Echinoside 억제 활동은 기억력 결핍을 개선합니다.
Mar 23, 2023
추상적인
의 많은 생물학적 활동에키노사이드 보고되었습니다. 이 연구에서 에키노사이드의 기억력 향상 활동. 에센셜 오일은 스코폴라민으로 처리된 실험실 쥐에서 평가하기 위한 것입니다. 오일 조성은 GC-MS/GC-FID 시스템으로 확인되었습니다. 쥐의 기억력은 Y자형 미로와 요골팔 미로로 실험하였다. 아세틸콜린에스테라아제의 효소 활성 및 분자 도킹 분석도 수행되었습니다. 총 44개의 서로 다른 화합물이 에키노사이드에서 확인되었습니다. Echinoside는 Y-maze 테스트에서 동물의 자발적 교대 성능을 향상시켰습니다. 또한 에키노사이드는 요골 팔 미로 테스트에서 스코폴라민 쥐의 작업 기억과 참조 기억을 크게 향상시켰습니다. 또한 시험관 내 아세틸콜린에스테라아제 억제 활성을 나타냅니다. 동시에 분자 도킹 방법을 통해 오일의 일부 화합물이 이론적으로 아세틸콜린에스테라아제와 상호작용할 수 있음이 밝혀졌습니다. Echinoside 개선 scopolamine - 쥐의 공간 기억 유도. 에키노사이드의 신경보호 효과는 항콜린에스테라아제 활성과 관련이 있을 수 있습니다. 따라서 에키노사이드는 알츠하이머병 및 관련 장애의 기억력을 향상시키는 보완 요법으로 사용될 수 있습니다. 그 중,담배 에키노사이드가 많이 함유되어 있습니다.
키워드:시탕슈; 메모리; 에키노사이드; 스코폴라민.
1. 소개
알츠하이머병(Alzheimer's Disease, AD)은 치매의 가장 흔한 유형으로 뇌 신경 손상으로 인한 심각한 인지 장애를 특징으로 합니다. 알츠하이머병 환자의 수는 2050년까지 전 세계적으로 1억 3,500만 명에 달할 것으로 예상되며, 치료제가 없는 질병이기 때문에 좌절감을 안겨줍니다. 이 질환의 주요 병리학적 특징은 뇌에 아밀로이드 플라크가 축적되고 신경원섬유매듭이 형성되는 것입니다. 산화 스트레스 및 염증과 같은 많은 다른 조건도 AD 환자에서 주목되었습니다. 질병의 주요 원인은 알려져 있지 않습니다. 그러나 알츠하이머병은 분명히 지속 불가능한 질병입니다. 따라서 환자의 죽음은 불가피하다. 현재까지 AD를 치료하기 위한 많은 치료 전략이 개발되었습니다. 그러나 질병의 진행을 멈출 수는 없습니다. 또한 알츠하이머병은 정신적인 문제도 겪을 수 있는 가족 구성원에게 큰 영향을 미치는 질병이다.
기억 상실을 포함한 인지 장애는 이 질병의 두드러진 임상 증상입니다. 한편, AD의 행동 증상은 AD 환자의 약 75-90%에서 관찰됩니다. 따라서 비인지적 증상도 심각하게 고려해야 한다. 무관심, 비정상적인 운동 활동, 불안, 우울증 및 불안은 AD 환자의 가장 흔한 증상입니다.
Scopolamine은 무스카린 수용체의 길항제입니다. 스코폴라민은 동물과 인간에서 기억력 상실을 포함한 인지 문제를 일으키는 것으로 나타났습니다. 따라서 스코폴라민 매개 치매 동물 모델은 신경 보호 특성을 가질 수 있는 약물을 스크리닝하는 데 사용되었습니다.
사진: Cistanche 추출물
현재 사용 가능한 항 AD 약물에는 다양한 부작용이 있습니다. 따라서 신경 보호 특성이 있고 명백한 부작용이 없는 천연 물질 또는 제품을 기반으로 하는 새로운 유형의 약물이 절실히 필요합니다. 그 중 일본의 한 생물학자는 지난 세기에 알츠하이머병에 대한 시스탄슈의 치료 효과를 연구하기 시작했습니다.
