유충 호르몬 유사 살충제인 Fenoxycarb에 대한 비표적 복족류 Physella Acuta의 유전자 발현 반응

Oct 23, 2023

살충제는 환경 문제입니다. 새로운 해충 방제 방법에 대한 연구는 비표적 유기체에 독성 영향이 낮거나 없는 화합물에 중점을 두었습니다. 청소년 호르몬(JH)의 유사체는 절지동물의 내분비계를 방해합니다. 그러나 비표적종에 대한 효과가 부족하다는 점은 확인이 필요하다. 이 기사에서는 JH 유사체인 Fenoxycarb가 수생 복족류인 Physella acuta에 미치는 영향을 분석합니다. 1주일 동안 동물을 0.01, 1, 100 ug/L에 노출시킨 후 RNA를 분리하여 역전사와 Real-Time PCR을 통해 유전자 발현을 분석했습니다. 내분비계, DNA 복구 메커니즘, 해독 메커니즘, 산화 스트레스, 스트레스 반응, 신경계, 저산소증, 에너지 대사, 면역계 및 세포사멸과 관련된 40개의 유전자를 분석했습니다. 유전자 중 3개(AchE, HSP17.9 및 ApA)는 1ug/L의 Fenoxycarb 존재에 대한 반응을 보였으며 나머지 유전자와 나머지 농도에서는 통계적으로 유의미한 반응이 없었습니다. 결과로부터 Fenoxycarb는 테스트된 시간과 농도에서 P. acuta의 분자 수준에서 약한 반응을 보인다는 결론을 내릴 수 있습니다. 그러나 면역과 관련된 유전자인 Aplysianin-A가 변형되어 장기적인 효과가 관련될 수 있습니다. 따라서 절지동물이 아닌 종에서 Fenoxycarb의 안전성을 장기적으로 확인하기 위해서는 추가적인 연구가 필요합니다.

