노화 방지 특성 및 메커니즘 비교 연구: 레스베라트롤과 칼로리 제한 Ⅱ

resveratrol과 CR이 노화 쥐의 조직에서 SIRT1, p53 및 Foxo3a의 mRNA 발현에 미치는 영향

산화 스트레스 조건종종 SIRT1 발현 및 활동을 유도합니다. SIRT1은 p53 및 Foxo3a를 포함한 주요 생존 인자의 기능을 조절합니다[9]. D-Gal에 의해 유도된 노화 쥐의 SIRT1, p53 및 Foxo3a의 mRNA 수준에 대한 resveratrol 및 CR의 효과를 확인하기 위해 정량적 RT-PCR 분석을 수행했습니다. 상응하는 음성 대조군과 비교하여 SIRT1 및 Foxo3a mRNA 발현 수준은 유의하게 감소하였으나, p53 수준은 D-Gal 그룹에서 유의하게 증가하였다(P < 0.01; 도 9A 및 9B). 또한 쥐에서 레스베라트롤 또는 D-gal과의 동시 치료는 SIRT1 및 Foxo3a mRNA 발현 수준을 증가시켰지만 모델 대조군과 비교하여 p53 수준을 감소시켰습니다(P < 0.05). 그러나 CR 처리와 비교하여 SIRT1 mRNA 발현 수준은 고용량 레스베라트롤 + D-gal 그룹에서 간에서 유의하게 증가했으며, p53 mRNA 발현 수준은 고용량 레스베라트롤 + D-gal 그룹에서 간과 뇌에서 유의하게 감소했습니다. 갈 그룹 (P < 0.05).

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레스베라트롤과 CR이 노화 쥐의 뇌 조직에서 주요 SIRT1- 관련 단백질 발현에 미치는 영향

SIRT1에 의해 조절되는 FOXO3a 및 p53은 SIRT1의 다운스트림 분자입니다. 동시에 SIRT1 활성은 DBC1(KIAA1967이라고도 함), AROS(RPS19BP1이라고도 함) 및 종양 억제 인자 HuR(ELAVL1이라고도 함)과 같은 상위 분자에 의해 조절됩니다[9, 10] . D-Gal에 의해 유도된 노화 쥐의 p53, FOXO3a, HuR, AROS 및 DBC1 단백질 수준에 대한 레스베라트롤 및 CR의 효과를 확인하기 위해 웨스턴 블롯 검정을 수행하였다. 해당 음성대조군에 비해 FOXO3a, AROS, HuR 단백질 발현은 유의하게 감소하였으나 p53 및 DBC1 발현은 D-gal군에서 유의하게 증가하였다(P < 0.01 ; 그림 10). 또한, 쥐에서 레스베라트롤 또는 D-gal과의 동시 치료는 FOXO3a, AROS 및 HuR의 단백질 발현을 증가시켰지만 모델 대조군과 비교하여 p53 및 DBC1 수준을 감소시켰습니다(P < 0.05). 그러나 CR 처리와 비교하여 고용량의 resveratrol + D-gal 그룹의 뇌에서 HuR 단백질 발현 수준은 유의하게 증가했지만 DBC1 수준은 유의하게 감소하였다(P < 0.05). p53, FOXO3a 및 AROS 단백질 발현 수준에서 resveratrol + D-gal 그룹과 CR + D-gal 그룹 사이에는 차이가 없었습니다(P > 0.05).

뇌 및 간 조직에서의 FOXO3a 및 p53 발현

FOXO3a 및 p53의 발현 상태는 면역조직화학법에 의해 뇌 및 간 조직에서 결정되었다. FOXO3a와 p53의 면역조직화학적 분석 결과 음성대조군에 비해 D-Gal군에서 FOXO3a 발현이 뇌와 간 조직에서 유의하게 감소하였고 p53 발현이 유의하게 증가하였다(P < 0.{{13} }5, 그림 11). 또한, 쥐에서 레스베라트롤 또는 D-gal과의 동시 치료는 FOXO3a 발현을 증가시켰지만 모델 대조군과 비교하여 p53 발현을 감소시켰습니다(P < 0.05). 그러나 p53 및 FOXO3a 발현에서 resveratrol + D-gal 그룹과 CR + D-gal 그룹 간에는 차이가 없었습니다(P > 0.05).

