장 질환이 있는 쥐의 장내 미생물에 대한 Cistanche Tubulosa 수성 추출물

1. 소개

장내미생물은 주로 장내강과 점막층에 군집을 이루고 물질과 에너지 교환, 변형 등의 과정을 통해 숙주와 상호작용한다[1]. 이는 식이와 같은 환경 메시지를 유전 및 면역 신호와 통합하여 결과적으로 숙주의 신진대사, 면역, 신경계 및 감염에 대한 반응에 영향을 미치는 신호 허브입니다[2]. 일반적으로 장내 세균총과 숙주 사이에는 역동적인 균형이 있습니다. 그러나 장내세균 불균형은 건강/질병 균형, 면역 장애 및 다양한 질병에 변화를 가져올 수 있습니다[3]. 장내 미생물총의 적당한 변화는 숙주에게 허용됩니다. 그러나 이는 여전히 박테리오파지, 박테리오신 및 산화 스트레스와 같은 다른 악화 요인의 변화를 증폭시킬 수 있는 기회를 제공할 수 있습니다[4].

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이전 연구에 따르면Cistanche tubeulosa의 에탄올 추출물중국 전통 약초인 CT(CT)는 쥐의 장내 미생물 구성을 조절할 수 있으며[5], CT의 총 배당체는 무질서한 장내 미생물을 조절합니다[6]. 주로 타마릭스종의 뿌리에 기생하는 시스탄체종은 '사막의 인삼'이라고도 불리며, CD(Cistanche Deserticola)와 CT(Cistanche tubeulosa)의 줄기로 구성된 강장제가 한약재로 사용된다[7] ]. 항산화 물질인 CT 페닐에탄올 배당체(PHG)의 주요 화학 성분[8, 9]은 생식 기능 장애를 개선하고[10] 간 성상세포 활성화를 억제하며 TGF의 신호 전달 경로를 차단하는 것으로 밝혀졌습니다{{6} }/ SMAD [11], 쥐의 소 혈청 알부민 유발 간 섬유증을 예방합니다 [12]. CT를 구성하는 100여 가지 성분 중 다당류 역시 함량이 풍부한 중요한 물질 중 하나이다[13, 14]. 이전 연구에서는 C. Deserticola 다당류가 멜라닌 세포에서 멜라닌 생성을 유도하고, 산화 스트레스를 감소시키며, 쥐의 항산화 및 항염증 과정을 조절하여 인지 기능 장애를 완화하고[16], OGD/RP 유발 손상으로부터 PC12 세포를 보호한다는 사실을 입증했습니다. ],생체 내에서 에키나코시드 흡수를 향상시킵니다., 장내 미생물총에 영향을 미칩니다[18].

프로바이오틱스(Probiotics)는 건강상 이점이 있고 적절한 양을 투여했을 때 위장관 내 미생물 균형을 유지하는 살아있는 비병원성 미생물입니다[19]. 이는 대식세포, 자연 살해(NK) 세포, 항원 특이적 세포독성 T 림프구의 활성화와 계통 특이적 및 용량 의존적 방식으로 다양한 사이토카인의 방출을 특징으로 하는 비특이적 세포 면역 반응을 향상시킬 수 있습니다[20]. 프로바이오틱 균주는 TJ 조절을 통해 장 상피의 특성을 개선하며, 특정 프로바이오틱 균주는 점액 발현을 조절하여 점액층의 특성에 영향을 미치고 장 면역 체계를 간접적으로 조절하는 것으로 나타났습니다[21]. 유산균(LAB)과 비피도박테리움(Bifidobacterium) 계통은 다양한 분야에서 사용되는 주요 프로바이오틱스입니다[22-26]. 건강상의 이점은 다양하며, 항산화 능력은 건강 관련 기능에서 중요한 요소입니다[27]. 프로바이오틱스는 금속 이온을 킬레이트화하여 금속 이온이 산화를 촉매하는 것을 방지할 수 있습니다[28, 29]. 또한 항산화 효소의 발현을 증가시키고[30, 31], 항산화 활성을 갖는 다양한 대사산물을 생산하고[32, 33], 항산화 신호 전달 경로를 중재하고[34-36], 활성 산소종(ROS)과 활성산소를 생성하는 효소를 조절할 수 있습니다. 산화 스트레스에 대한 장내 미생물의 반응 [37]

