치주염 및 신부전 환자에서 치주 치료의 효과: 예비 연구 Ⅰ
Jun 25, 2024
추상적인:치주염 및만성 신장 질환둘 다야만성 염증성 질환몇 가지 일반적인 위험 요소를 공유합니다. 이 3-개월간 예비 연구는 비수술적 치주 치료가 치주염 및 신부전 환자의 임상적, 생화학적, 미생물학적 상태에 유익한지 여부를 명확히 하는 것을 목표로 했습니다.신부전중등도에서 중증의 치주염 환자를 두 병원에서 모집했습니다. 치료군은 비수술적 치주치료를 받았고, 대조군은 구강위생 교육만 받았다. 치료 후 1개월과 3개월 후에 결과 평가를 실시했습니다. 환자 수준 데이터를 분석하기 위해 비모수적 테스트가 사용되었습니다. 치주 부위 수준 평가는 Student t-test와 paired t-test로 분석되었습니다. 통계적 유의성은 p-값 < 0.05로 설정되었습니다. 총 11명의 대상자가 연구를 완료했습니다. 모든 원인에 의한 사망률은 그룹 간 유의한 차이가 없었으며,심혈관 사건, 감염 사건, 전신 매개변수 및 혈청 바이오마커. 대조군과 비교하여, 임상적 치주 지표, 치은열구액 인터루킨-1(IL-1) 수준, 치주 병원체는 치료군에서 유의한 개선을 보였습니다. 비수술적 치주치료는 신부전 환자의 전신 결과를 바꾸지는 못했지만 국소 미세환경을 바꾸었습니다.
키워드: 비수술적 치주치료; 신장 투석; 신부전
1. 소개
치주염은 세균 감염에 의해 치주 조직이 소실되는 만성 염증성 질환이다[1]. Porphyromonas gingi valis(P. gingivalis), Treponema denticola(T. denticola), Tannerella forsythia(T. forsythia)와 같은 치주병균은 치아 표면에 축적되어 국소적 염증 반응을 유발할 뿐만 아니라 전신적 염증 반응을 유발할 수 있습니다[2,3]. 치주 부위에서 유래하는 전신 염증성 사이토카인 생성의 유도는 심혈관 질환(CVD), 당뇨병, 만성 신장 질환(CKD), 류마티스 관절염, 만성 폐쇄성 폐질환(COPD) 등을 포함한 전신 질환의 중증도를 악화시킬 수도 있습니다. .[4].
CKD는 신장 기능의 손상 및 관련 합병증을 특징으로 합니다[5]. CKD의 가장 심각한 형태인 말기신장질환(ESRD)은 추정 사구체여과율(eGFR)이 1.73m2당 15 mL/min 미만이고 정기적인 투석이 필요한 환자로 정의됩니다[5,6]. CKD의 높은 유병률은 대만과 전세계의 재정 지출과 의료 시스템에 부담을 줍니다[7]. CKD는 특히 당뇨병 환자에서 CVD 위험을 증가시키는 지속적이고 만성적인 전신 염증과 관련이 있습니다[8]. 한편, CVD는 CKD 환자의 사망 원인 중 가장 흔한 원인이다.
치주염과 CKD 사이의 연관성은 지난 10년 동안 보고되었습니다[9,10]. 두 질병 모두 만성 염증 특성을 가지며 몇 가지 공통된 위험 요소를 공유합니다[10]. 인터루킨-1(IL-1 ), 인터루킨-6(IL-6), C 반응성 단백질(CRP) 및 종양 괴사 인자와 같은 증가된 전신 염증성 사이토카인- (TNF-)는 치주염에 기인한 것으로 이전 연구에 의해 문서화되었습니다[11,12]. 이는 혈관 내피 기능 장애 및 추가 심혈관 사건을 유발할 수 있습니다[13,14]. 최근 합의된 보고서는 치주 치료가 전신 염증 반응과 심혈관 사건 발생률을 감소시킬 수 있음을 시사합니다[13].
지금까지 비수술적 치주 치료 또는 전혀 치료하지 않은 ESRD 환자의 결과를 비교하는 제한적인 무작위 대조 임상 시험(RCT) 연구가 발표되었습니다[15,16]. 치주염의 개입과 CKD 합병증의 위험 사이의 관계에는 여전히 많은 불확실성이 존재합니다. 따라서 본 연구에서는 치주염과 ESRD 환자를 대상으로 비수술적 치주치료의 임상적, 생화학적, 미생물학적 효과를 알아보고자 하였다.