논의

노화의 기본이 되는 기본적인 화학적 과정은자유 라디칼 노화 이론[11], 그리고산화 스트레스정상적인 노화 과정의 주요 요인으로 여겨집니다.자유 라디칼 개시제 AAPH에 익숙했다산화 스트레스를 유발하다산화 모델을 확립스트레스 유발 세포 노화인간 IMR-90 세포에서 [12, 13]. 이 방법의 장점은 AAPH가 열분해되어라디칼 생성생물학적 변환이나 효소가 없는 상태에서급진적인 세대개시제의 농도를 조절함으로써 쉽게 제어할 수 있다[12]. AAPH는인간의 증식을 억제IMR- 90 세포를 농도 및 시간 의존 방식으로. 결과는 AAPH(1mM)와의 2일 배양이 SA-Gal 양성 비율, 세포사멸 세포 집단의 백분율을 상당히 증가시키고, SIRT1의 mRNA 발현을 감소시키고, 확대되고 편평한 형태를 유도함을 보여주었다. 이는 AAPH에 의한 산화 스트레스가 IMR-90 세포를 노화시킨다는 것을 나타냅니다. 이 세포 노화 모델에 기초하여, 10 μM resveratrol 처리는 CR 처리보다 AAPH로 유도된 노화 및 세포사멸을 더 효율적으로 억제했습니다.

D-gal 동물모형은 국제적으로 인정받는 노화 동물모형으로노화 방지 의약품. D-gal은 일반적으로 동물의 D-갈락토키나제 및 갈락토스-1-인산염에 의해 대사되는 생리학적 영양소입니다. 그러나 위의 효소에 의해 대사되지 않고 세포에 축적되는 D-gal의 과잉 공급은 산화 스트레스와 세포 손상을 유발한다[14]. 따라서 D-gal을 장기간 투여하면 수명 단축, 인지 기능 장애, 신경퇴화, 산화 스트레스, 면역 반응 감소, 최종당화산물(AGE) 형성 등 동물의 자연적인 노화와 유사한 변화를 유도합니다[15]. 본 연구는 현저한 학습 및 기억 장애, MDA 생산, 리포푸신 축적, T-AOC 및 SOD의 감소, 뇌에서 텔로머라제 활성의 하향 조절에 의해 입증되는 모방 노화 모델의 성공적인 확립을 나타냈다. 한편, 레스베라트롤 또는 CR 처리는 항산화 효소의 활성을 높이고, 지질 과산화 생성물의 수준을 낮추고, 산화 및 항산화 시스템의 균형을 유지함으로써 산화 스트레스로부터 D-gal 유도된 쥐를 보호했습니다. 행동 및 텔로머라제 활성 테스트에서 레스베라트롤 또는 CR의 치료는 D-gal 유발 인지 장애 및 텔로머라제 활성을 역전시킬 수 있습니다. 게다가 고용량의 레스베라트롤을 투여한 노화 모델 쥐는 CR을 투여한 쥐보다 행동에 상대적으로 더 큰 영향을 미쳤습니다.

그림 11: 노화 쥐의 간(A, C) 및 뇌(B, D) 조직에서 p53(A, B) 및 FOXO3a(C, D) 발현의 면역조직화학적 분석. 배율은 20배였다. NG, 음성 대조군; MG, 모델 대조군; RESL, 저용량의 레스베라트롤 그룹; RESH, 고용량의 레스베라트롤 그룹; CR, 칼로리 제한 그룹

