HPLC에 의한 Cistanche의 Echinacoside의 결정
Mar 16, 2022
Cistanche에서 echinacoside의 HPLC 결정
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키워드:시스탄체,에키나코사이드
목표:
HPLC는에키나코사이드안으로시스탄체액체 질소 조건뿐만 아니라 자연적으로 공기 건조 된 상태로 분쇄하여 야생에서 비교합니다.시스탄체인위적으로 재배시스탄체.
방법: lc-20a HPLC 시스템(시마즈, 일본)을 사용하였다. 컬럼은 YMC 관성 ods-sp (4.6 mm × 150 mm,5 μ m; YMC Co Ltd, Japan); 이동상: 아세토니트릴-메탄올-1% 포름산(10:15:75); 검출 파장 334 nm; 유속 0.7 mg · ml-1. 컬럼 온도 30 °C.
결과: 상이한 치료 조건은에키나코사이드일반적으로 더 높은 수준의 콘텐츠에키나코사이드안으로시스탄체자연 공기 건조 조건 하에서 그 땅에서보다 액체 질소 하에서 분쇄; 야생의 유효성분 함량시스탄체인공 문화의 그것보다 훨씬 높았다.
시스탄체멸종 위기에 처한 종으로, Clostridium, Salix rubrum의 뿌리에 서식하는 기생 식물입니다. 중국에서는,시스탄체주로 내몽골, 닝샤, 간쑤 성 및 신장에 분포하며 "사막 인삼"에 대한 탁월한 평판을 얻었으며 이는 약용 가치가 큽니다. 그것의 주요 약용 성분은 페닐 에타노이드 배당체이며, 이는 다음과 같이 나눌 수 있습니다.에키나코사이드, 잎 응집력,시스탄체, 및 이들의 치환기에 의존하는 다른 것들. 그 중에서도,에키나코사이드개선 된 성 기능, 항산화 및 자유 라디칼 제거 효과가 있지만 일부 항 사멸 효과가 있습니다. 1980년대부터 페닐에타노이드 배당체의 분리를 위한 간단하고 신속한 방법을 제공하는 HPLC 기술이 천연물의 분리에 널리 사용되어 왔다. 의 내용을 분석하기 위해 HPLC 방법을 선택하였다.시스탄체, 야생의 주요 활성 구성 요소 및 인위적으로 재배시스탄체, 다른 성장 기간에, 합리적인 개발 및 활용을위한 과학적 기초를 제공시스탄체그리고 그것의 질의 효과적인 평가.
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기기 및 시약
시마즈, 일본 lc-20a HPLC 장치, lc-20at 탠덤 더블 플런저 펌프, CTO-20a 컬럼 오븐, 소다-20a UV Vis 이중 파장 검출기; 군산 kq-100 초음파 청소기; 아세토니트릴 (크로마토그래피적으로 순수한, 톈진 광푸 화학 연구소); 메탄올 (크로마토그래피적으로 순수한, 천진 광푸 화학 연구소); 포름산 (크로마토그래피적으로 순수한, 천진 광푸 화학 연구소); 증류수
제어:에키나코사이드, 내용≥ 98.43% (상해 Yuanye 생명 공학 Co., 주식 회사).
다섯 가지 샘플시스탄체: 다음과 같이 일년 동안 인위적으로 심어시스탄체, 인위적으로 심어 진시스탄체, 인위적으로 건조시스탄체야생의시스탄체, 그리고 인위적으로 삼 년 이상 심어시스탄체.
방법 및 결과
크로마토그래피 조건의 결정
측정된 피크를 분리하기 위해에키나코사이드다른 물질로부터의 LC 크로마토그램에 있어서, 펌프 압력 및 시간표를 적당한 범위 내로 제어할 수 있을 뿐만 아니라, 크로마토그래피 조건의 실험적 변형이 수행되었고, 이동상으로 최적화 실험을 한 후에, 온도가 높을수록, 체류 시간이 짧아지고 농도가 낮아진다는 결론을 내렸고, 펌프 압력이 짧아지고 체류 시간이 짧아지지만 피크 높이는 낮아져 측정에 불리했습니다. 이동상은 실온의 객관적인 조건과 펌프의 최대 베어링 압력에 따라 아세토니트릴-메탄올-1% 포름산(10:15:75), 검출 파장 334nm, 유량 0.7mL/min, 컬럼 온도 30°C로 최종적으로 결정되었으며, 이로 인해 날카로운 피크 모양과 성분의 양호한 분리로 풍부한 정보가 생성되었다.
