Cistanche Deserticola의 추출 변수 및 건조 방법
May 24, 2024
Cistanche는 Cistanche Deserticola YC Ma 또는Cistanche tubeulosa(Schenk) 와이트오로반키아과(Orobanchiaceae) 식물의 비늘 모양의 잎이 있는 건조하고 다육질의 줄기Cistanche Deserticola YC Ma[1]. Cistanche Deserticola의 주성분은 페닐에탄올 배당체[2-4]입니다. 약리학적 연구에 따르면 다음과 같은 기능을 가지고 있는 것으로 나타났습니다.최음제, 면역력 향상, 그리고기억력 향상[4-9].
최근에는 한의학 추출에 반응표면법이 널리 활용되고 있다[{{0}}]. 반응표면법은 검출 정확도가 높고, 실험 횟수가 적으며, 함수 모델을 정확하게 예측할 수 있으며, 요인과 예측값 간의 관계를 반영할 수 있다는 장점이 있습니다[15-17]. 따라서 본 실험에서는 5가지 페닐에탄올 배당체 함량의 종합 점수를 반응값으로 사용하고 Design-Expert 8.0.6.1 소프트웨어를 사용하여 실험을 설계하고 Cistanche Deserticola의 추출 과정을 최적화하며 식별 및 식별을 위한 정보를 제공합니다. 품질기준 확립시스탄체 데세르티콜라.
현재 지수는에키네시아사이드와 베르바스코사이드 성분추출 및 가공 기술 분야의 뜨거운 연구 주제입니다.시스탄체 데세르티콜라. 중국 약전 2015년판에는 시스탄체 데저티콜라의 가공 방법을 “불순물을 제거하고 씻어서 적신 후 두껍게 썰어서 건조시키는 것”이라고 규정하고 있습니다. [1] 건조방법에 대한 명확한 규정은 없다. 따라서 본 실험에서는 Cistanche Deserticola를 가공하기 위해 일광건조, 그늘건조, 오븐건조(40도, 60도, 80도, 100도, 120도), 동결건조 등 8가지 건조방법을 사용하여, 이에 대한 이론적 근거를 제공하였다. Cistanche Deserticola의 건조과정.
안내에.
1 재료 및 도구
신선한 Cistanche Deserticola는 2018년 10월에 수확되었습니다. 원산지는 간쑤성 백인시 민친현 미탄향입니다. 간쑤 농업대학교 부교수 Guo Yehong은 비늘잎이 있는 다육질의 줄기인 Cistanche Deserticola YC Ma로 식별했습니다. 기준 물질 에키나세아사이드(배치 번호 82854-37-3, 질량 분율 98% 이상), 시스탄케아사이드 A(배치 번호 93236-42-1, 질량 분율 95% 이상), 베르바스코사이드(배치 번호 { {5}}, 질량 분율 98% 이상), 이소무라바신(배치 번호 61303-13-7, 질량 분율 98% 이상), 2'-아세틸 베르바스코사이드(배치 번호 94492-24-7 , 질량 분율 95% 이상)은 Chengdu Pu에서 구입했습니다. Feide Biotechnology Co., Ltd.; 포름산 및 메탄올은 크로마토그래피 등급(독일 Merck Company)이며; 물은 정제수이며, 기타 시약은 분석등급입니다.
Waters Acquity 액체 크로마토그래프, PDA 검출기, Empower 크로마토그래피 워크스테이션 및 4차 용매 관리 시스템; KQ-100E 초음파 세척기, Kunshan Ultrasonic Instrument Co., Ltd.
회사; AL104 분석 저울(Mettler-Toledo Instruments Co., Ltd.); LyoQuest-85 동결 건조기, Telstar, 스페인.
2 방법 및 결과
2.1 참조 용액 준비
적당량을 정확하게 계량하여에키네시아사이드, 시스탄체오사이드 A, 베르바스코사이드, 이소르바스코사이드, 및 2'-아세틸 베르바스코사이드 참조 표준물질을 첨가하고 70% 메탄올을 첨가하여 질량 농도를 1.04, 0.61, 0.63, 0.39 및 0.48 mg/mL의 혼합 참조 용액.
2.2 Cistanche Deserticola의 크로마토그래피 조건
워터스 대칭 C18(250mm×4.6mm, 5μm); 컬럼 온도 30도, 부피 흐름 1.0mL/분; 이동상은 메탄올-0.1% 포름산 수용액, 용출 구배: 0~12분, 29%~34% 메탄올; 12-40분, 34%-40% 메탄올; 30-35분, 40%-35% 메탄올; 35-40분, 30% 메탄올;
1-에키나코사이드 2-시스탄체 A 3-베르바스코사이드 4-이소액티오사이드 5-2'-아세틸액티오사이드
그림 1 혼합 참조(A)와 C. Deserticola 샘플(B)의 HPLC
2.3 시험용액의 조제
건조된 Cistanche Deserticola 분말 1g을 삼각플라스크(65-메쉬 체를 통과)에 정확하게 계량하고 50% 메탄올 50mL를 첨가한 후 질량을 측정하고 150W에서 40kHz로 초음파를 가하여 실온으로 식힙니다. , 그리고 그것을 얻기 위해 질량을 구성합니다.