연구에 따르면 CR은 영양가 있는 식단 섭취를 10~40% 줄이면 효과가 있습니다.노화를 늦추고 수명을 늘린다따라서 일반적으로 사용되는 CR 수준(음식 섭취량의 40% 감소)이 본 연구에서 CR 그룹 쥐에 적용되었습니다. 그럼에도 불구하고 일부 조사에서는 자연적으로 노화된 영장류의 수명에 대한 CR의 유익한 효과가 없음을 밝혔습니다[16]. 마찬가지로, 레스베라트롤 치료가 CR 유사 효과를 유발하는 것으로 나타났지만에너지 대사및 비만인 사람의 대사 프로필[17], 정상 내당능을 가진 비만이 아닌 여성의 대사 기능을 개선하지 못했습니다[18]. 이 연구들 사이의 차이점에 대한 이유는 명확하지 않지만 CR과 레스베라트롤이 대사적으로 손상된 개인의 항상성을 회복하는 데 작용하고 건강한 개인의 경우 덜 그러하기 때문에 동물 연구에서 알려진 SIRT1의 기능과 일치할 가능성이 있습니다[19]. 따라서 레스베라트롤이나 CR의 항노화 활성을 비교하기 위해 자연노화 쥐 모델이 아닌 D-gal 유도 노화 쥐 모델을 적용하였다.

(NAD + ) 의존성 탈아세틸화효소인 SIRT1은 수명 연장, 스트레스 저항성 및 세포자멸사 감소에서 다양한 역할을 하기 때문에 많은 주목을 받았습니다[20, 21]. 축적된 연구는 SIRT1이 레스베라트롤과 CR의 주요 표적이라는 것을 강하게 암시했습니다[22]. SIRT1에 의해 조절되는 p53, Foxo1, Foxo3, Foxo4 및 E2F1을 포함하여 SIRT1의 수많은 다운스트림 분자가 있습니다. 동시에 SIRT1 활동은 p53, HIC1, E2F1, DBC1, HuR 및 AROS와 같은 상류 분자에 의해 조절됩니다. 급성 영양소 철수는 전사 인자 Foxo3a 및 p53에 의해 지시되는 SIRT1 프로모터에서 전사 프로그램을 활성화합니다. p53이 SIRT1 유전자 발현을 억제하기 때문에 Foxo3a에 의한 제거는 SIRT1 전사를 활성화합니다[23]. DBC1과 AROS는 각각 SIRT1 활성의 직접적인 음성 및 양성 조절자로 최근에 기술되었으며, HuR은 노화된 노화 세포에서 SIRT1 발현 수준을 감소시키는 효과를 보여줍니다[9, 10].

CR노화를 지연시키고 중간 및 최대 수명을 연장합니다.쥐, 생쥐, 물고기, 파리, 벌레 및 효모를 포함한 다양한 종에서. 그러나 자유생활을 하는 사람에 대한 엄격한 식이 프로그램은 윤리적, 방법론적 문제를 제기하고 있다[24]. 현재로서는 단순히 수명을 연장하는 것보다 건강 수명을 늘리는 것이 더 중요할 수 있습니다. 최근 조사에 따르면 레스베라트롤은 모든 식물 폴리페놀 중에서 SIR2 활동의 가장 강력한 자극제 중 하나이며[25] 칼로리 제한에서 볼 수 있는 유사한 메커니즘을 통해 수명에 영향을 미칩니다. 이러한 결과는 CR과 레스베라트롤이 SIRT1 mRNA 발현 수준을 회복하고 FOXO3a, AROS 및 HuR의 단백질 발현을 증가시키고 p53 및 DBC1 수준을 감소시키는 유사한 활성을 가짐을 보여주었습니다. 한편, 여러 줄의 설득력 있는 증거는 레스베라트롤이 신경계, 간 및 심혈관계에 유익한 효과가 있음을 나타냅니다.

