Cistanche Cistanche에서 Echinacoside의 HPLC 측정
Mar 09, 2022
Cistanche Cistanche에서 echinacoside의 HPLC 측정
자세한 정보:ali.ma@wecistanche.com
목적:HPLC는 다음의 양을 결정했습니다.에키나코사이드안에시스탄체액체 질소 조건과 자연 공기 건조 조건에서 분쇄하여 비교합니다.야생 시스탄체그리고인공 재배 Cistanche.
행동 양식:lc{0}}HPLC 시스템(Shimadzu, Japan)을 사용했습니다. 컬럼은 YMC inertsil ods-sp (4.6 mm × 150 mm, 5μm; YMC Co Ltd, Japan); 이동상: 아세토니트릴-메탄올-1% 포름산(10:15:75); 검출 파장 334 nm; 유속 0.7mg · ml{14}}. 컬럼 온도 30℃
결과:상이한 처리 조건은 에키나코사이드 함량에 매우 분명한 영향을 미쳤으며, 일반적으로 자연 공기 건조 조건에서 분쇄된 것보다 액체 질소 하에서 분쇄된 Cistanche에서 더 높은 수준의 에키나코사이드; 야생의 유효 성분 함량시스탄체인공 문화보다 훨씬 높았다.
Cistanche는 멸종 위기에 처한 종으로 Clostridium, Salix rubrum의 뿌리에 서식하는 기생 식물입니다. 중국에서 Cistanche는 주로 내몽고, Ningxia, Gansu 및 Xinjiang에 분포하며 "사막 인삼"으로 명성이 높으며 약용 가치가 뛰어납니다. 주요 약재는 페닐에탄올 배당체로 치환기에 따라 에키나코사이드(echinacoside), 잎코호사이드(leaf cohoside), 시스탄체(Cistanche) 등으로 구분된다. 그 중 echinacoside는 성기능, 항산화 및 자유 라디칼 소거 효과를 향상 시켰지만 항 세포 사멸 효과도 있습니다. 1980년대부터 페닐에탄올 배당체 분리를 위한 간단하고 신속한 방법을 제공하는 HPLC 기술은 천연물 분리에 널리 사용되었습니다. 야생 및 인공 재배 Cistanche의 주요 활성 성분인 Cistanche의 함량을 다른 성장 시기에 분석하기 위해 HPLC 방법을 선택하여 Cistanche의 합리적인 개발 및 활용과 품질의 효과적인 평가를 위한 과학적 근거를 제공했습니다.
기기 및 시약
일본 시마즈(Shimadzu)의{0}LC{0}LC{1}} HPLC 장치, 탠덤 이중 플런저 펌프, cto{2}} 컬럼 오븐, spda{3}} UV Vis 이중 파장 검출기; Kunshan kq-100 초음파 세척기; 아세토니트릴(크로마토그래피 순수, Tianjin Guangfu Chemical Research Institute); 메탄올(크로마토그래피 순수, Tianjin Guangfu Chemical Research Institute); 포름산(크로마토그래피 순수, Tianjin Guangfu Chemical Research Institute); 증류수
대조군: 에키네오사이드, 함량 98.43% 이상(Shanghai Yuanye Bio Technology Co., Ltd.).
Cistanche의 5가지 샘플: 다음 Cistanche로 1년 동안 인공 심기, Cistanche용으로 인공 심기, 인공 건조 Cistanche, 야생 Cistanche, Cistanche로 3년 이상 인공 심기.
2가지 방법과 결과
2.1 크로마토그래피 조건의 측정
LC 크로마토그램에서 측정된 에키네오사이드의 피크를 다른 물질과 분리하고 펌프 압력과 타임 테이블을 적절한 범위 내로 조절하기 위해 크로마토그래피 조건을 실험적으로 수정한 후 이동상을 이용한 최적화 실험 결과, 온도가 높을수록 머무름 시간이 짧고 농도가 낮을수록 펌프 압력이 짧아지고 머무름 시간이 낮아지지만 피크 높이가 낮아져 흡착에 불리하다는 결론을 내렸습니다. 측정. 이동상은 최종적으로 아세토니트릴-메탄올{1}}% 포름산(10:15:75), 검출 파장 334 nm, 유속 0.7 mL/min, 컬럼 온도로 결정되었습니다. 30 ° C, 실온의 객관적인 조건과 펌프의 최대 베어링 압력에 따라 날카로운 피크 모양과 구성 요소의 우수한 분리로 풍부한 정보를 얻었습니다.