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살충제 Fenoxycarb(IUPAC: 에틸 [{{0}}(4-phenoxy-phenoxy)ethyl] carbamate, CAS 번호 72490-01-8)는 다양한 해충을 방제하는 데 사용되는 카바메이트입니다. 작물 및 관상용 문화1. 이는 유충 호르몬을 모방하여 곤충의 성장을 조절하여 곤충이 성숙해지는 것을 방지합니다2. 그러나 다른 절지동물 3~5에서도 관찰되었습니다. 분자 수준에서 곤충의 세포 증식 억제와 세포사멸을 중재하고6 거미의 청소년 호르몬 합성에 관여하는 유전자를 상향 조절하는 것으로 관찰되었습니다5. 척추동물과 비표적 종에는 해롭지 않은 것으로 간주되어 곤충과 기타 절지동물에 영향을 미칩니다5,7-9. 실험 연못에 공중 살포한 후 24~48시간에 검출 수준(0.0004 mg/L) 미만으로 보고되었습니다10. 또한 0.20, 0.80, 3.2, 13 및 50 ug/L 브래킷의 명목 농도가 환경 수준을 예측하는 것으로 간주되었습니다11. 또한 Fenoxycarb는 물기둥에서 4.13일, 퇴적물에서 15일의 소산 시간(DT50)을 갖는 빠른 분해10로 인해 환경적으로 안전한 것으로 간주됩니다(PPDB 데이터베이스: http://sitem.herts.ac.uk/aeru /ppdb/en/Reports/304.htm) 1. 살포 드리프트, 유출 또는 배수로 인해 지표수에 도달할 수 있지만 적용되는 논밭에서 인접한 토지까지 이동 속도가 낮습니다13. EU에서는 금지되었지만 영국, 미국, 호주에서는 사용되고 있습니다. 유럽 ​​식품 안전청(European Food Safety Authority)은 사과와 배에 페녹시카브를 사용하는 것에 대한 포유류 독성학 및 소비자 위험 평가 분야에서 이를 우려할 부분이 없다고 간주했습니다14. 그러나 조류와 포유류, 토양 비표적 거대 및 미생물, 육상 비표적 식물에 대해서는 낮은 위험이 평가된 반면, 수생 무척추 동물에 대한 위험에 대한 데이터 격차가 있는 수생 생물에 대해서는 높은 위험이 식별되었습니다. 행동 양식과 가장 민감한 성장 단계14. 경구, 피부 또는 흡입 노출 시 독성이 낮은 것으로 간주되지만, 페록시좀 증식을 유도하여 마우스에서 폐 및 간 종양을 생성할 수 있기 때문에 발암 효과에 대한 제한된 증거가 있는 화학 물질로 분류되는 것이 제안되었습니다. 인간에게는 덜 민감함14. 이 때문에 페녹시카브는 수생 생물에 매우 독성이 강하고 암을 유발하는 것으로 의심됩니다. 척추 동물에서는 양의 생식에 아무런 영향이 관찰되지 않았지만15 일주일 동안 노출된 배양된 쥐의 대뇌 피질 뉴런에서 Fenoxycarb는 ATP 수준, 미토콘드리아 막 전위 및 포도당 소비를 상당히 감소시키는 것으로 설명되었습니다16. 또한 Xenopus laevis 난모세포에서 발현되는 쥐 뇌의 아세틸콜린에스테라아제와 니코틴성 아세틸콜린 수용체를 억제합니다17. 반면에, 일부 보고에 따르면 콜렘볼라 Yuukianura szeptyckii18의 알 생산과 부화율에 부정적인 영향을 미칠 수 있다고 합니다. 그러나 Folsomia candida에 대한 이전 연구에서는 그러한 효과가 나타나지 않았습니다. 마찬가지로, 새우 Neocaridina davidi를 10 ug/L3의 낮은 농도에 2주 동안 노출시켰을 때 탈피 및 몸 길이 성장 억제와 같은 부작용이 관찰된 반면, 게 Rhithropanopeus harrisii는 48 ug/L의 농도에서 지연 변태를 경험했습니다. 페녹시카브20. 이러한 결과를 종합하여 이 살충제가 생태계에 미치는 영향을 알기 위해서는 추가 연구가 필요합니다. 절지동물이 아닌 담수 무척추동물에 대한 Fenoxycarb의 영향에 대한 정보가 부족하지만, 이들에게는 무해할 것으로 예상됩니다. 그러나 무척추동물의 생리학, 특히 내분비계에 관한 지식이 부족하기 때문에 이러한 극단적인 사실을 확인해야 합니다. 이 연구의 목표는 담수 복족류인 Physella acuta(Draparnaud, 1805)에서 동물을 1주일 동안 노출시키고 전사 프로필을 다양한 관련 세포 경로를 포괄하는 배열로 분석하여 전사 수준에서 Fenoxycarb의 독성을 테스트하는 것입니다. Physa acuta라고도 알려진 민물 달팽이 Physella acuta는 자웅동체이며 국제적인 종입니다. 호수와 연못에 서식하며 성장하는 데 약 2주가 걸리는 알 덩어리에 알을 낳습니다. 부화한 새끼는 성체 단계에 도달하여 짝짓기를 하고 알을 낳을 때까지 2개월 동안 성장합니다. 이 종은 실험실에서 쉽게 배양되므로 복족류를 대표하는 독성 연구에 사용됩니다21,22. 최근에 우리는 이 종의 유전자 발현 수준에서 독성물질에 대한 반응을 연구하기 위한 어레이를 설계했습니다. 여기에는 34개의 유전자와 4개의 참조 유전자가 포함되었습니다. 또한 우리는 여러 세포 과정에서 전사 활성 수준의 변화를 분석하기 위해 일부를 포함하여 이를 40개의 표적 유전자로 확장했습니다. 9개 유전자의 서열은 이 종에 대해 처음으로 기술되었으며 바이오마커로 사용될 수 있는 유전자의 수를 확장합니다. 내분비계와 관련된 단백질에 대한 서열 코드(갈라닌 수용체 유형 2[GalR2], 에스트로겐 관련 수용체[ERR], 막 프로게스틴 수용체-베타[MPR], 에스트라디올 17-베타-탈수소효소 8[Hsd17b8], 및 레티노산 수용체[RXR]), DNA 복구(폴리-ADP-리보스 폴리머라제 I[PARP1], DNA 복구 단백질 XRCC3[XRCC3], B 세포 억제제의 카파 광 폴리펩티드 유전자 강화제의 핵 인자, 알파[IkBa]) 및 스트레스 반응([HSP70 B2]와 같은 열 충격 단백질 70B2-). 전반적으로 이 어레이를 사용하면 내분비계, 해독 메커니즘, DNA 복구, 신경계, 세포사멸, 산화 스트레스, 스트레스, 후생유전학, 면역 체계, 에너지 대사 및 지질 수송의 변화를 분석할 수 있습니다. 이러한 방식으로 배열은 스트레스 및 해독에 대한 반응과 관련된 주요 메커니즘의 변화뿐만 아니라 후생적 변형 메커니즘 및 DNA 복구와 같은 장기적인 영향과 관련된 프로세스의 반응도 보여줍니다. 화합물의 유전독성 효과. 환경 수준에서의 안전은 살충제로 사용되는 모든 제품의 관심사입니다. 비표적 종에 대한 영향이 감소된 새로운 농약을 찾으려면 이들 종에 대한 테스트가 필요합니다. 왜냐하면 이들 종 중 일부는 낮은 영향을 미칠 수 있기 때문입니다. 그러나 무척추동물의 생리에 대한 지식이 부족하기 때문에 이를 확인하기 위한 실험적 연구가 필요하다. 또한 무척추동물의 생리학에 대한 추가 정보를 제공하여 척추동물과의 격차를 줄이고 독성 시험에서 척추동물의 사용을 줄이는 대체 방법으로 무척추동물의 사용을 선호할 것입니다.

