뇌허혈 쥐에 대한 에키나코사이드의 효과
Aug 30, 2023
추상적인: 목적에키노사이드(ECH) 국소 뇌허혈이 있는 쥐의 선조체 세포외액에 있는 모노아민 신경전달물질에 대해 연구하고 ECH가 뇌에 미치는 신경보호 효과의 가능한 메커니즘을 탐구합니다. 방법 SD 쥐를 무작위로 대조군, 모델 그룹, ECH 고용량 및 저용량 그룹, 리구스트라진(CXQ) 그룹으로 나누었습니다. 각 그룹의 쥐에게 7일 동안 하루에 한 번씩 해당 약물이나 생리 식염수를 복강 내 투여했습니다. 투여 3일째에 프로브 슬리브를 뇌의 선조체에 매립했습니다. 마지막 투여 1시간 후, 국소뇌허혈(MCAO) 쥐 모델을 만들었다. 모델을 만든 후 즉시 미세투석을 실시했습니다. 투석액을 고성능 액체 크로마토그래피-전기화학 검출기(HPLC-ECD)에 주입하여 노르에피네프린(NE), 도파민(DA), 5-히드록시트립타민(5-HT), 3의 함량을 측정했습니다. ,4-디하이드록시페닐아세트산(DOPAC), 호모바닐산(HVA), 5-하이드록시인돌아세트산(HIAA)은 각 그룹의 선조체 세포외액에 존재합니다. 결과 대조군과 비교하여 모델군에서는 NE, DA, 5-HT의 수준이 증가하였고, 산성 대사산물인 DOPAC, HVA, HIAA도 증가하였다. 모델군에 비해 ECH 고선량군과 저선량군(30, 15mg·kg- 1·d{14}})과 CXQ군에서 6개 물질 함량이 감소했다. 결론 ECH의 신경보호 효과는 뇌허혈 후 모노아민 신경전달물질의 증가와 관련이 있을 수 있다.
시스탄체 파우더
핵심 단어: 에키노사이드; 뇌허혈; 선조체; HPLC-ECD; 모노아민 신경전달물질 및 대사물질
에키나세오사이드(ECH)는 페닐에타노이드 배당체로부터 분리, 정제된 유효성분입니다.시스탄체 데세르티콜라, 신장의 특별한 공장. 연구에 따르면 ECH는 항산화[1-2], 신경 보호[3-4], 노화 방지[5], 학습 및 기억력 향상[6-8]과 같은 신경 보호 효과가 있는 것으로 나타났습니다. Chen Hong 등의 결과. ECH가 파킨슨병에서 DA 뉴런에 보호 효과가 있음을 확인했습니다. [9]. 모노아민 신경전달물질은 신체의 생리활성을 조절하는 중요한 물질의 일종입니다.조직 내 함량은 신경전달물질 생합성, 방출, 흡수 및 불활성화 과정을 반영할 수 있습니다[10-11]. 현재, 뇌 허혈이 있는 쥐의 뇌에 있는 모노아민 전달체에 대한 ECH의 영향에 관한 관련 보고는 없습니다. 본 연구에서는 뇌 미세투석 기술을 사용하여 뇌허혈이 있는 쥐의 선조체 세포외액에서 ECH가 모노아민 신경전달물질 함량에 미치는 영향을 조사하고, 뇌 신경보호에 대한 ECH의 가능한 메커니즘을 예비적으로 탐구했습니다.
시스탄체 튜불로사 추출물 분말
1.재료
1.1 실험동물
SD 쥐, ♂, 체중 250~300g(신강실험동물센터에서 구입, 허가번호: 2009-0053).