재료 및 방법

세포 배양, 스트레스 및 치료

인간 이배체 섬유아세포 균주 IMR-90은 ATCC에서 구입했습니다. 세포는 10% 태아 소 혈청(FBS)(Gibco)이 보충된 최소 필수 배지(MEM)(영국 Gibco)에서 37도, 5% CO2에서 성장했습니다. 컨플루언스에 도달한 후, 세포를 6-웰 배양 플레이트에 시딩했습니다. 하루 후, 세포를 MEM + 10% FBS에 희석된 1mM 2,2'-아조비스(2-아미디노프로판) 디하이드로클로라이드(AAPH)(Sigma, USA)로 48시간 동안 처리했습니다. 자유 라디칼 개시제인 AAPH와 함께 48시간 배양하면 산화 스트레스로 유도된 세포 노화의 모델이 확립됩니다[12, 13]. 대조군 세포를 배양 배지에서만 배양하였다. AAPH 처리 후, IMR-90을 pH 7.4의 차가운 인산완충식염수(PBS)로 세척하고 신선한 배양 배지 또는 레스베라트롤(레스베라트롤 그룹) 또는 3% FBS가 보충된 MEM(CR 그룹)을 함유하는 배양 배지와 함께 배양했습니다. 수확 전 추가 48시간.

SA -gal 염색 활성

노화 바이오마커의 출현(증식능 감소 및 SA-gal-염색 증가)을 처리 다음날부터 확인하였다[26]. 그런 다음 제조사의 SA-gal Staining Kit(CST, USA) 지시에 따라 세포를 염색하였다. 염색 후, 여러 필드에서 적어도 300개의 세포를 검사하고 SA-gal 양성 세포를 세었다. 이 실험을 3번 반복하여 그 결과를 표준편차(SD)를 포함한 평균값으로 나타내었다. 세포 컨플루언시로 인한 비특이적 염색을 피하기 위해 SA-gal 조직화학적 염색을 하위컨플루언트 세포로 수행했습니다.

주사 전자 현미경 분석

위에서 설명한 대로 6-웰 배양 플레이트의 커버슬립에서 세포를 성장시켰습니다. 레스베라트롤과 CR을 처리한 후 커버슬립을 플레이트에서 제거한 다음 세포를 2.5% 인산염 완충 글루타르알데히드에 고정하고 1% 완충 오스뮴 테트록사이드에 후고정했습니다. 고정된 시편은 등급이 매겨진 일련의 에탄올을 통해 탈수 후 t-부틸 알코올에 담갔다. 시편을 t-부틸알코올로 동결건조한 후 auto fine coater(JFC-1600, JEOC, Japan)를 이용하여 금으로 증발코팅한 후 주사전자현미경(JEOL, JSM{{11} }LV, 일본).

아폽토시스 분석

레스베라트롤 또는 CR 인큐베이션 후, 모든 세포를 트립신으로 수확하고 PBS로 2회 세척한 다음, 400 μL 아넥신 V 결합 완충액에 재현탁시켰다. 이후 제조사의 Annexin V-FITC cell apoptosis detection kit(BestBio, China)의 지시에 따라 세포를 염색하였다. FACSCalibur 유세포 분석기(Becton-Dickinson, San Jose, CA)를 사용하여 형광을 검출하고 세포사멸 세포의 백분율을 FACSCalibur의 내부 소프트웨어 시스템으로 계산했습니다. 각 흔적에 대해 약 104개의 세포를 분석했습니다.

동물 절차

무게가 약 200 ± 10g인 수컷 알비노 Wistar 쥐는 Huazhong University of Science and Technology(SCXK 2010-0009) Tongji Medical College 실험 동물 센터에서 입수했습니다. 동물은 후베이 중국 의과 대학의 실험 동물 센터에서 투약 전 2주 동안 순응되었으며, 이 기간 동안 동물은 자유롭게 음식과 물에 자유롭게 접근할 수 있었습니다. 적응 후, 50마리의 쥐를 선택하여 10마리씩 5개의 그룹으로 나누었다. 동물은 기관 동물 윤리 위원회(IAEC)에서 승인한 국가 지침 및 프로토콜에 따라 유지되었습니다.