2. 재료 및 방법
2.1. 연구 설계
이는 2017년 9월부터 2019년 12월까지 타이베이 의과대학병원(TMUH) 및 TMU 산하 솽호병원(TMU-SHH)에서 3-개월간 진행된 파일럿 연구입니다. 포함된 참가자 할당을 위해 무작위 배정이 이루어졌습니다. 컴퓨터가 생성한 목록으로. 임상의와 연구 직원만이 그룹 할당, 즉 치료 그룹 또는 제어 그룹을 알고 있었습니다. 타이페이 의과대학 TMU-JIRB(N201604007)로부터 윤리적 승인을 받았습니다. 이 연구는 CONSORT 지침에 따라 헬싱키 선언에 따라 수행되었습니다.
2.2. 치주 참가자
예비 연구로서, 두 병원의 혈액투석과에서 정보를 잘 알고 동의서에 서명한 모든 혈액투석 환자를 대상으로 치과 검진을 받았습니다. 포함 기준은 다음과 같습니다: 최소 3개월 동안 일주일에 3회 혈액투석을 유지했습니다[17]. 20세 이상 20세 이상; 적어도 5개의 자연 유지 가능한 치아; AAP/CDC 기준에 따라 일반화된 중등도 내지 중증 치주염이 있습니다[18]. 제외 기준은 다음과 같습니다: 기준 상태에 대한 항생제의 영향을 방지하기 위해 지난 4주 이내에 항생제 치료 중 활성 감염이 있는 경우[19]; 치과 치료를 받을 수 없거나 전체 연구 과정을 이수할 수 없는 경우. 당뇨병이나 심혈관 질환과 같은 다른 전신 질환을 앓고 있는 환자는 본 연구에서 제외되지 않았습니다. 우리는 두 병원의 전자 기록에서 인구통계 및 의료 정보를 수집했습니다. 의료 정보에는 기준 혈압, 체질량 지수(BMI), 투석 기간, 과거 병력, 흡연 및 실험실 결과가 포함되었습니다.
2.3. 치주검사
참가자들은 기준 시점과 3개월 후에 전체 치주 검사를 받았습니다. 치료군에 대해서는 치료 후 4~6주 후에 추가적인 치주검사를 시행하였다. 다음 5가지 치주 매개변수가 수집되었습니다: 플라크 지수, 치주 탐침 깊이(PD), 치은 후퇴 깊이(REC), 임상적 부착 손실(CAL) 및 탐침 시 출혈(BOP). 플라크 지수, PD, REC, CAL 및 BOP에 대한 치아당 6개의 측정 부위가 기록되었습니다. 경험이 풍부한 치주 전문의 2명이 치주 검사를 위해 치주 탐침(PQ-W, Hu-Friedy, Chicago, IL, USA)을 사용했습니다.
2.4. 치주 중재
두 그룹의 피험자들은 기준선과 3개월 동안 데이터 수집과 구강 위생 교육을 받았습니다. 감염 예방을 위해 아목시실린(2g)을 치주검사 및 치료 예약 전에 처방하였다[20]. 치료 그룹에서 피험자들은 치은연상 및 치은연하 생물막과 치석을 제거하기 위한 표준 비수술적 치주 치료를 공인된 치주 전문의에게 받았습니다. 치주 상태의 재평가는 치료 후 4~6주 후에 실시되었습니다. 남아있는 깊은 치주낭에서 병인병원성 세균 수준을 근절하거나 감소시키기 위한 시도로, 치주낭 깊이가 5mm 이상 남아 있는 부위에 치은연하 미노사이클린 겔(Sun Star, 오사카, 일본) 전달을 수행했습니다[21].