1.2 약물 및 시약
ECH는 Peking University 약학대학 Tu Pengfei 교수가 기증했습니다(순도 95% 이상). 노르에피네프린(NE), 도파민(DA), 5-하이드록시트립타민(5-HT), 3,4-디하이드록시페닐아세트산(DOPAC), 호모바닐산(HVA)
5-히드록시 인돌 아세트산(HIAA)은 Sigma입니다. 주사용 테트라메틸피라진 염산염(CXQ, Harbin Sanlian Pharmaceutical Co., Ltd.); 인산아연 시멘트(Shanghai Medical Instruments Co., Ltd. 제품, 액체와 분말로 구성, 시간 혼합); 나트륨 1- 알킬 황산염(DIKMA); 구연산수화물(천진금과 정밀화학연구소); 구연산삼나트륨(Acros); 디소듐 에틸렌디아민 테트라아세트산(JTTakerChemicalco); 메탄올(DIKMA); 아세토니트릴(DIKMA); 뇌 미세투석 관류액은 염화나트륨 복합주사제(Beijing Shuanghe Pharmaceutical Co., Ltd.); 사용된 물은 모두 재증기수입니다.
1.3 악기
미국 BAS4100 쥐 뇌 정위 장치; CMA/12 프로브 및 프로브 슬리브; CMA/120 의식 동물 장치; CMA/402 마이크로 펌프; CMA/150 저온 시료 자동 수집기. Esa 5600A 주입 펌프; Esa 5600A 주입 펌프; Esa 542 자동 샘플 주입 장치; Esa의 CoulArray 전기화학 검출기; 유리질 탄소 작동 전극 및 Ag/AgCl 기준 전극; C18 컬럼(DIKMA, ODS5μm, 150mm × 4.6mm); CoulArraywin 크로마토그래피 워크스테이션(Esa사); 볼텍스 믹서(QL-861 유형); 데스크탑 산도 시험기(HANNA-211); 데스크탑 고속 원심분리기(XYJ-2 유형).
2.방법
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2.1 동물 분류 및 투여
30마리의 쥐를 무작위로 5개 그룹으로 나누었습니다: ① 대조군: 1ml · kg-1 · d-1 생리식염수; ② 모델군 : 생리식염수 1ml · kg-1 · d-1; ③ 모델+리구스트라진(CXQ) 30mg · kg-1 · d-1; ④ - ⑤ 모델+ECH 고선량 및 저선량군(ECHB, ECHS): 30, 15 mg · kg-1 · d-1; 각 그룹의 모든 동물은 7일 동안 복강내 주사를 받았습니다.
2.2 모델링 방법 및 미세투석
투여 3일째에 각 쥐를 캐뉼라로 매장하였다. 쥐를 10% 염소 수화물(3.5ml·kg-1)로 마취시키고 BAS4100 뇌 정위 장치에 고정시킨 후, GeorgePaxinos의 "쥐 뇌의 정위 지도"에 관한 탐침 카테터는 왼쪽 선조체(좌표 AP:+0.2mm; ML: - 3.0mm; DV: - 3.5mm)에 이식되었습니다. 마지막 투여 후 1시간 후에 쥐를 마취시키고, Yang Zanzhang[12]의 개선된 Longa 봉합법을 이용하여 쥐를 국소뇌허혈모델(MCAO model)로 만들었다. 대조군은 낚싯줄을 10mm만 삽입하였고, 그 외의 단계는 수술군과 동일하였다. 모델링 후 미세투석 프로브를 의식이 있고 자유롭게 움직일 수 있는 상태에서 삽입하고 링거 용액을 사용하여 μ 4도에서 뇌 미세투석액을 채취하고 20분에 투석액 튜브를 채취하였다. 각 투석액 튜브를 채취한 후 즉시 - 20도 냉장고에 보관하고, 투석 후에는 - 70도 냉장고로 옮겨야 합니다. 프로브의 회복률은 사용 전 측정하였으며, 이는 투석액 내 모노아민 신경전달물질의 농도를 환산하는 데 사용되었습니다.
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2.3 HPLC-ECD 분석
이동상 구성: 이동상에는 리터당 829ml의 0.15mol · L-1 구연산-구연산나트륨 완충액이 포함되어 있습니다. 0.1mol · L-1 이나트륨 EDTA 1ml; 메탄올 150ml; 나트륨{{10}} 알킬 황산염 0.283g. 이동상의 유속을 0.7ml · min-1으로 설정하고 컬럼 오븐의 온도를 28도로 설정합니다. 전기화학 검출기의 작동 전압은 각각 2, 3, 4개 채널을 갖춘 200mV, 400mV 및 600mV입니다. 이득은 2nA이다. 주입량은 25μl입니다. 0.025, 0.05, 0.1, 0.2, 0.5mg·L-1 구배 혼합표준용액으로 표준곡선을 그린다.