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결과

서열 식별.

내분비계(Hsd17b8, ERR, GalR2, MPR 및 RXR), 스트레스 반응(HSP70B2) 및 DNA 복구 메커니즘(XRCC3, IkBa 및 PARP1)과 관련된 다양한 단백질을 암호화하는 9개의 서열이 확인되었습니다. 서열의 크기 및 ORF 크기를 표 1에 나타내었다. 또한, 표시된 단백질과의 아미노산 수준에서의 동일성 및 유사성을 나타내었다. 데이터베이스 비교 결과, 이매패류 유래 단백질과 상동성이었던 MPR을 제외하고, 주로 복족류인 다른 연체동물의 단백질과 상동성이 나타났습니다. GalR2와 MPR의 경우를 제외하고는 상동성 정도가 높았으며, ERR과 HSP70 B2는 90% 이상의 동일성을 보였다. 그림 1은 단백질을 특징짓는 다양한 모티프를 가진 단백질의 구조를 보여줍니다. 이들 모두는 해당 단백질과 관련된 특징적인 도메인을 보여 주므로 분리된 서열이 해당 단백질을 코딩하는 유전자에 해당한다고 결론을 내릴 수 있습니다.

Fenoxycarb 노출에 대한 반응으로 유전자 발현 프로파일.