최근 연구에 따르면 CD의 다당류는일부 젖산균의 성장을 자극합니다., 이는 인간의 건강에 도움이 될 수 있습니다 [38]. 그러나 CD의 다당류 함량은 CT와 다르며[7, 39], 이러한 차이는 장내 미생물에 다른 영향을 미칠 수 있다. 또한, CD 다당류는 NRF2/HO{4}} 경로를 활성화하여 산화 스트레스를 감소시킬 수 있지만[15], 단일 다당류의 효과는 CT에서 여러 구성의 전체 효과와 다를 수 있습니다. 따라서 CT 수용성 추출물이 장내 미생물에 미치는 영향을 정확하게 정의할 필요가 있다. 또한 PHG는 산화 스트레스에 저항할 수 있으며[40] Keap1/Nrf2/HO{10}} 경로를 활성화하여 지질다당류 매개 염증 반응을 억제할 수 있습니다[41]. 따라서 CT 수성 추출물의 효과를 결정하는 것은 큰 가치가 있습니다. 또한, 수성 CD 추출물의 특정 성분이 산화 스트레스와 장내 세균총에 미치는 영향은 산화 스트레스에 대한 저항성이 장내 세균총 변화와 상관관계가 있을 수 있음을 시사합니다.

위에서 언급한 주제에 대한 지식의 공백을 메우기 위해 우리는 장내 세균총 장애가 있는 쥐의 장내 미생물에 대한 CT 수성 추출물의 효과를 조사했습니다.목이러한 결과는 CT가 장내 세균총을 변화시키고 장내 산화 스트레스에 대한 저항성을 부여하는 가능한 메커니즘에 대한 귀중한 정보를 제공할 것입니다.

2. 재료 및 방법

2.1. 실험동물.

무게가 18~22g인 총 18마리의 SPF 등급 수컷 C57BL/6J 마우스를 신장 의과대학 실험 동물 센터에서 라이센스 번호 SCXK(신규) 2018-0003로 구입했습니다. 그들은 표준화된 조건(12시간 명/암 광주기, 온도 23 ± 2도, 습도 55 ± 5%) 하에서 우리에 보관되었습니다. 동물에게 상업용 사료(무질소 추출물 51%, 조단백질 25%, 조지방 4.6%, 조회분 6.5%, 조섬유 4.0%, 수분 8.9%)와 수돗물을 먹였습니다. 국립 보건원(National Institutes of Health)의 실험 동물 관리 및 사용 지침에 설명된 권장 사항에 따라 동물을 치료했습니다.

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2.2. 수성 추출물의 추출.

Hotan Dichen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd.에서 제공한 건조된 C. tubeulosa를 분쇄하여 분말화하고, 입자 크기가 2{{1{12}}}} 내지 40 메시인 과립을 제조하였다. 선택된. 추출 조건은 고액비 1:19, 온도 80 도, 마이크로파 시간 6분, 초음파 시간 16분, 마이크로파 출력 400W, 초음파 출력 400W로 하였다. 수성추출물의 주요성분 함량을 HPLC(Agilent 1260 Infinity II, California, USA)로 측정하였다. 즉, 표준물질인 에키나코사이드(0.2 mg/mL)와 액티오사이드(0.2 mg/mL)를 50% 메탄올에 용해시켜 대조물질 용액으로 하였다. 그런 다음, CT 수추출물 1g을 50% 메탄올 100mL에 용해시키고 30분간 방치하였다. 추출 용액을 250W, 35kHz에서 10분간 초음파 처리한 후 12000rpm/min으로 원심분리했습니다. 상층액을 0.45μm 미세다공성 필터막으로 여과했습니다. 기준 물질 용액과 여액은 다음 조건에서 HPLC로 검출되었습니다: 필러로 옥타데실 실란 결합 실리카겔, 이동상 A로 메탄올, 이동상 B로 0.1% 포름산. 컬럼의 온도는 30°C로 설정되었습니다. 정도, 검출 파장은 330 nm로 설정되었고 주입량은 10 μL였습니다.

