Cistanche Tubulosa의 Acteoside 및 Echinacoside 결정
Apr 27, 2023
[추상적인]목적: 고성능 액체 크로마토그래피에 의한 Cistanche Tubulosa의 결정 방법(효능 구성 요소 국측 및 에키네시아측)을 구축합니다. Cistanche tubulosa의 2개 서식지, 4개 기주 및 4개 배치의 주성분 함량을 비교합니다. Cistanche tubulosa 종류의 활용에 대한 과학적 증거를 제공합니다. 방법: Kromasil C18(4.6mm×250mm, 5μm) 크로마토그래피 컬럼 사용; 이동상: 메탄올, 아세토니트릴-1퍼센트 아세트산(14∶9∶77); 유속: 1.0 mL·min-1; 334nm의 검출 파장; 컬럼 온도는 30도였습니다. 결과: 테스트에서 두 구성 요소의 표준 곡선의 선형 범위가 양호했습니다(r=0.999,9). 평균 회수율은 96.89%, 100.7%, RSD%는 0.91%, 1.96%였다. 분석 결과 Cistanche tubulosa의 지역, 배치 및 숙주에 따라 주요 효능 성분 함량(stateside 및 echinacoside) 간에 유의한 차이가 있는 것으로 나타났다. 결론: 이 방법은 간단하고 정확하며 재현 가능합니다. Cistanche tubulosa의 의학적 가치에 대한 실험적 근거를 제공합니다.
[키워드] Cistanche tubulosa; 액티오사이드; 에키나코시드; 내용 결정
Cistanche deserticola 실험
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Cistanche deserticola는 "Shennong Materia Medica Classic"에 처음으로 기록되었으며 신장 강장제 및 양 강화 처방에서 가장 자주 사용되는 약물 중 하나입니다. 최근 몇 년 동안 Cistanche deserticola의 대규모 발굴로 인해 야생 자원이 급격히 감소했습니다. Cistanche deserticola의 대체품으로 신장에서 생산되는 관형 꽃 Cistanche deserticola는 국가 공급량의 60%를 차지했습니다.
시탕슈 파우더
에키나코사이드 및 에르고스테롤 배당체와 같은 페닐에탄올 배당체는 Cistanche tubulosa의 주요 약리학적 성분 중 하나입니다. Echinoside는 신경 보호 효과[3], 골 보호 효과[4] 및 노화 방지 효과[5]를 가지고 있습니다. 에르고스테로사이드는 기억력 장애 개선, 알츠하이머병 치료, 안드로겐과 유사한 효과가 있습니다. Tubular Cistanche: Tamarix L. [8-9]의 다양한 식물이 호스팅하는 Hongliu Dayun으로도 알려져 있습니다. 저자는 Cistanche deserticola에서 위의 두 성분의 함량을 결정하기 위해 HPLC 방법을 사용했습니다. 결정 방법 및 결과는 이 약의 품질 관리 및 약용 가치에 대한 과학적 근거를 제공합니다.
Phenylethanol glycoside는 Cistanche deserticola의 주요 활성 성분입니다.
1 기기 및 시험약
시약 및 시험약: 에키나세틴(배치 번호 111670-200401), 에르고스테롤(배치 번호 111530-200505), 중국 제약 및 생물 제품 관리 연구소에서 제공한 참조 물질. 아세토니트릴과 메탄올은 크로마토그래피상 순수하며 물은 초순수입니다. 다른 모든 시약은 분석용 순수입니다. Cistanche deserticola의 모든 의약 재료는 내몽고 의과 대학의 Ju Aihua 교수가 수집하고 확인했습니다. 기기: American Agilent 1100 고성능 액체 크로마토그래피.
2 방법 및 결과
2.1 크로마토그래피 조건 및 시스템 적응성 테스트
크로마토그래피 컬럼: Kromasil C18 크로마토그래피 컬럼(4.6 mm × 250 mm,5 μm), 이동상: 아세토니트릴 메탄올 1% 아세트산 용액(9:14:77), 검출 파장은 334 nm, 유속 속도: 1.0 mL·min-1, 컬럼 온도 30도, 주입량 20 μL. 이론적 플레이트 수는 에키나시아 배당체의 계산에 기초하여 5000 이상이어야 합니다. 두 약리학적 성분의 분리 정도 인접한 피크에서 1.5보다 큰 분리도로 양호합니다(그림 1-3 참조).