2.4 선형관계 조사
위의 혼합 참조 용액 {{0}}.1, {{2{22}}}}.5, 1, 2, 4 및 8 mL를 10 mL에 넣습니다. 메스 플라스크에 70% 메탄올을 표시선까지 추가합니다. 10 μL를 정확하게 뽑아 "2.2"의 크로마토그래피 조건에 따라 측정합니다. 질량 농도는 가로좌표(X)이고 피크 면적은 세로좌표(Y)입니다. 선형 회귀를 수행하고 회귀 방정식은 다음과 같습니다: Echinacea Y=128 049 X -830 189, r=0.999 5, 선형 범위 10.4~832.0 ug/mL; 시스탄체사이드 AY=87 980 -447 963, r=0.999 8, 선형 범위 6.3-504.0 ug/mL; 이소무라바신 Y=92 831배당체 Y=79 207 X-304 428, r=0.999 4, 선형 범위 4.8~384.0 ug/mL.
2.5 방법론적 검토
2.5.1 정밀검사
항목 "2.1"의 혼합 참조 용액 20 μL를 취하여 6회 연속 주입하여 에키나세아사이드, 시스탄체사이드 A, 베르바스코사이드, 이소레바스코사이드 및 2'-아세틸버바스코사이드의 피크 면적을 측정합니다. RSD는 각각 0.23%입니다. , {{10}}.71%, 0.59%, 0.41%, 0.29%는 기기의 정밀도가 좋음을 나타냅니다.
2.5.2 반복성 시험
동일한 Cistanche Deserticola 검체 6개를 취하여 "2.3"항에 따라 시험용액을 조제하고 "2.2"항의 크로마토그래피 조건으로 검체를 주입하여 피크면적을 측정한다. 결과 에키네시아사이드, 시스탄체오사이드 A, 베르바스코사이드, 이소레바스코사이드 및 2'-아세틸 베르바스코사이드의 평균 질량 분율은 1.83%, 0.21%, 2.34%, 0.13% 및 {{15 }}.68%, RSD는 각각 1.32였습니다. %, 0.83%, 1.24%, 2.19%,
0.78%, 이는 해당 방법의 반복성이 우수함을 나타냅니다.
2.5.3 안정성 시험
에키네시아사이드, 시스탄체오사이드 A, 베르바스코사이드 및 이소레바스코사이드를 얻기 위해 0, 2, 4, 8, 12, 24 및 48시간에 동일한 시험 용액("2.3"에 따라 제조)의 안정성을 결정합니다. , 2'-아세틸 베르바스코사이드 피크 면적, RSD는 각각 0.58%, 0.21%, 1.58%, 1.46%, 2.19%로 시험 용액이 48시간 이내에 안정함을 나타냅니다.
2.5.4 시료 회수 시험
함량이 알려진 Cistanche Deserticola 시료 6개 1g을 취하여 일정량의 혼합참조용액(Echinaceaside 1.06 mg/mL, Cistancheoside A 0.86 mg)을 정확하게 첨가합니다. /mL, 베르바스코사이드 2.17 mg/mL, 이솔레바스코사이드 0.79 mg /mL, 2'-아세틸 베르바스코사이드 0.91 mg/mL), 70% 메탄올을 첨가하여 최대 50 mL로 만들고 "2.2"의 크로마토그래피 조건에 따라 샘플을 주입합니다. 측정된 평균 회수율은 각각 101.52%, 99.21%, 102.62%입니다. , 98.62%, 97.36%, RSD는 각각 1.64%, 1.95%, 0.87%, 1.59%, 1.13%로 샘플 회수율이 좋다.
시스탄체(Cistanche)는 신장에 영양을 공급하고 보호할 수 있는 잘 알려진 강장제 허브입니다. 한의학 이론에 따르면 시스탄체는 신장에 가장 좋은 약초입니다. 시스탄체에는 에키나코사이드, 액티오사이드, 플라보노이드가 풍부합니다. 시스탄체의 이러한 유효 성분은 신장 세포의 세포사멸을 감소시키고 신장 세포 증식을 증가시킬 수 있습니다. 따라서 Cistanche는 천연 신장 보충제입니다.