2.3. 실험.

적응 1주일 후, 18마리의 쥐를 무작위로 6개 그룹으로 나누었습니다: A(중간 용량의 CT 수성 추출물을 첨가한 정상), B(CT 수성 추출물을 첨가하지 않은 정상), C(수성 추출물을 첨가하지 않은 모델), D( 고용량 CT 수성 추출물이 첨가된 모델), E(중간량 CT 수성 추출물이 첨가된 모델), F(저용량 CT 수성 추출물이 첨가된 모델). 그룹은 다음과 같이 처리되었습니다 : 정상 그룹은 생리 식염수로 흠뻑 젖었고, 모델 그룹은 세픽 심 (30 mg / kg, Shiyao Group Ouyi Pharmaceutical Co., Ltd., Shijiazhuang, China)과 생리 식염수로 흠뻑 젖었습니다. - 용량군은 세픽심과 CT수추출물 221.14 mg/kg을, 중간용량군은 세픽심과 수추출물 165.54 mg/kg을, 저용량군은 세픽심과 110.57 mg/kg을 관주하였다. 수성 추출물의. A 그룹에는 수성추출물 165.54 mg/kg을 담그고 세픽심은 첨가하지 않았다. Cefixime은 매일 정오에 투여되었고, 다른 물질은 매일 15:00 h에 투여되었습니다. 실험 동안 C, D, E, F군은 장질환의 모델상태를 유지하였다. 대변은 7일마다 멸균 수술대에 수집하여 -20도에 보관했습니다.

2.4. 생쥐 결장의 조직병리학적 관찰.

실험이 끝나면 마우스는 경추 탈구로 사망하고 결장 내용물은 멸균 수술대에 수집하여 -80 ℃에서 보관했습니다. 동시에 결장 조직 샘플을 10% 중성 포르말린에 고정했습니다. 그런 다음, 샘플을 에탄올의 농도 구배를 사용하여 탈수시키고, 자일렌을 사용하여 유리화시키고, 파라핀에 포매하고, 절편화하고, 헤마톡실린-에오신으로 염색하였다. 광학현미경을 이용하여 대장점막의 형태학적 변화를 관찰하고 비교하였다. 결장의 융모 길이와 선와 깊이를 측정하고 융모 길이 대 선와 깊이의 비율(V/C 값)을 계산했습니다(51).

2.5. DNA 추출 및 라이브러리 구축.

제조사의 프로토콜에 따라 EZNA ® Soil DNA Kit (Omega Bio-Tek, Norcross, GA, USA)를 사용하여 대변에서 DNA를 추출했습니다. DNA 품질은 형광계(QuantiFluor™-ST, Promega Corporation, USA)를 사용하여 측정했습니다. 16s rDNA의 V3-V4 영역에 있는 쌍을 이루는 프라이머는 해당 영역을 증폭하고 466bp DNA 단편을 생성하도록 설계되었습니다. 정방향 프라이머는 341F(-5-CCTACGGGNGGCWGCAG-3-)이고 역방향 프라이머는 806R(-5-GGACTACHVGGGTATCTAAT-3-)입니다. 각 PCR 부피는 25μL였으며, 2.5μL의 10× PCR 완충액, 2μL의 dNTP, 1μL의 각 프라이머 및 20-30ng의 주형 DNA를 포함했습니다. 그런 다음 인덱싱된 어댑터를 앰플리콘 끝에 부착하여 시퀀싱 라이브러리를 생성했습니다. 라이브러리는 QuantiFluor™ 형광계를 사용하여 검증되었으며 10nmol로 정량화되었습니다.