분석된 유전자의 중기 반응을 평가하기 위해 성체 달팽이를 0.01, 1 및 100 µg/L의 Fenoxycarb에 7일 동안 노출시켰습니다(그림 2, 3, 4, 5 6 , S1 및 S2). Fenoxycarb는 절지동물이 아닌 동물에게는 영향을 미치지 않을 것으로 예상되는 유충 호르몬의 유사체입니다. 내분비계(그림 2), DNA 복구 메커니즘(그림 3), 산화 스트레스(그림 4), 세포사멸(그림 4), 1단계(그림 S1)와 관련된 유전자에서는 통계적으로 유의미한 반응이 없었습니다. ), 해독의 2단계(그림 S2) 및 3단계(그림 S2), 대부분의 스트레스 단백질(그림 5), 저산소증(그림 5), 후생적 조절(그림 6) 및 에너지 대사(그림 5) .6). 1μg/L에서는 3개의 유전자만 변형되었습니다: 아세틸콜린에스테라제(AChE)(키 제곱=- 16.144, p=0.029; 그림 4), 열 충격 단백질 17.9(HSP 17.9)(chi square=- 15.553, p=0.039; 그림 5) 및 aplysianin A(ApA)(카이 제곱=- 20.333, p=0.002; 그림 .6). 따라서 신경계(AChE) 및 면역(ApA)과 관련하여 분석된 두 유전자는 약간의 변화를 보였으며, 이는 P. acuta의 생리학에 대한 일부 중기 영향(예: 사료 검색 행동 또는 박테리아 감염에 대한 감수성)이 발생할 수 있음을 시사합니다.

Table 1. Information of the sequences described for frst time. DNA and protein size, homology, identity, and similarity are indicated. Te contig number or accession number are indicated.

표 1. 처음으로 설명된 시퀀스 정보입니다. DNA 및 단백질 크기, 상동성, 동일성 및 유사성이 표시됩니다. Contig 번호 또는 accession 번호가 표시됩니다.


Figure 1

그림 1. HYPERLINK "sps:id::fg1||locator::gr1||MediaObject::0" 식별된 서열에 따라 Physella acuta 단백질 코드의 구조 및 보존된 도메인. 각 단백질의 특징적인 모티프가 표시됩니다. 도메인은 단백질의 보존 도메인 데이터베이스(CCD) 기능 분류에 따라 정의되었습니다. Te 크기는 숫자로 표시됩니다.

Figure 2


그림 2. 내분비 관련 서열(에스트로겐 수용체[ER], 에스트로겐 관련 수용체[EER], 막 프로게스틴 수용체 베타[MPR], 에스트라디올 17-베타 탈수소효소 8[Hsd17b8], 갈라닌 수용체 2)의 전사 수준 19도에서 7일 동안 Fenoxycarb에 생체 내 노출한 후 Physella 급성 성인의 [GalR2] 및 레티노산 수용체 [RXR]). 전사 활성은 리보솜 단백질 L10(rpL10), 액틴(Act), 6-포스포프룩토-2-키나제/과당-2,6-바이포스파타제 2(PFKFB2)를 사용하여 RT-PCR로 정량화되었습니다. ) 및 글리세르알데히드-3-인산염 탈수소효소(GAPDH)를 기준 유전자로 사용합니다. 용매에 노출된 대조군을 사용하여 비교를 수행했습니다. 수염 상자가 표시됩니다. 각 상자는 12명에 해당합니다. 상자 안의 수평선은 중앙값을 나타내고 25번째 및 75번째 백분위수는 상자 경계로 표시됩니다. 최고 및 최저 결과는 수염으로 표시됩니다. 상자 안의 작은 삼각형은 평균을 나타내고 이상값이 표시됩니다(원). 해당 유전자에서는 대조군과 유의미한 차이가 관찰되지 않았습니다(p<0.05).