아세틸콜린(ACh)은 대표적인 신경전달물질입니다. 한편, 아세틸콜린에스테라아제(AChE)는 콜린성 신경전달에서 ACHE의 기능을 방해합니다. 항아세틸콜린에스테라제 약물은 AD 치료에 사용되었습니다. 많은 화합물의 AChE 억제 활동이 스크리닝되었습니다. 시간과 비용을 절약하기 위해 분자 도킹 연구는 약물 발견 프로세스에 광범위하게 통합됩니다. 도킹 연구는 두 분자가 상호 작용하여 안정적인 복합체를 형성하는지 여부를 평가하는 데 사용됩니다. 이 경우 분자 도킹을 사용하여 복합체 내 분자의 올바른 방향을 예측할 수도 있습니다.
Cistanche는 또한 항피로, 항종양, 부드러운 배변, 신장 강화, 간 보호 및 진정제 특성을 포함한 많은 생물학적 활동으로 인해 약용 식물입니다. 터키에서는 일부 품종이 신장 질환 치료를 위한 허브티로도 사용됩니다.
사진: Cistanches 혜택
2. 재료 및 방법
2.1. 식물 원료 및 추출물의 증류
본 연구에 사용된 식물종은 cistanche tubulosa였다. 식물 재료는 신장 허탄에서 수확되었습니다. 에키노사이드의 유효 추출물은 일련의 물리화학적 추출에 의해 얻어졌다.
2.2. 가스 크로마토그래피(GC-FID) 분석
Echinoside는 GC-FID/GC-MS 시스템으로 특징지어졌습니다. HP의 Agilent 5973N GC-MS 시스템과 6890 GC가 GC-FID 분석에 사용되었습니다. 이 시스템에는 화염 이온화 검출기(FID)가 장착되어 있습니다. 시스템 조건은 다음과 같습니다. 시스템에서 사용되는 운반 가스는 헬륨입니다. 크로마토그래피는 3{{10}} m x 0.25 mm id 및 0.25 μm의 막 두께를 갖는 HP-5 MS 컬럼에서 수행되었습니다. 오일은 2in n-헥산으로 100배 희석됩니다. 1.0 μL 오일을 비분할 방식으로 주입했습니다. 인젝터 온도는 250도이고 유속은 1.3mL/분이었다. 분석 과정은 다음과 같다: GC의 오븐 온도는 2분 동안 70도에서 유지한 후 10도/분의 속도로 150도까지 점차적으로 증가시켰다. 그 후, 온도는 150도에서 15분 동안 일정하게 유지된 후 다시 5도/분으로 240도까지 상승했습니다. 휘발성 오일의 조성 백분율은 보정 계수 없이 GC-FID 피크에서 얻습니다.
2.3. 가스 크로마토그래피(GC-MS) 분석
동일한 컬럼을 GC-MS 분석에 사용했습니다. GC-FID와 GC-MS의 조건은 동일합니다. 보존 지수(RI)는 n-알칸(C8-40)을 기반으로 합니다. MS는 질량 범위가 35-425인 70eV입니다. 두 라이브러리(Wiley 7 및 Nist 98)의 RI 및 질량 분석법을 비교하여 화합물을 확인했습니다.
2.4. 동물 및 실험군
이 연구에서는 28마리의 암컷 Wistar 쥐(250-300g)를 사용했습니다. 온도와 빛(22도, 12-시간 주기)을 조절하는 시설에서 모든 동물에게 물과 사료를 무료로 제공합니다. 동물은 동물 복지의 원칙에 따라 온유하고 존중하는 태도로 대했습니다. Firat 대학의 지역 윤리 위원회가 연구를 승인했습니다. 실험동물은 각 군당 7마리씩 4개의 군으로 나누었다. 대조군에는 0.9% 생리 식염수를 주입했습니다. 2. Echinoside 처리된 동물 단독은 음성 대조군으로 0.9% 생리 식염수 중 1.5mg/kg Sco를 투여 받았습니다. 3. Echinoside 처리된 동물에 1% N. nuda ssp. 4. Echinoside 처리된 동물은 3% N. nuda ssp. 커널 에센셜 오일(Sco + NPT3%).