2.6. 16s rRNA 유전자 서열 분석 및 미생물 군집 분석.

Illumina 플랫폼(Illumina MiSeq)을 사용하여 2 x 250bp 쌍방향 데이터를 얻었습니다. 운영 분류 단위(OTU)는 97% 유사성으로 표준 클러스터링을 통해 Uparse 소프트웨어를 사용하여 얻었습니다. RDP 분류기의 순진한 베이지안 할당 알고리즘을 사용하여 OTU를 Greengene 데이터베이스 릴리스 13.5와 정렬하고 종 주석을 수행했습니다. 장내 미생물의 알파 다양성은 Shannon 및 Simpson 지수를 사용하여 계산되었으며, 그룹 간의 차이는 선형 판별 분석 효과 크기(LEfSe)로 분석되었습니다. 베타 다양성은 Bray-Curtis 차이점의 주요 좌표 분석(PCoA)을 통해 분석되었습니다. PICRUSt2는 장내 미생물군집의 미생물 대사 능력을 추정하는 데 사용되었습니다[42].

2.7. 통계 데이터 분석.

일원 분산 분석에는 SPSS 20을 사용했으며 실험 데이터는 X ± S로 표현되었습니다. X는 평균값을 나타내고 S는 표준편차를 나타냅니다.

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3. 결과

3.1. 8e CT 수성 추출물이 결장 형태에 미치는 영향.

대표적인 화합물(에키나코사이드와 액티오사이드) 및 CT 추출물의 농도는 HPLC로 검증되었습니다 (그림 S1). 장에 대한 수성 추출물의 효과를 확인하기 위해 CT 수성 추출물 처리 후 대장 융모의 길이와 함몰 깊이를 조사했습니다. 정상군과 고용량군(A, B, D)의 대장 융모는 길고 손가락 모양인 반면, 모델군과 저용량군(C, F)의 대장 융모는 짧고 대장 융모의 끝 부분이 짧았다. 융모가 부러졌습니다(그림 1). 따라서, 고용량 CT 수용성 추출물은 모델군 마우스에 비해 장 질환이 있는 마우스에서 대장 융모의 길이를 유의하게 증가시키고 함몰 깊이를 감소시켰습니다(P < 0.01). 대조적으로, 고농도군과 정상군 사이에 오목 깊이는 유의한 차이가 없었다(P > 0.05)(표 S1). 이러한 결과는 CT 수용성 추출물의 고용량 투여가 장 질환이 있는 쥐의 대장 내부 형태를 개선할 수 있음을 나타냅니다.

3.2. 8e 장내 미생물의 다양성에 대한 CT 수성 추출물의 효과.

