지문을 개발하기 위해 전개 용매로 에틸 아세테이트-포름산-아세트산-물(30:1.5:1.5:3)을 사용했습니다. 이는 카모마일 품질 평가의 주요 지침으로 사용될 수 있습니다. Bazylkoet al. [31]은 Galinsoga parviflora Cav에서 5가지 플라보노이드 화합물, 즉 타게토이드, 케르세틴, 플라보노이드, 카페인산 및 클로로겐산의 HPTLC 지문을 확립했습니다. 이 방법은 Galinsoga parviflora를 식별하는 데 사용할 수 있습니다. Ethanolicet al. [32] Acacia catechu (L. f.) Willd의 에탄올 추출물의 지문을 확립했습니다. HPTLC를 사용하여 추출물 내 루틴과 퀘르세틴의 정량 평가를 간단하고 신속하게 수행했습니다. Agatonovic-Kustrinet al. [33]은 HPTLC를 사용하여 Pyrethrum parthenium (L.) Smith, Matricaria chamomilla L. 및 Calendula officinalis L.의 잎 및 꽃 추출물 중 apigenin, Matricaria 및 bisabolol을 정량 분석하고 이를 DPPH 방법과 결합하여 항산화 물질을 비교했습니다. 이러한 구성 요소의 용량. 이 방법은 간단하고 빠르며 신뢰할 수 있고 저렴하며 식물 추출물의 항산화 활성을 스크리닝하는 데에도 사용할 수 있습니다.

1.3.2 HPLC 방법 HPLC는 한의학에서 다양한 화학 성분을 검출하는 보편적인 분석 방법입니다.

고압, 고감도, 고효율 및 자동화 등의 장점으로 인해 한의학에서 화학 성분의 검출에 널리 사용됩니다 [34]. 이에 연결 가능한 UV 검출기, 다이오드 어레이 검출기(DAD), 전기화학 검출기, 증발광 검출기 등 모두 대체할 수 없는 우수성을 보여준다.

Qiaoet al. [35]는 감초 Glycyrrhiza uralensis Fisch의 에틸 아세테이트 추출로 얻은 페놀성 화합물을 분리하기 위해 역상 × 역상 종합 2차원 액체 크로마토그래피(RP × RP 2DLC)를 사용했습니다.