그룹 I(음성 대조군) 쥐는 6주 동안 비히클 단독(1mL/kg 체중의 0.9% 식염수)을 받았습니다. 그룹 II(모델 대조군) 쥐는 6주 동안 D-gal(200mg/kg 체중, Sigma Chemical, St. Louis, MO)을 받았습니다. 그룹 III(저용량의 레스베라트롤 그룹) 쥐는 6주 동안 5% 디메틸 설폭사이드(DMSO)에 용해된 D-gal과 레스베라트롤(50mg/kg 체중)을 받았습니다. 그룹 IV(고용량 레스베라트롤 그룹) 쥐는 D-gal과 레스베라트롤(체중 1kg당 100mg)을 받았습니다. 그룹 V(CR 그룹) 쥐는 6주 동안 D-gal과 CR(무제한 먹이를 먹인 쥐[27]보다 칼로리가 40% 낮은 식단을 먹임)을 받았습니다. D-gal은 복강내 투여한 반면, 레스베라트롤은 전체 실험 기간 동안 경구 투여했습니다. 치료 마지막 날에 쥐를 희생시킨 다음 혈액, 혈청 및 장기를 생물학적 분석을 위해 즉시 수집하거나 나중에 사용하기 위해 -80도에 보관했습니다.

행동 테스트

Morris water maze 테스트는 손상 후 6주 후에 쥐의 공간 학습 및 기억 능력을 평가하기 위해 고안되었습니다[28]. Morris 수중 미로 테스트는 4-일 학습 및 기억력 훈련과 5일째 프로브 시도로 구성되었습니다. 동물은 시각적 신호가 있는 원형 풀(직경 155cm)에서 훈련되었습니다. 탈출 플랫폼(직경 9.0 cm)은 25 ± 2도를 유지하는 수영장 물 표면 아래 1.0 cm에 잠겼습니다. 플랫폼의 위치는 4-일간의 교육 기간 동안 북서쪽 사분면 중앙에 유지되었습니다. 매일 쥐는 오전 블록과 오후 블록 각각에 대해 훈련을 받았습니다. 쥐는 120초 이내에 플랫폼을 찾을 때까지 자유롭게 헤엄쳤다. 실패하면 10초 동안 플랫폼에 두었습니다. 탈출 잠복기(침수된 탈출 플랫폼 찾기) 및 수영 속도를 기록했습니다. 프로브 시험은 플랫폼을 제거하고 각 래트가 수영장 내에서 120초 동안 자유롭게 수영하도록 함으로써 이루어졌습니다. 훈련된 사분면(플랫폼이 제거된 곳)에서 플랫폼 교차 횟수를 컴퓨터 비디오 시스템으로 기록했습니다. D-gal로 처리된 쥐와 비히클로 처리된 쥐 사이에 수영 속도의 상당한 차이가 관찰된 후 물 미로의 가시적 플랫폼 버전은 수행되지 않았습니다.

산화 스트레스 관련 생물학적 지표의 검출

혈액 및 조직에서 MDA, SOD 및 T-AOC의 수준은 상업적으로 이용 가능한 효소 검정 키트(중국 난징 시 소재 난징 젠청 바이오엔지니어링 연구소)를 사용하여 제조업체의 프로토콜에 따라 광도 측정법으로 측정했습니다. 이 섹션에 설명된 모든 실험은 평균과 SD를 얻기 위해 세 번 수행되었습니다.

Lipofuscin 수준은 Sohal 방법[29]에 의해 측정되었습니다. 간단히 말해서, 우리는 200 mg의 대뇌 피질을 칭량하고, 2 ml의 클로로포름-메탄올(2:1) 추출물을 첨가하고, 균질화하고 여과한 다음, 잔류물을 추출물로 세척하고, 여액을 합하고, 추출물을 5에 첨가하였다. ml를 사용하여 형광 분광계에서 형광 강도를 측정했습니다. 방출 파장은 435nm이고 여기 파장은 365nm입니다. spectrofluorometer는 0.1 M H2 SO4에서 quinine bisulfate의 1 ug/ml 용액으로 위의 파장에서 50의 편향을 제공하도록 표준화되었습니다. 결과는 상대 형광 단위/ml 클로로포름/g 젖은 조직 중량으로 표현되었습니다.