2.5. 생화학적 검사
혈액 화학 분석을 위해 혈액 샘플을 채취했습니다. 혈청 및 치은열구액(GCF)의 고감도 CRP(hs-CRP), TNF-, IL-1, IL-6 및 Pentraxin 3(PTX3)을 포함한 염증성 바이오마커를 베이스라인과 치은열구액(GCF)에서 측정했습니다. 3-월 방문수 [22,23]. GCF 샘플은 Periopaper 스트립(HARCO Electronics, Irvine, CA, USA)을 사용하여 가장 깊은 치주 주머니에서 수집되었습니다. 이전 연구[24]의 방법에 따르면 샘플링 전 시험 부위를 자연 건조시킨 후 거즈로 격리시켰다. 첫 번째 종이 스트립은 5초 동안 치은연하 1mm 위치의 치은 주머니에 밀어 넣었고 타액의 오염을 방지하기 위해 즉시 폐기되었습니다. 두 번째 종이 조각을 선택한 부위에 30초 동안 삽입했습니다. 남은 종이 조각을 200-μL 인산염 완충 식염수 용기에 담그고 -80 ◦C에 보관했습니다. 일상적인 혈액 화학 검사는 병원의 중앙 실험실에서 분석되었습니다. 사이토카인 수준은 시판되는 키트(R&D Systems, Minneapolis, MN, USA)를 사용하여 ELISA로 분석되었습니다.
2.6. 미생물학적 분석
치은 연하 생물막은 두 그룹 모두 기준 및 3-개월 방문 시 멸균 치주 큐렛을 사용하여 가장 깊은 3개의 치주 부위에서 샘플링되었습니다. 그런 다음 치은연하 생물막 샘플을 TE 완충액에 현탁하고, 와동시키고, 초음파 처리했습니다. DNA는 치은연하 생물막 샘플에서 추출되었습니다. 치은 연하 생물막 샘플을 완충액 RDD 및 Benzonase와 혼합하고 37℃에서 30분간 배양한 후 Proteinase K로 분해하고 56℃에서 30분간 배양했습니다[25,26]. 그런 다음 Lysis Buffer에서 균질화했습니다. 제조업체의 지침에 따라 QIAamp DNA Microbiome Kit(Qiagen)을 사용하여 DNA 정제를 수행했습니다. 다음으로 Illumina에서 제공하는 프로토콜에 따라 16S rRNA 유전자 증폭 및 라이브러리 구축을 수행했습니다. Nextera XT Index 키트는 Illumina 시퀀싱 어댑터와 이중 인덱스 바코드를 앰플리콘 타겟에 추가하는 데 사용되었습니다. 시퀀싱 라이브러리의 정량화 및 품질은 QSep100 분석기(BiOptic Inc., 대만 신베이시)를 사용하여 확인했습니다. 마지막으로 라이브러리를 등몰 비율로 정규화 및 풀링하고 V3 화학을 사용하는 Illumina Miseq 플랫폼을 사용하여 시퀀싱했습니다.
2.7. 16. S rRNA 유전자 서열 분석
원시 판독의 전처리에는 cutadapt(v1.18)[27]를 사용하여 범용 프라이머 및 저품질 염기 제거가 포함됩니다. 그런 다음 R 환경에서 DADA2/phyloseq 워크플로를 사용하여 쌍을 이루는 읽기를 처리하고 분석했습니다. 추론된 앰플리콘 서열 변종(ASV)의 분류 할당은 최소 부트스트랩 신뢰도가 80인 SILVA 참조 데이터베이스(v132)를 사용하여 수행되었습니다[28]. ASV의 다중 서열 정렬은 DECIPHER(v2.8.1)를 사용하여 수행되었으며 계통수는 RAxML(v8.2.11)을 사용하여 구축되었습니다[29,30]. phyloseq(v1.24.2) [31]를 사용하여 하류 박테리아 군집 분석을 위한 phyloseq 개체를 생성하는 데 빈도 테이블, 분류 및 계통수 정보가 사용되었습니다. -다양성 지수는 phyloseq 패키지의 풍부도 추정 함수를 사용하여 계산되었습니다. R 패키지 GUniFrac은 그룹 간 커뮤니티 차이점(-다양성)을 결정하여 UniFrac 거리의 다양한 버전을 계산하는 데 사용되었습니다[32]. 미생물군 농축 분석은 LDA(Linear Discriminant Analysis) 효과 크기 방법을 사용하여 수행되었으며 GraPhlAn을 사용하여 분기도로 시각화되었습니다[33,34].
우리의 주요 결과는 모든 원인으로 인한 사망률, 심혈관(CV) 사건 및 감염 사건이었습니다. 사전 지정된 2차 결과에는 헤모글로빈 A1c(HbA1c), 심장 기능 및 말초 혈관 평가가 포함되었습니다. 또한, 치주 매개변수, 혈청/GCF 염증성 바이오마커 및 치은연하 미생물을 수집했습니다.