우리는 결장 내부 형태학적 변화의 잠재적 원인을 조사하고 CT 수성 추출물 처리 후 장내 미생물의 변화를 조사하기 위해 16s rRNA 유전자 시퀀싱을 수행했습니다. 77,734에서 125,144까지의 평균 100,553개의 유효 태그가 원시 데이터에서 얻어졌습니다(표 S2). 이러한 태그는 4932개의 OTU로 클러스터링되었습니다(표 S3). 그런 다음 이러한 OTU를 기반으로 장내 미생물의 다양성을 분석했습니다. Shannon 및 Simpson 지수는 A 그룹(CT 수성 추출물이 있는 경우 정상)과 B 그룹(CT 수성 추출물이 없는 경우 정상) 사이에 차이가 없음을 보여주었습니다(그림 2(a)). 이는 세픽심 치료를 받지 않은 생쥐에서 CT 수성 추출물이 장내 미생물의 다양성에 추가적인 유익하거나 유해한 영향을 미치지 않았을 수 있음을 나타냅니다. 그러나 모델그룹(C)의 다양성은 일반그룹에 비해 감소하는 경향을 보였다. 고용량 및 중용량 CT 수용액 추출물을 처리한 마우스에서는 다양성 회복의 징후를 보인 반면, 저용량 CT 수용액 추출물을 처리한 마우스에서는 이러한 현상이 관찰되지 않았습니다(그림 2(a)). 한편, PCoA에서는 고용량(D)과 중용량(E)의 CT 수추출물을 투여한 정상군(A 및 B)과 장질환군이 모델군 및 장질환군에 비해 표본간 거리가 짧은 경향을 보이는 것으로 나타났다. 저용량 CT 수용성 추출물 보충제 그룹(F)(그림 2(b)). 이러한 결과는 CT 수성 추출물이 도움이 될 수 있음을 나타냅니다.장내 미생물의 다양성을 향상시킵니다.장 질환이 있는 쥐에서.

3.3. CT수추출물을 처리한 장내미생물총 조성의 변화.

미생물총 구성 프로파일을 여러 그룹 간에 비교했습니다. 문 수준에서 모델 그룹의 Proteobacteria의 상대적 풍부함은 다른 그룹의 것보다 높았습니다(그림 3(a)). Proteobacteria의 증가는 모델 쥐의 미생물군집이 cefixime에 의해 변경되었으며 Proteobacteria의 증가된 유병률이 무질서한 장내 세균총의 허브 마커이기 때문에 CT 수성 추출물이 장내 미생물군에 도움이 될 수 있음을 시사했습니다[43-45]. 또한, 속 수준에서는 정상 및 고용량 그룹에 비해 모델 그룹의 락토바실러스의 상대적 풍부도가 감소했습니다. 그러나 중간 및 저용량 그룹에 비해 증가했습니다 (그림 3 (b)). 이러한 결과는 고용량 CT 수용성 추출물이 Lactobacillus 속의 일부 박테리아의 성장을 촉진할 수 있음을 나타냅니다.

연구 그룹 간의 차별적인 미생물군은 LEfSe 분석에 따라 추가로 결정되었습니다. 이 분석에 따르면 cefixime 처리 후 Turicibacter, Alphaproteobacteria, Acidobacteria, Betaproteobacteriales 및 Chloroflexi의 상대적 풍부함이 크게 증가한 반면 Lactobacillus, Eubacterium_nodatum_ 그룹, Pseudonocardiales의 상대적 풍부함이 나타났습니다. , Christensenellaceae_R-7_군은 정상군에 비해 유의하게 감소하였다(그림 4(a)). 놀랍게도, 모델군에 고용량 CT 수추출물을 보충한 경우, Muribaculaceae, Lactobacillus, Kineosporiaceae, Eubacterium nodatum 군, Pedobacter의 상대적 존재량이 모델군에 비해 유의하게 증가하였다. 한편, Rhodobacter, Ruminococcaceae UCG_013, Roseburia, Ruminiclostridium_9 및 Candidatus Stoquefichus의 상대적 존재비는 모델 그룹에 비해 크게 감소했습니다(그림 4(b)).

3.4. CT수성추출물 치료와 관련된 장내미생물군의 기능.

PICRUSt2 소프트웨어를 사용하여 장내 미생물의 대사경로를 예측하였고, 정상군을 기준으로 다른 군의 변화를 분석하였다. Cefixime 처리 하에서 에틸벤젠 분해의 상대적 풍부함, 사이드로포어 그룹 비리보솜 펩타이드의 생합성 및 시토크롬 P450 경로에 의한 생체이물 대사가 증가했습니다. 고용량 및 중간 용량의 CT 수성 추출물로 처리한 후 상대적인 양이 정상 수준으로 돌아왔습니다. 한편, 시아노아미노산 대사 경로의 상대적 풍부함은 세픽심 치료 하에서 감소했습니다. 그러나 고용량 CT 수추출물 처리 후에는 증가했습니다. 또한 일반적으로 cefixime 치료 후 다양한 대사 경로의 변화는 정상군에 비해 유의미했습니다. 그러나 CT 수성 추출물을 첨가하면 과도한 변화를 방지할 수 있었습니다(그림 5).