2.2 컬럼 결정
YMC-Inertsil ODS-SP(4.6mm × 150mm, 5μm, YMC Co Ltd, Japan).
2.3 실험 용액 준비
2.3.1 표준 용액의 준비
적절한 양의 에키네오사이드 표준물을 정확하게 칭량하고 이동상 아세토니트릴-메탄올-1% 포름산(10:15:75)을 첨가하여 0을(를) 만들었습니다.{11}} 6mg · ML - 1, 0.{17}}5mg · ML {{1{{2{23}}}}}, 0.04mg · ML - 1 , 0.03 mg · ML - 1, 0.02 mg · ML - 1, 0.01 mg · ML - 1 및 0.005 mg · ML - 1 에키나코사이드 표준 용액.
2.3.2 시험용액의 조제
인공적으로 심은 신선한 씨스탕슈(1년 미만), 인공적으로 신선한 씨스탕슈 및 야생 신선한 씨스탕슈의 적절한 양을 액체 질소 하에서 모르타르를 사용하여 분말로 분쇄하고; 또한, 상기 3종을 적당량 깍둑썰기하여 그늘에서 자연건조한 후 건조 후 분쇄하여 가루로 만들었다. 인공 건조 시탄슈와 야생 시탄슈를 3년 이상 건조하여 직접 분말로 분쇄한 것입니다. 0상기에서 제조한 시스탄체 분말 .5g을 취하여 원심분리관에 넣고 이동상 25ml를 가하고 칭량하여 3분 동안 침지시키고 40분 동안 초음파 처리한 후 냉각시킨 다음 손실된 중량을 이동상으로 보충하기 위해 다시 칭량하고, 진탕 및 원심분리하고, 0.45 μM 미세 다공성 필터 멤브레인 여과를 위해 상청액을 취하였다.
에키나코사이드의 표준 샘플에 대한 회귀 곡선의 2.4 플롯
제조된 에키네오사이드의 표준시료를 별도로 LC장치에 주입하고, 횡축은 대조농도(mg·L{0}})를 사용하였으며, 해당 피크면적을 좌표축으로 하여 플롯팅하였다. 표준 곡선에 따라 회귀 방정식이 생성되었습니다. y=66 867 100x-46 360.83, R2=0.98637, 이는 좋은 선형 관계 내에서 0.1 ~ 1.2 ug에서 에키네오사이드를 보여주었습니다.
3 토론
Echinacoside는 Cistanche의 주요 활성 성분 중 하나로, Cistanche의 약리학적 효과의 화학적 기초를 잘 대표할 수 있으며, 원료의 품질 평가와 그 약리학적 효과를 일치시키고 Cistanche 품질 평가의 적합성을 향상시킵니다.
다른 처리 조건은 에키나코사이드 함량에 분명한 영향을 미쳤으며, 일반적으로 자연 공기 건조 조건에서 분쇄된 것보다 액체 질소에서 분쇄된 Cistanche의 에키나코사이드 수준이 더 높았습니다. 일반적인 공기 건조는 공기 건조 중에 소비되거나 전환되었을 수 있는 에키네오사이드의 양을 감소시켰습니다. 활성 성분 함량의 감소를 방지하고 시스탄슈의 효능을 보장하기 위해서는 적절한 치료법을 선택해야 합니다.
일관되게 씨스탄체의 인공재배환경과 생육습관은 야생과 구별이 되지 않고 품질의 차이가 없다고 생각하고 수확량만을 중시하고 품질분석을 하지 않는 경향이 있었다. 본 연구에서는 인공적으로 재배된 Cistanche echinacoside의 양이 야생 Cistanche echinacoside의 양보다 적음을 보여주었다. 가장 높은 것은 {{0}}.3360%의 야생 cistanche이고 가장 낮은 것은 0.007 0인공 cistanche의 퍼센트였습니다. 따라서 유효성분 함량을 향상시키기 위한 재배기술에 대한 연구가 여전히 필요하다.
Cistanche의 품질은 활성 성분인 echinacoside의 양에 따라 달라지며, 이는 계절, 시간 및 수확 방법과 밀접한 관련이 있으므로 활성 성분의 축적 상태 및 수확 방법을 고려해야 합니다. 성장과 발달의 단계. 품질과 수율을 모두 고려하십시오.
이 논문에서 언급한 방법은 간단하고 정확하며 재현 가능하고 정확한 에키네오사이드를 측정합니다. Cistanche 결정에 유용합니다.