논의

독성학 연구의 발전으로 인해 생존, 번식 또는 발달과 같은 전통적인 종말점을 넘어서는 추가 수준으로 독성 테스트를 확장해야 합니다. 요즘에는 독성 평가에 대한 분자적 접근 방식이 자주 사용되며, 다양한 세포 과정과 생리학적 메커니즘의 조절을 평가하는 추가 추정 바이오마커가 필요합니다. 이러한 의미에서 바이오마커 배터리에 새로운 유전자를 추가하면 분석된 경로에 따라 연구되는 과정의 수와 반응 수준이 확장됩니다. 따라서 새로운 유전자의 기술은 독성학 연구에서 P. acuta의 가치를 확장하는 단계입니다. 여기에서 우리는 다양한 호르몬 수용체, 활성 에스트로겐과 안드로겐(Hsd17b8)의 농도 조절에 관여하는 효소, 하나의 스트레스 단백질, DNA 복구에 관여하는 세 가지 단백질을 암호화하는 9개의 새로운 서열을 설명했습니다. 이 유전자는 내분비 교란, 유전독성 및 발달과 관련된 다양한 과정의 분석을 향상시킬 수 있습니다. 또한 이들 모두는 분자에서 생태학에 이르기까지 조직의 다양한 수준에서 반응을 이해하는 데 도움이 되며, 변화하는 환경에 직면하여 항상성을 유지하기 위한 독성 물질의 메커니즘과 유기체의 반응에 대한 통찰력을 제공합니다. 반면, 이러한 추정 바이오마커는 개인 수준에서 관찰하기 전에 독성을 평가하는 새로운 방법을 열어 인구에 영향을 미치는 돌이킬 수 없는 손상을 방지합니다. 따라서 임상 실습에서와 마찬가지로 분자 현상을 더 잘 식별하고 오염이 생태계에 돌이킬 수 없는 피해를 입히기 전에 오염을 감지하는 데 도움이 되는 조기 진단을 얻으려면 새로운 도구가 필요합니다.

Figure 3


그림 3. DNA 복구와 관련된 유전자의 전사 활동. 폴리(ADP-리보스) 폴리머라제 I(PARP1), NFKB 억제제 Iκ(IkBa), X선 복구 교차 보완 3(XRCC3), RAD21 코헤신 복합체 구성 요소(RAD21) 및 RAD50 이중 가닥 파손 복구 단백질의 mRNA 수준 19도에서 7일 동안 Fenoxycarb에 생체 내 노출된 후 Physella 급성 성인의 (RAD50)이 표시됩니다. RT-PCR을 사용하여 mRNA 수준과 리보솜 단백질 L10(rpL10), 액틴(Act), 6-포스포프룩토-2-키나제/과당- 2,6-바이포스파타제 2를 정량화했습니다. (PFKFB2) 및 글리세르알데히드-3-포스페이트 탈수소효소(GAPDH)를 참조 유전자로 사용했습니다. 용매에 노출된 대조군을 사용하여 비교를 수행했습니다. 수염 상자가 표시됩니다. 각 상자는 12명에 해당합니다. 중앙값은 상자 안의 수평선으로 표시되고, 25번째와 75번째 백분위수는 상자의 경계로 표시됩니다. 최고 및 최저 결과는 수염으로 표시됩니다. 상자 안의 작은 삼각형은 평균을 나타내고 이상값이 표시됩니다(원). 대조군과 비교하여 유의미한 차이는 관찰되지 않았습니다(p<0.05).

오랫동안 비표적 종에 대한 영향이 적거나 전혀 없는 살충제를 찾는 것이 주요 농업 목표였습니다. 유충 호르몬의 유사체는 절지동물의 특정 호르몬을 모방하여 다른 종에 대한 위험을 대폭 감소시키기 때문에 그러한 살충제 중 하나였습니다. Fenoxycarb는 곤충, 거미류 및 갑각류의 발달과 다양한 세포 과정에 영향을 미치는 것으로 알려져 있습니다8,13,18. 그러나 현재 무척추동물 생리학에 대한 지식이 부족하기 때문에 낮은 영향을 보장하기 위해 비표적 종에 대한 테스트가 필요합니다. 고려해야 할 첫 번째 요소는 사용된 중간 농도인 Fenoxycarb 1ug/L에서 반응이 관찰된다는 사실입니다. 곤충과 갑각류에 영향을 미치는 것에 비해 매우 낮습니다3,20,28. 더 높은 농도에서 반응이 결여되는 것은 조기 반응으로 인해 발생할 수 있으며, 해독 메커니즘의 작용으로 분석 당시의 정상적인 상태를 회복합니다. 더 낮은 농도에서 관찰된 반응의 결여는 독성 물질의 양이 효과를 유발하는 데 필요한 임계 농도보다 낮기 때문일 수 있습니다. 또 다른 가능성은 임계 농도에 도달하는 데 더 많은 시간이 필요할 수 있다는 것입니다. 마지막으로 추정되는 U자형 응답도 버릴 수 없습니다. 다양한 반응 시간을 사용하는 추가 연구를 통해 영향을 받는 세포 과정과 농도 의존적 ​​결과를 밝힐 수 있습니다.