열의 결정
YMC-Inertsil ODS-SP (4.6 mm × 150 mm,5 μ m; YMC Co Ltd, Japan).
실험액 준비
표준 솔루션
적절한 양의 에키네오사이드 표준물질을 정확하게 칭량하고 이동상 아세토니트릴-메탄올-1% 포름산(10:15:75)으로 스파이크하여 0.06 mg· ML - 1, 0.05 밀리그램 · ML - 1, 0.04 밀리그램 · ML - 1, 0.03 밀리그램 · ML - 1, 0.02 밀리그램 · ML - 1, 0.01 밀리그램 · ML - 1, 및 0.005 mg · ML - 1 솔루션에키나코사이드표준.
시험액의 제조
인위적으로 심어진 신선한 양의 적절한 양시스탄체(일 년 미만), 인위적으로 신선한시스탄체그리고 야생 신선한시스탄체액체 질소 하에서 모르타르를 사용하여 분말로 분쇄하였고; 또한, 상기 3개의 시스탄체를 적당량 블록으로 절단하고, 그늘 환기에서 자연적으로 공기 건조시키고, 건조 후, 분쇄하여 분말로 분쇄하였다. 인공 건조시스탄체그리고 삼 년 이상 야생 건조시스탄체분말에 직접 분쇄하였다. 상기에서 제조된 시스탄체 분말 0.5 g을 취하여 원심분리 튜브에 넣고, 이동상 25 ml를 첨가하고, 칭량하고, 30분 동안 담그고, 40분 동안 초음파 처리하고, 냉각한 다음, 다시 칭량하여 이동상으로 누락된 중량을 보충하고, 진탕 및 원심분리하고, 상층액을 0.45 μ M 미세다공성 여과막 여과를 위해 취하였다.
의 표준 표본에 대한 회귀 곡선의 플롯에키나코사이드
준비된 표준 샘플은에키나코사이드LC 장치에 별도로 주입하였고, 대조군의 농도(mg· L-1)을 농사로 사용하였고, 대응하는 피크 영역들을 표준 곡선을 플롯하도록 오디네이션하여, 회귀 방정식을 초래하였다: y=66,867 100x-46 360.83, R2=0.98637, 이는에키나코사이드0.1 ~ 1.2 μg에서 좋은 선형 관계.
토론
에키나코사이드의 주요 활성 구성 요소 중 하나입니다.시스탄체의 약리학적 효과의 화학적 기초를 잘 나타낼 수 있다.시스탄체, 의약 재료의 품질 평가와 약리학 적 효과가 일치하고 타당성을 향상시킵니다.시스탄체품질 평가.
다른 치료 조건은에키나코사이드일반적으로 더 높은 수준의 콘텐츠에키나코사이드안으로시스탄체자연 공기 건조 조건 하에서 그 땅보다 액체 질소 하에서 분쇄하십시오. 일반적인 공기 건조는에키나코사이드공기 건조 중에 소비되거나 변환되었을 수 있습니다. 유효성분 함량의 감소를 방지하고 효능을 보장하기 위하여시스탄체적절한 치료법을 선택해야합니다.
일관되게, 대부분은 인위적인 재배 환경이시스탄체성장 습관뿐만 아니라 품질에 차이가 없는 야생과 구별 할 수 없었고 수확량에만 중점을 두는 경향이 있었으며 품질을 분석하지 않았습니다. 본 연구는 인위적으로 재배된 양이시스탄체에키나코사이드야생의 그것보다 낮았다.시스탄체에키나코사이드. 가장 높은 것은 야생의 0.3360 %였다.시스탄체가장 낮은 것은 인공의 0.007 0 %였습니다.시스탄체. 따라서 활성 성분의 함량을 향상시키기 위해 재배 기술을 연구해야합니다.
품질시스탄체활성 성분의 양에 따라 다르며,에키나코사이드, 이는 차례로 수확의 계절, 시간 및 방법과 강한 관계를 가지고, 그래서 수확시스탄체활성 성분의 축적 상태와 성장 및 발달 단계를 고려해야합니다. 품질과 수율을 모두 고려하십시오.
이 논문에서 언급 한 방법은 echinacoside를 결정하는 데 간단하고 정확하며 재현 가능하며 정확합니다. 유용한 경우시스탄체결심.