40분 이내에 311개의 화합물이 검출되었으며, 21개의 알려지지 않은 화합물의 구조가 질량분석법을 통해 1차적으로 특성 분석되었으며, 그 중 8개가 감초에서 처음으로 발견되었습니다. 결과는 RP×RP2DLC/MS 시스템이 복잡한 한약 추출물의 분리와 천연물의 정성 분석에 좋은 효과가 있음을 보여주었습니다. Peng Lianget al. [36]은 Gynostemma pentaphyllum (Thunb.) Makino의 10 배치의 플라보노이드 성분을 분석하여 Gynostemma pentaphyllum의 HPLC 지문을 확립하고 11개의 공통 특성 피크를 보정했습니다. 유사성 분석 결과, Gynostemma pentaphyllum 지문의 10 배치는 기준 스펙트럼 대비 가장 높은 유사도가 0.989, 가장 낮은 유사도가 0.128로 나타나 서로 다른 원산지의 Gynostemma pentaphyllum의 플라보노이드 성분이 유사함을 알 수 있습니다. 유형이지만 내용에 있어 상당한 차이가 있었습니다. Sunet al. [37]은 Bupleurum chinense DC의 화학 성분의 유사성을 분석하기 위해 HPLC-DAD 방법을 사용했습니다. 및 B. scorzonerifolium Willd. 두 가지가 각각 12개의 공통 플라보노이드 피크와 4개의 사포닌 피크를 갖고 동시에 각각 6개의 독특한 플라보노이드 피크와 5개의 사포닌 피크를 가지고 있음을 처음으로 발견했습니다. 결과는 이 방법이 Bupleurum과 Bupleurum chinense의 화학 성분의 차이를 합리적이고 효과적으로 반영할 수 있음을 보여주었습니다. 둘 사이의 상관관계는 좋지 않습니다. 따라서 Bupleurum chinense는 임상 실습에서 주의해서 사용해야 합니다. 그 외 여러분. [38]은 쯔양 녹차 10개 배치에 함유된 10종의 생리활성 갈산, 클로로겐산, 카페인, 카테킨을 정량 분석했습니다. 개발된 HPLC 지문은 간단하고 신뢰성이 높습니다. Li et al. [39]는 석류 껍질의 HPLC 지문을 확립했습니다. 그들은 15개의 특징적인 피크를 선택하고 석류 껍질 10개 배치의 유사성을 0.968로 평가했습니다. 또한, 이에 함유된 푸니칼라긴, 갈산, 카테킨, 클로로겐산, 카페산, 에피카테킨, 루틴, 엘라그산을 분리, 정량분석하여 석류껍질의 진위여부 및 품질관리를 위한 신뢰성 있고 효과적인 방법을 제공하였습니다. Sumathyet al. [1]은 Ixora chinensis Lam의 메탄올 추출물의 화학적 조성을 결정하기 위해 HPTLC 및 가스 크로마토그래피-질량 분석법(GC-MS)과 결합된 HPLC를 사용했습니다. HPLC 분석에서는 비오친 A, 미리세틴, 케르세틴, 루틴, 다이드제인 및 포르모노네틴이 존재하는 것으로 나타났습니다. HPTLC 지문에서 우르솔산이 발견되었습니다. GC-MS에서는 24가지 식물화학 성분이 발견되었습니다. 이러한 정성적, 정량적 결합 방법을 통해 Ixora chinensis Lam의 품질과 안정성을 쉽게 평가할 수 있습니다. Geet al. [40]은 Radix Angelicae Pubescentis의 UHPLC-DAD 지문을 확립하고 Radix Angelicae Pubescentis에 포함된 쿠마린과 페놀산을 정량적으로 분석했으며 Q-TOF-MS(Quadrupole-Time of Flight Mass Spectrometry)를 사용하여 활성 성분을 정성적으로 식별했습니다. 그들은 9개의 페놀산, 30개의 쿠마린, 41개의 몰약과 아데노신 화합물을 발견했습니다. 그들은 판별 분석 방법을 결합하여 서로 다른 지역의 Radix Angelicae Pubescentis 32개 배치를 효과적이고 신속하게 구별했습니다. 이 방법은 Radix Angelicae Pubescentis의 품질 관리에 대한 새로운 아이디어를 제공합니다.