Figure 4


그림 4. 신경계(아세틸콜린에스테라제[AChE]), 산화 스트레스(카탈라제[Cat], 구리-아연 슈퍼옥사이드 디스뮤타제[SOD CuZn] 및 망간 슈퍼옥사이드 디스뮤타제[SOD Mn])와 관련된 유전자의 전사 활성( 카스파제 3[Casp3] 및 세포사멸 유도 인자 3[AIF3]). 달팽이를 19도에서 7일 동안 Fenoxycarb에 노출시켰습니다. RT-PCR에 의한 정량은 리보솜 단백질 L10(rpL10), 액틴(Act), 6-포스포프룩토-2-키나제/과당-2,6-바이포스파타제 2(PFKFB2)를 사용하여 수행되었습니다. , 및 글리세르알데히드-3- 인산염 탈수소효소(GAPDH)를 기준 유전자로 사용합니다. 용매에 노출된 대조군을 사용하여 비교를 수행했습니다. 수염 상자가 표시됩니다. 각 상자는 12명에 해당합니다. 중앙값은 상자 안의 수평선으로 표시되고, 25번째와 75번째 백분위수는 상자의 경계로 표시됩니다. 최고 및 최저 결과는 수염으로 표시됩니다. 상자 안의 작은 삼각형은 평균을 나타내고 이상값이 표시됩니다(원). 대조군과 비교하여 유의미한 차이(별표)가 표시됩니다(p<0.05).

이 연구에서 우리는 유충 호르몬 유사체인 Fenoxycarb의 유전자 발현 수준에서 반응을 테스트했으며, 비록 약하기는 하지만 절지동물이 아닌 동물에서 독성이 없음을 확인하기 위해 추가 연구가 필요한 반응을 관찰했습니다. 예상대로 DNA 복구 메커니즘이나 스트레스 반응과 관련된 유전자에서는 아무런 효과도 관찰되지 않았습니다. 심지어 곤충에서도 이러한 유전자에 대한 연구에 관한 문헌에는 데이터가 없습니다. 갑각류의 지질과 탄수화물에 fenoxycarb가 미치는 영향에 대한 일부 보고가 있지만 에너지 대사에서도 비슷한 상황이 발생합니다3,4,29. 우리가 아는 한, Fenoxycarb가 있을 때 해독 메커니즘의 반응을 분석한 이전 보고서는 없습니다. P. acuta에서는 해독의 1단계, 2단계, 3단계와 관련하여 분석된 유전자에 변화가 없으며, 이는 여기에서 분석된 것과 다른 다른 단백질이 이 화학물질의 생체변환에 책임이 있음을 시사합니다. 우리의 결과와는 대조적으로, 후생적 조절과 관련된 유전자에는 변화가 없으며, 50μg/L의 Fenoxycarb에 3일 동안 노출되면 물 fea Moina Macrocopa4에서 히스톤 데아세틸라제를 상향 조절할 수 있다고 설명되었습니다. 이는 화합물에 대한 차별적인 민감도를 반영할 수 있을 뿐만 아니라 물의 후생적 변화가 유충 호르몬 효과를 모방하는 것과 관련이 있다는 사실도 반영할 수 있습니다.