4. 토론

결장의 형태는 성장, 소화 및 흡수, 면역 조절 및 장 손상 복구에 의해 변경될 수 있습니다 [46-50]. V/C 비율은 장의 소화 상태를 종합적으로 반영할 수 있으며 장의 소화 및 흡수 능력에 정비례합니다[51, 52]. 본 연구에서 융모 및 오목부 생검 및 통계 데이터는 고용량 수성 추출물이 결장 내부의 결함 있는 형태를 부분적으로 개선할 수 있음을 보여주었습니다.

수용성 추출물이 장내 형태를 어떻게 변화시키고 장내 미생물군에 영향을 미치는지 조사하기 위해 장내 세균총의 변화를 거꾸로 연구했습니다. 우리는 무질서한 장내 세균총의 허브 마커인 프로테오박테리아의 상대적 풍부함이 세픽심 치료를 받지 않은 경우에 비해 세픽심 치료를 받은 경우 증가한다는 것을 발견했습니다. 다른 허브 마커인 박테로이데테스(Bacteroidetes)와 페르미쿠테스(Firmicutes)의 상대적 풍부함은 큰 변화가 없었습니다.

그룹은 인간의 장에서 우세합니다. 박테로이데테스/피르미쿠테스의 비율은 마른 사람에 비해 비만한 사람에서 감소하는 것으로 나타났으며, 이 비율은 두 가지 유형의 저칼로리 식단을 섭취하는 사람의 체중 감소에 따라 증가하는 것으로 나타났습니다 [38, 41, 43-45, 48, 53, 54]. 한편, 비만과 관련이 있는 Turicibacter[55]는 다른 그룹에 비해 모델 그룹에서 유의하게 증가했습니다. 특히, 모델 쥐의 장내 미생물군 다양성은 CT 수성 추출물을 첨가함으로써 개선되었습니다. 우리는 다양한 치료를 받은 생쥐의 일부 특정 장내 세균에 주목했습니다. 예를 들어 Lactobacillus와 Muribaculaceae는 모델 그룹에 비해 고용량 CT 수추출물 처리 그룹에서 증가한 두 가지 주요 박테리아 속이었습니다(그림 4). 최근 연구에 따르면 CT 수성 추출물의 다당류는 상당한 양의

숙주 건강에 도움이 될 수 있는 일부 젖산균의 성장. 동시에, Muribaculaceae는 장수와 관련된 프로바이오틱 유기체입니다 [57].목ese는 CT 수성 추출물이 장내 미생물군을 개선하는 메커니즘이 프로바이오틱 유기체의 성장을 촉진하거나 보호하는 것일 수 있다고 제안했습니다. 주목할만한 또 다른 박테리아는 YE57 박테리아였습니다. 본 연구에서 고용량 CT 수성 추출물이 YE57 박테리아의 상대적 풍부함을 촉진했지만(그림 4), 이전 연구에서는 고농도 허브티 잔류물로 처리한 장에서보다 정상 장에서 그 풍부함이 더 높았다는 것을 발견했습니다. [58] XOS(자일로올리고당) [59]와 결합된 Bacillus licheniformis를 사용한 후 그 풍부함이 감소했습니다.목우리는 장내 미생물총에서 이 박테리아의 역할에 대해 더 많은 연구를 할 가치가 있습니다. 게다가, 이 연구에서 상대적으로 작은 샘플 수는 위양성 및 위음성 측정을 유발할 수 있으며, 확인된 박테리아 마커를 검증하기 위해 더 큰 샘플에 대한 향후 연구가 제안됩니다.