CISTANCHE 사양 목록

Yanget al. [41]은 각각 Xiaoyanlidan 정제의 HPLC 지문과 질량 분석 지문을 얻기 위해 초고성능 액체 크로마토그래피(UPLC)-DAD 검출기와 ESI-MS 기술을 사용했습니다. 그들은 Xiaoyanlidan 정제 샘플 113개를 분석하여 39개의 피크를 얻었는데, 그 중 26개는 Quassia에서, 9개는 Andrographis Paniculata에서, 4개는 Rhizoma Cynoglossi에서 나왔습니다. 유사성 화학측정 방법과 PCA를 사용하여 그들은 5가지 중요한 구성 요소가 4-메톡시-5-하이드록시페로세팔로스토몬, 안드로그라폴라이드, 디하이드로안드로그라폴라이드, 네오안드로그라폴라이드 및 로즈마린산이라는 것을 확인했습니다. 그들은 Xiaoyanlidan 정제의 품질을 개선하고 평가하기 위해 체계적이고 포괄적인 지문을 확립했습니다. 팬 외. [42] Lophatherum gracile Brongn.에서 플라보노이드 글리코사이드의 HPLC 및 UPLC 지문을 확립하고 새로운 플라보노이드 C-글리코사이드 루테올린 6-C- -D-글루쿠론산-(1→2){{19 }}처음으로 D-피라노글루코사이드. 그들은 또한 플라보노이드 플라보노이드와 플라보노이드 하이드록시플라보노이드라는 두 가지 화합물의 광학 이성질체를 처음으로 발견했습니다. 그들은 1차원 및 2차원 핵자기공명 및 질량분석법을 사용하여 구조를 구별하고 결정했으며 Lophatherum gracile Brongn의 품질 관리를 위한 새로운 방법을 제공했습니다. Tshibanguet al. [43]은 박층 크로마토그래피, 핵자기공명, 질량분석법을 결합한 HPLC-DAD를 사용하여 Garcinia kola Linn.의 주요 바이플라보노이드 화합물인 GB1, GB2, GB-1a 및 플라보노이드를 효과적으로 분리하고 그 구조를 확인했습니다. , 이는 의약품 제제의 일상적인 분석 방법으로 사용될 수 있습니다. Zhaoet al. [44]는 Andrographis faniculata (Burm. f.) Nees의 HPLC-UV-MS 지문을 확립하고 Andrographis faniculata에 함유된 andrographolide와 dehydroandrographolide를 정량적으로 결정하고 유사성 분석과 PCA를 결합하여 Andrographis faniculata 10개 배치의 차이를 평가했습니다. 이 방법은 Andrographis faniculata의 품질 관리를 위한 기초를 제공합니다.

Ahmedet al. [45]는 HPLC를 사용하여 Commiphora wightii (Arn.) Bhandari 수지의 지문을 얻고 이에 함유된 trans- 및 cis-sterolone을 정량 분석했습니다. 동시에 이 방법은 Commiphora wightii 수지 22개 배치와 불순물이 섞인 수지 9개 배치를 효과적으로 구별할 수 있어 Commiphora wightii 수지의 진위 여부를 확인하는 방법으로 사용할 수 있습니다.

2 생물학적 지문

생물학적 지문은 분자 수준에서 유전자 서열 분석 방법을 사용하여 게놈 지문, 단백질 지문[60], DNA 지문[61]을 포함하는 한약재의 지리적 분포와 변화를 구별하고 분류하는 것입니다. 현재 한약의 생물학적 지문에 대한 연구는 화학적 지문에 비해 적은 편이다. 가장 일반적으로 사용되는 방법으로는 폴리아크릴아미드 겔 전기영동(PAGE), 무작위 증폭 다형성 DNA 분자 마커 기술(RAPD), 중합효소연쇄반응 등이 있습니다.

(PCR) 및 기타 방법.

Liu Li 외.[62] Panax notoginseng (Burk.) f를 효과적으로 식별하기 위해 PCR 및 클러스터 분석과 결합된 RAPD 마커를 사용했습니다. H. Chen, Panax 인삼 CA Mey., 화기삼 Panaxquinquefolium L. Fan Wei et al. [63]은 처음으로 Eupolyphaga sinensis Walker, Bombyx mori Linnaeus 및 Scolopendra subsidies mutilans L. Koch의 SDS-PAGE 단백질 지문을 확립하여 이 세 가지 의약 물질을 식별하는 신뢰할 수 있고 효과적인 방법을 제공했습니다. Wei Yiconget al. [64]는 이중 부위 특이적 프라이머를 설계하고 다중 PCR을 구축했습니다. 두 가지 의약 물질인 Houttuynia cordata Thunb의 신속한 동정. 그리고 Gymnotheca chinensis Decne.는 두 종을 동시에 양성적으로 동정하여 혼합 여부를 판단할 수 있다. 왕 푸 외. [65]는 한약인 Zanthoxylumbungeanum Maxim을 정확하게 식별하기 위해 ITS2(internal transcribed spacer 2) 서열을 DNA 바코드로 사용했습니다. 그리고 그 향신료 Zanthoxylumbungeanum Maxim.은 한약 Zanthoxylumbungeanum과 그 향신료 Zanthoxylumbungeanum을 식별하는 기초를 제공합니다.