Figure 5

그림 5. 스트레스의 전사 활동(작은 열 충격 단백질 16.6 [sHSP16.6], 작은 열 충격 단백질 17.9 [sHSP17.9], 열 충격 단백질 60 [HSP60], 열 충격 동족 70 4 [HSC70 (4 )], 열 충격 단백질 70 B2-유사 [HSP70B2], 포도당 조절 단백질 78/결합 면역글로불린 단백질 [Grp78/BiP], 열 충격 단백질 83 [HSP83]) 및 저산소증 유발 인자{{23} } 성체 달팽이의 알파[HIF1]) 유전자. 동물을 19도에서 1주일 동안 Fenoxycarb에 노출시켰습니다. 전사 활성은 리보솜 단백질 L10(rpL10), 액틴(Act), 6-포스포프룩토-2-키나제/과당-2,6-바이포스파타제 2(PFKFB2)를 사용하여 RT-PCR로 정량화되었습니다. ) 및 글리세르알데히드-3-포스페이트 탈수소효소(GAPDH)를 기준 유전자로 사용합니다. 용매에 노출된 대조군을 사용하여 비교를 수행했습니다. 수염 상자가 표시됩니다. 각 상자는 12명에 해당합니다. 중앙값은 상자 안의 수평선으로 표시되고, 25번째와 75번째 백분위수는 상자의 경계로 표시됩니다. 최고 및 최저 결과는 수염으로 표시됩니다. 상자 안의 작은 삼각형은 평균을 나타내고 이상값이 표시됩니다(원). 컨트롤(별표)과 비교하여 중요한 차이가 표시됩니다(p<0.05).

Figure 6


그림 6. 후성적 조절(DNA 메틸라제 I[DNMT1], 라이신 아세틸트랜스퍼라제 6B[KAT6B], 히스톤 데아세틸라제 1[Hda1]), 면역(aplysia nin-A [ApA]) 및 에너지 대사와 관련된 유전자의 전사 활성( 19도에서 7일 동안 Fenoxycarb에 생체 내 노출한 후 Physella 급성 성인의 글리코겐 포스포릴라제 L[PYGL] 및 옥시스테롤 결합 단백질 유사 8[OSBPL8]). 전사 활성은 리보솜 단백질 L10(rpL10), 액틴(Act), 6-포스포프룩토-2-키나제/과당-2,6-바이포스파타제 2(PFKFB2)를 사용하여 RT-PCR로 정량화되었습니다. ) 및 글리세르알데히드-3-인산염 탈수소효소(GAPDH)를 기준 유전자로 사용합니다. 용매에 노출된 대조군을 사용하여 비교를 수행했습니다. 수염 상자가 표시됩니다. 각 상자는 12명에 해당합니다. 중앙값은 상자 안의 수평선으로 표시되고, 25번째와 75번째 백분위수는 상자의 경계로 표시됩니다. 최고 및 최저 결과는 수염으로 표시됩니다. 상자 안의 작은 삼각형은 평균을 나타내고 이상값이 표시됩니다(원). 컨트롤(별표)에 비해 유의미한 차이가 표시됩니다(p<0.05).