2.4 통계처리
실험 데이터는 x 필드 ± s로 표현되며 반복 측정 데이터는 SPSS13.0 통계 소프트웨어를 사용하여 분석됩니다.
그림 1-6는 쥐 선조체 세포외액의 NE, DA, DOPAC, HIAA, HVA 및 5-HT 수준의 변화를 보여줍니다. 뇌허혈 후 선조체 세포외액에 있는 모노아민 신경전달물질이 대사장애를 일으키며, 각 신경전달물질의 함량이 증가한 것을 그림에서 알 수 있다. 특정 범위 내에서는 허혈 시간이 길어질수록 증가가 더욱 뚜렷해집니다. 허혈 90분째에 선조체 세포외액의 DA와 NE 농도는 대조군에 비해 3배 이상 높았다. 대조군의 NE, DA, DOPAC, HIAA, HVA 및 5-HT 수치는 높은 수준에서 낮은 수준으로 감소했는데, 이는 왼쪽 총경동맥 결찰 후 좌뇌의 일시적인 허혈과 관련이 있을 수 있습니다. 그리고 프로브 삽입으로 인한 손상. 변화 곡선에서 ECH와 CXQ는 뇌허혈 후 DA, DOPAC, HIAA, HVA 및 5-HT의 최고 농도를 감소시킬 수 있으며, CXQ와 고용량 ECH는 더 분명합니다. 각 신경 전달 물질의 시간 경과 곡선이 하향 이동하는 것은 ECH가 뇌 허혈이 있는 쥐의 뇌에서 신경 전달 물질과 그 대사 산물의 증가를 억제할 수 있음을 나타냅니다.
그림 2 쥐의 선조체에서 DA의 세포외 수준에 대한 에키노사이드의 효과
그림3 쥐의 선조체에서 DOPAC의 세포외 수준에 대한 에키노사이드의 효과 그림4쥐의 선조체에서 HIVV의 세포외 수준의 에키노사이드의 효과
그림 5 쥐의 선조체에서 HVA의 세포외 수준에 대한 에키노사이드의 효과 그림 6 쥐의 5-HT 선조체의 세포외 수준에 대한 에키노사이드의 효과
4.논의
슈퍼맨 시스탄체목초—임프로기억이 있어요
【추가 요청】 이메일:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
뇌허혈로 인한 뇌 손상의 메커니즘은 복잡합니다. 뇌허혈의 경우 뇌의 모노아민 신경전달물질에 이상이 생겨 NE, DA, 5-HT의 함량이 현저히 감소한다. 뇌허혈이 심할수록 뇌조직 내 NE, DA, 5-HT의 함량은 낮아진다[13]. 뇌내 미세투석법을 통해 뇌허혈 기간 동안 세포외액에서 모노아민 신경전달물질의 함량이 증가하고, 허혈 기간 전체에 걸쳐 지속되며, 허혈 시간이 길어질수록 더욱 증가한다는 사실이 입증됐다. 실험 결과는 보고서 [14]와 일치했습니다.에키노사이드신장 특산 식물인 Cistanche Deserticola에서 분리, 정제된 페닐에타노이드 배당체의 유효성분입니다. 노화 방지, 학습 및 기억력 향상, 항뉴런 세포사멸 등 많은 신경 보호 효과가 있습니다.. 본 연구에서는 국내 첨단 뇌미세투석과 HPLC-ECD 검출기술을 접목하여 사전에에키노사이드뇌 허혈이 있는 실험 쥐의 선조체 세포외액에 있는 모노아민 신경전달물질과 그 대사물질에 대한 연구입니다. 결과는 ECH가 뇌허혈로 인한 선조체 세포외액의 모노아민 신경전달물질의 증가를 감소시킬 수 있고, 뇌허혈 조직의 손상을 개선하는데 더 나은 효과가 있음을 보여주었습니다.