TE 활동 감지

텔로머라제 추출을 위해 약 30mg의 조직을 얼음처럼 차가운 PBS에서 두 번 세척하고 마지막으로 약 150ml의 PBS에서 균질화했습니다. TE 활성은 제조업체의 지침(Nanjing Sen Beijia Biological Technology Co., Ltd., Nanjing, China)에 따라 TE ELISA 키트를 사용하여 측정되었습니다. 분석의 민감도 한계는 TE에 대해 0.8 IU/L였습니다.

RT-PCR 분석

간 및 뇌 조직에서 SIRT1, Foxo3 및 p53의 mRNA 발현 수준을 RT PCR 분석을 사용하여 분석하였다. 전체 RNA는 Trizol을 사용하여 추출하였고, 260 및 280 nm에서의 흡광도 측정을 기반으로 ultra microspectrophotometer(Thermo Fisher Scientific, USA)로 양과 순도를 평가하였다. 정량화 후, 제조자의 지시에 따라 FastQuant RT 키트(Tiangen Biotech, Beijing, China)를 사용하여 cDNA를 합성하였다. SIRT1, Foxo3, p53 mRNA 발현 수준은 TIANGEN SuperReal PreMix Plus(Tiangen Biotech, Beijing, China)를 특정 프라이머와 함께 사용하여 RT-PCR로 측정했습니다(표 2). 정량 실시간 PCR은 각 반응의 총 부피로 20 μL를 사용하여 LightCycler 480도 PCR 시스템(Roche, Basel, Switzerland)으로 수행되었습니다. PCR 증폭은 95도에서 15분간 변성시킨 후 95도에서 10초, 59-63도(어닐링 온도)에서 20초, 72도에서 30초의 40주기를 수행한 후 72도에서 최종 배양하였다. 5분 정도 획득한 각 유전자의 주기 임계값 수(Ct 값)는 2-∆∆CT 방법[30]의 방정식에 따라 상대적 변화의 배수로 정규화되었습니다.

표 2: 프라이머 목록

웨스턴 블롯 분석

뇌 조직에서 p53, FOXO3a, HuR, RPS19BP1 및 DBC1의 단백질 발현 정도를 western blotting 방법으로 분석하였다. 제조사의 지시에 따라 RIPA Lysis Buffer(Beyotime, China)를 사용하여 뇌 조직의 전체 단백질을 추출하였다. 단백질 농도는 BCA Protein Assay Kit(Beyotime, China)를 사용하여 측정했습니다. 5 mg의 단백질을 12% SDS-폴리아크릴아미드 겔을 사용하여 분리하고 PVDF 막(0.45 μm, Millipore, USA)으로 옮겼다. 블롯은 TBS에서 5% 무지방 우유로 차단된 다음 1차 항체의 적절한 희석액과 함께 4도에서 밤새 배양되었습니다: 항-p53(SC- 6243, Santa Cruz Biotechnology), Signaling Technology), anti-HuR(#12582, Cell Signaling Technology), anti-AROS(Ab201091, abcam), anti-DBC1(#5857, Cell Signaling Technology), anti- - action(AC004, ABclonal Technology) . 과량의 일차 항체를 제거하기 위해 멤브레인을 세척한 후 멤브레인을 1:2000-1:5000(AC004 또는 AS003, ABclonal Technology) 희석으로 적절한 이차 항체와 함께 실온에서 1시간 동안 배양했습니다. 멤브레인을 3회 세척한 다음 Pierce ECL Western Blotting Substrate(Thermo Scientific)를 사용하여 시각화했습니다. -액션은 내부 통제로 사용되었습니다.