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AChE에 대한 효과는 신경계에 어느 정도 영향을 미친다는 것을 의미합니다. 서문에서 언급한 바와 같이, 쥐 뇌의 아세틸콜린에스테라제 활성 및 니코틴 수용체의 억제가 관찰되었으며17, 이는 Fenoxycarb가 비표적 유기체에 신경 효과를 가질 수 있음을 시사합니다. 니코틴 수용체에 대한 연구에 따르면 Fenoxycarb의 메커니즘은 비경쟁적이었습니다. Fenoxycarb는 청소년 호르몬의 유사체로 사용되었지만 신경계에 영향을 미쳐 나머지 카바메이트와 마찬가지로 효과도 있는 것으로 보입니다. P. acuta에서 관찰된 반응은 신경 효과를 뒷받침하며 중추 신경계를 변경하여 달팽이의 생존 능력에 영향을 미칠 수 있음을 시사합니다. 전사에서 관찰된 증가는 효소 활성 억제를 보상하려는 시도를 반영할 수 있습니다. 추가 연구는 달팽이의 행동이나 신경계와 관련된 상황에 반응하는 능력에 대한 추정 효과를 밝히는 데 도움이 될 것입니다. 어쨌든 Fenoxycarb가 중장기적으로 비표적 종에 미칠 수 있는 영향을 고려하는 것은 사실입니다. 반면에 sHSP17.9의 변조는 일부 효과를 시사하지만 세포에 대한 실제 영향을 결정하는 것은 복잡한 문제입니다. 작은 열 충격 단백질은 스트레스 반응에 관여하고 신경 기능을 포함한 여러 세포 과정과 관련된 다양한 단백질입니다. 이러한 의미에서 sHSP17.9가 신경 생리학과 관련된 일부 sHSP를 암호화할 수 있다고 추측하는 것은 유혹적이지만 상동성을 확립하기가 어렵기 때문에 주의가 필요합니다. 추가 연구는 더 많은 정보를 제공할 것이며 세포에서 이 단백질의 역할을 정의하는 데 도움이 될 수 있습니다. 바이오마커로서 sHSP가 알파-크리스탈린 도메인을 공유한다는 사실은 이를 쉽게 식별할 수 있게 해줍니다. 그러나 N- 및 C-말단 영역의 높은 다양성은 종 간의 상동성 식별을 복잡하게 만듭니다.

Desert ginseng—Improve immunity

시스탄체 튜불로사의 장점-면역체계 강화

결과적으로, 세포 대사에서 이들의 역할을 결정하고 이들 사이의 기능적 상동성을 확립하기 위해서는 이 단백질 계열에 대한 더 깊은 연구가 필요합니다. 어쨌든, 관찰된 변화는 Fenoxycarb가 P. acuta에서 중기적으로 어느 정도 영향을 미쳐 달팽이의 건강을 어느 정도 감소시킬 가능성을 높인다는 것을 시사합니다. Aplysianin-A는 항균제 역할을 하여 면역 반응에 관여하는 단백질입니다. 이 항균성 당단백질은 Aplysia kurodai32에서 그람 양성균과 그람 음성균을 모두 억제합니다. 전사 활성의 변화는 박테리아 감염에 대한 반응을 조절하여 P. acuta를 박테리아 감염에 더욱 민감하게 만들 수 있습니다. 반응이 과도하거나 부적절한 순간은 유기체의 반응 능력에 영향을 미쳐 ApA에 민감하지 않은 박테리아를 선택하여 동물을 감염에 더 민감하게 만들 수 있습니다. P. acuta에서 관찰된 영향은 면역력에 추정상의 변화가 있음을 암시하며, Fenoxycarb에 대해 이러한 가능성이 제안된 것은 처음입니다. 이를 확인하고 인구의 장기 생존에 미치는 영향을 확인하려면 더 많은 면역 관련 유전자를 포함하는 추가 연구가 필요합니다. 현재의 증거는 Fenoxycarb가 환경에 미치는 영향이 낮다는 것을 시사합니다. 그러나 비표적 종 P. acuta에서 관찰된 결과는 노출이 장기적인 영향을 반영할 수 있기 때문에 확장된 분석이 필요합니다. 분자 수준의 데이터는 단기적으로는 약한 효과를 시사하지만 다른 매개변수를 테스트하는 추가 분석을 통해 추가 증거를 제공할 수 있습니다. Fenoxycarb의 무해성을 보장하려면 다양한 무척추 동물 그룹을 포괄하고 분자, 세포 및 유기체 수준에서 단기 및 장기 효과를 테스트하는 여러 비표적 종에서 분석해야 합니다.

Cistanche deserticola—improve immunity

cistanche tubeulosa - 면역 체계를 향상시킵니다.

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