2.5. 흡입기 및 약물
N. nuda ssp로 치료하십시오. 흡입은 플렉시글라스 챔버(50 x 40 x 28cm)에서 수행됩니다. 먼저 휘발성 오일을 Tween 20(1%)으로 희석하고 쥐에게 노출시킵니다(200ul). 전자 기화기(Oregon Scientific WS113)를 사용하여 엑토사이드 추출물을 투여했습니다. 실험 동물은 하루에 21일(15분/일) 동안 에키노사이드 증기에 노출되었습니다. 일련의 실험이 끝나면 방을 에탄올(10%)로 적절하게 씻으십시오. 스코폴라민 하이드로브로마이드를 0.9% NaCl에 용해시키고 에키노사이드(1.5mg/kg)를 복강내 주사했습니다. 행동 테스트는 주사 후 30분 후에 쥐에게 수행되었습니다.
2.6. Y-미로 테스트
이 연구에서는 단기 기억을 평가하기 위해 y maze 테스트를 사용했습니다. Y자형 미로에는 3개의 팔과 중앙 영역이 있습니다. 우리는 팔을 A, B, C(길이 35cm, 너비 10cm)라고 명명하고 미로의 높이를 25cm로 설정했습니다. 실험 초기에 각각의 쥐를 같은 방향으로 향하도록 A 팔을 향한 중앙 영역에 배치했습니다. 쥐는 8분 동안 미로를 자유롭게 이동할 수 있습니다. 동시에 쥐가 들어간 팔을 조심스럽게 기록했습니다. 팔에 네 개의 쥐 발톱이 없다면 입구가 아닐 것입니다. 8분 후 쥐를 처리하고 미로에서 꺼내 에탄올(10%)로 세척하고 다음 동물을 위해 준비했습니다. 쥐가 3개의 팔을 모두 일렬로 움직일 때(ABC 또는 ACB 또는 CAB 등) 이것은 올바른 교체로 간주됩니다. 자발적 교대 비율은 (정확한 교대 수/총 항목 빼기 2)x100으로 계산됩니다.
사진: Cistanche의 알츠하이머병 치료 효과
3. 결과
3.1. 에키노사이드의 화학 성분
GC-ms/GC-FID 시스템을 검출에 사용했습니다. 분석 결과 44개의 화합물이 전체 에키노사이드의 90.1%를 차지하는 것으로 나타났습니다. 분석 결과 오일의 대부분은 4a- , 7a- 및 7a- -네기놀락톤(50.0%)으로 구성되어 있었습니다.
3.2. y 미로 작업에서 교대 동작
N. nuda ssp의 기능. 이 작업에서 자발적 교대 비율은 그룹 간에 유의미한 차이를 보였습니다. Y-maze 작업에서 echoladin 적용은 예상대로 대조군에 비해 자발적 교체 비율을 감소시켰습니다(p< 0.005). Sco vs Sco+NPT 1% (p< 0.05) and Sco vs. Sco+NPT 3% (p< 0.05) was obtained by Tukey postmortem test. Management of two doses of N. nuda SSPS. Echinoside significantly increased the anisodamine-induced spontaneous alternation rate in rats.
4. 토론
식물은 다양한 질병을 치료하기 위한 신약 생산을 위한 광범위한 공급원을 제공합니다. Echinoside는 식물성 제품에서 식물에 의해 합성되는 복잡한 2차 대사산물입니다. 에키노사이드는 항산화 및 항콜린에스테라제 효과를 포함하여 다양한 생물학적 활동을 합니다. 그러나 cistanche의 독특한 화학 물질은 환경 또는 기타 요인에 의해 쉽게 영향을 받습니다. 따라서 이러한 상황은 실험 결과의 검증을 제한할 수 있습니다.
에키노사이드 흡입은 또한 스코폴라민 처리된 해마에서 AChE 활성을 감소시켰습니다. 또한 분자 도킹 분석에서는 Cistanche의 화합물이 도킹 분포가 양호함을 보여주었습니다. perhydrofarnicyl acetone 및 trans-cis-eolactone과 같은 화합물과 AChE 효소의 상호 작용이 나타났습니다. 따라서 에키노사이드의 기억력 향상 효과는 콜린에스테라아제 억제 특성과 관련이 있을 수 있습니다.
5. 결론
이 연구에서 에키노사이드는 스코폴라민을 투여한 쥐의 기억력을 향상시켰습니다. 에키노사이드는 또한 아세틸콜린에스테라아제에 대한 억제 효과가 있습니다. 따라서 cistanche에는 기억력 향상 활동이 있습니다. Echinoside는 항콜린에스테라제 활성과 관련이 있을 수 있습니다. 에키노사이드는 알츠하이머병과 같은 신경 장애를 치료하는 데 사용할 수 있습니다.
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