면역조직화학

조직 샘플은 외과적 제거 후 1시간 이내에 10% 중성 완충 포르말린에 고정되었고 표준 절차를 사용하여 파라핀 포매되었습니다. 그런 다음 고정된 파라핀 포매된 표본을 5-μm 두께의 절편으로 자르고 자일렌에서 파라핀을 제거하고 에탄올에서 재수화하고 항원 검색을 위해 마이크로웨이브 처리했습니다. 적절하게 희석된 1차 항체, 항-p53(SC-6243, Santa Cruz Biotechnology) 및 항-FOXO3a(#12829, Cell Signaling Technology)를 습도 챔버에서 실온에서 60분 동안 배양했습니다. 그런 다음 슬라이드를 PBS에서 헹구고 항토끼 항체에 대한 2차 항체 및 HRP의 시각화(농도 1:300, #074-1506, KPL)와 함께 배양했습니다. 그런 다음 슬라이드를 세척하고 절편을 효소-기질 디아미노벤지딘(DAB, Sigma) 용액에서 현상했습니다. 면역조직화학적으로 염색된 절편의 이미지를 Olympus 디지털 현미경(IX-73P1F, Olympus, Japan)으로 캡처했습니다.

통계 분석

결과는 최소 세 번의 독립적인 실험에 대해 평균 ± SD로 표현되었으며 SPSS 18.0 소프트웨어를 사용하여 분석되었습니다. 모리스 수중 미로 훈련 과제에서 탈출 대기 시간과 수영 속도의 그룹 차이는 반복 측정과 함께 양방향 분산 분석(ANOVA)을 사용하여 분석되었으며, 요인은 치료 및 훈련 날짜입니다. 다른 데이터는 일원 ANOVA에 이어 사후 Tukey 테스트로 분석되었습니다. 0.05 미만의 P 값은 유의한 것으로 간주되었습니다.

결론

레스베라트롤과 CR은 AAPH로 유발된 노화와 세포사멸을 억제하고 D-gal 투여로 인한 연령 관련 인지 장애를 회복시키는 능력으로 입증된 시험관 내 및 생체 내 모두에서 유사한 노화 방지 활성을 나타냈습니다. 그들의 노화 방지 메커니즘에는 TE 활동 상향 조절, 산화 손상 감소 및 SIRT1 경로 조절이 포함됩니다. 전반적으로, 시험관내 10 μM 레스베라트롤 및 생체내 고용량의 레스베라트롤은 노화 방지 및 SIRT1 수준 자극에 대해 상대적으로 더 강한 활성을 나타냈다. 이러한 결과는 CR 모방체로서 레스베라트롤의 잠재력을 암시합니다.

약어

AAPH, 2,2'-아조비스(2-아미디노프로판) 디히드로클로라이드; AMPK, 아데노신 모노포스페이트 활성화 단백질 키나아제; ANOVA, 분산 분석; SIRT1의 활성 조절자인 AROS; CR, 칼로리 제한; 유방암 1에서 결실된 DBC1; D-갈, D-갈락토스; FBS, 태아 소 혈청; Foxo3a, 포크헤드 박스 3a; HuR, Hu 항원 R; MEM, 최소 필수 배지; PBS, 인산염 완충 식염수; PGC-1 , 퍼옥시좀 증식제-활성화 수용체 G 보조활성화제-1 ; RES, 레스베라트롤; SA -gal, 노화 관련 -갈락토시다제; SD, 표준 편차; SIRT1, 침묵 정보 조절기; TE, 텔로머라제.

저자 기여

연구 구상 및 설계: 강 첸; 데이터 수집, 분석 및 해석: Juan Li, Xia Chun Zhang, Yi-Mei Liu; 지적 콘텐츠에 대한 원고의 자금 조달 및 비판적 수정: Gang Chen, Ke-Li Chen; 원고 작성: Juan Li. 모든 저자는 이 원고의 출판을 읽고 승인했습니다. 감사의 말과 기금

이 작품은 중국 박사 후 과학 재단(2016M601237), 자연 과학 재단 프로젝트(81373704, 30873292)의 지원을 받았습니다.

이해 상충

모든 참여 저자의 이해 상충이 없습니다.

참조

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