CT 수성 추출물 구성은 장 질환이 있는 생쥐의 장내 미생물의 구성 및 기능적 변화에 미치는 영향 때문에 중요할 수 있습니다. PHG는 CD와 CT에서 발견되는 일반적인 활성 성분이며, echinacoside는 CT에서 주요 PHG로 확인되었습니다[60]. 지난 수십 년 동안 echinacoside는 항노화 및 신경보호 효과, 심장 기능 개선, 고지혈증 및 고혈당 감소, 비만 유발 당뇨병 및 대사증후군 예방 등 많은 약리 활성을 갖는 것으로 나타났습니다 [53, 61-65] . 우리는 장내 미생물의 대사 경로 변화를 감지했습니다.목세픽심 처리는 에틸벤젠 분해 및 사이드로포어 그룹 비리보솜 펩타이드의 생합성과 관련된 박테리아의 농축으로 이어진 반면, 고용량 및 중간 용량의 CT 수추출물 처리는 이러한 변화를 완화할 수 있어 이 추출물이 관련 박테리아 군집을 조절했음을 나타냅니다. 이러한 기능에. 또한, 고용량 수성 추출물 처리 시 시아노아미노산 대사 경로와 관련된 박테리아 농축이 증가하고 모델 마우스에서 박테리아 농축이 감소한 것은 CT 수성 추출물이 시아노 아미노산의 대사를 촉진할 수 있음을 나타냅니다.목관련 대사산물의 변화는 이 수성 추출물에 약리학적 활성을 제공할 수 있습니다.

CT 수성 추출물이 장내 미생물의 구성과 기능을 변화시키는 메커니즘은 복잡하지만 잠재적 메커니즘에 대해 추측할 수 있는 몇 가지 단서가 있습니다. 유산균과 CT 수성 추출물 모두 산화 스트레스를 길항할 수 있는 것으로 보고되었습니다. 염증 중에 발생하는 산화 스트레스는 장내 미생물 다양성을 크게 감소시키고 특정 박테리아의 급증을 촉진하여 장 질환을 악화시키는 공통 요인입니다(4). 반대로, 활성산소종은 또한 질산염 및 테트라티오네이트 호흡을 통해 박테리아 그룹의 선택적 성장을 촉진합니다 [66-68]. 예를 들어 Enterobacteriaceae 계통의 박테리아는 염증 중 산화 조건 하에서 장내 세균총 구성의 변화로 인해 빠르게 성장할 수 있습니다 [69, 70]. 대부분의 살아있는 유기체는 산소 라디칼을 제거하기 위한 효소 방어, 비효소 항산화 방어 및 복구 메커니즘을 발전시킵니다. 그러나 이러한 천연 항산화 시스템은 일반적으로 살아있는 유기체의 산화 손상을 예방하는 데 충분하지 않습니다. 부틸화 하이드록시아니솔과 부틸화 하이드록시톨루엔을 포함한 여러 가지 추가 합성 항산화제가 산화를 감소시키는 데 널리 사용되어 왔지만 안전성에 의문이 제기되었습니다[72, 73]. 따라서 연구자들은 자연적으로 발생하는 물질에서 얻은 보다 안전하고 천연적인 항산화제를 찾는 데 주력했습니다. 산화 스트레스를 제거하는 다당류와 유산균의 능력으로 인해 장내 미생물군에 대한 CT 수성 추출물의 정확한 항산화 메커니즘을 결정하려면 향후 추가 조사가 필요합니다.

결론적으로 CT수추출물은장내 미생물총 개선장 질환이 있는 쥐의 경우 다양성을 촉진하여대사 변화 조절, 장내 미생물총의 구조를 재구성하는 연구 등을 연구하고 있으며, 이러한 결과는 향후 관련 의약품 개발에 참고자료가 될 수 있을 것이다.

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