그림 1 에키나세틴 기준 물질의 크로마토그램
그림 2 ergosterol 기준 물질의 크로마토그램
그림 3 Cistanche deserticola의 크로마토그램
2.2 시료용액의 조제
약 0.5g의 Cistanche deserticola 분말(60 메쉬 체를 통해 걸러짐)을 정확히 달아 100mL 갈색 원뿔 플라스크에 넣습니다. 50 mL의 이동상을 정확하게 추가하고 질량을 측정하고 40분 동안 초음파 처리하고 실온에 둡니다. 질량을 다시 측정하고 이동상을 사용하여 무게 손실을 보상하고 잘 흔들어 여과하고 여과액을 다시 취하여 따로 둡니다.
2.3 참조 용액의 준비
에키나세틴 및 에르고스테롤 표준물질 적당량을 정밀히 달아 이동상을 가하여 각각 1 mL당 약 {{0}.14 mg 및 에르고스테롤 0.10 mg을 함유하는 용액을 조제한다.
2.4 선형 관계 검사
echinacea 기준 물질 6.4 mg과 ergosterol 기준 물질 3.0 mg을 각각 정확히 달아 10 mL 메스플라스크에 넣고 이동상으로 희석하여 고르게 흔든다. 0.1, 0.25, 0.5, 1.0, 2.0 및 3.0 mL를 정확하게 빨아들입니다. 각각 5mL 메스 플라스크에 넣고 이동상으로 눈금까지 희석하고 흔들어줍니다. 각각 20 μ L 시료를 주입하고 위의 크로마토그래피 조건에 따라 측정한다. Y축은 피크 면적을 나타내고 X축은 주입량을 나타냅니다. 표준 곡선을 그립니다. 측정된 데이터는 Echinacetin의 양이 0.26μg-7.75μg 사이에서 피크 면적과 주입량 사이에 좋은 선형 관계가 있으며 회귀 방정식은 Y=831.41X21임을 보여줍니다. 88, R2=0.9999; 에르고스테롤 배당체의 양은 0.30μg-7.50μg 사이의 피크 면적과 주입량 사이에 좋은 선형 관계가 있으며 회귀 방정식은 Y=671.53X + 158.71, R{ {39}}.9999.
Cistanche deserticola의 주요 화학 성분인 Echinoside
2.5 정밀 테스트
위의 약재 0.5g을 정밀히 달아 "2.2"의 방법에 따라 검액을 조제하여 연속 6회 주입하여 2성분 피크면적을 기록한다. 에키나코시드 피크 면적의 RSD 퍼센트는 1.46퍼센트이고; 에르고스테롤 배당체의 함량은 1.62%이다.
2.6 안정성 시험
검체 분말 {{0}}.5g을 취하여 "2.2"에 기재된 방법에 따라 시험액을 조제한다. 준비 후 0, 1, 2, 4, 8 및 12시간에 샘플을 주입합니다. 결과는 Echinacetin의 피크 면적의 RSD 백분율이 1.5%임을 나타냈고; 에르고스테롤 배당체의 함량은 2.0%이다.
2.7 반복성 테스트
신장, 허탄, 민펑에서 생산된 동일한 배치에서 각각 약 0.5g의 분말 샘플 6개의 무게를 정확히 잰다. "2.2"의 방법에 따라 피크 면적을 준비하고 측정합니다. 6개의 샘플에서 에키나코사이드 피크 면적의 RSD 백분율을 1.85%로, 에르고스테롤을 1.93%로 계산하십시오.
2.8 시료 첨가 및 회수 시험
신장, 허톈, 민펑에서 생산된 동일한 배치에서 약 0.1g의 약용 분말 샘플 6개의 정확한 무게를 잰다. 에키나세틴 및 에르고스테롤 일정량을 가하고 "2.2"에 기재된 방법에 따라 검액을 조제한다. 평균 회수율은 각각 96.89%와 100.7%였으며 RSD 비율은 각각 0.91%와 1.96%였습니다. (표 1-2 참조)
표 1 파인애플 주스 글루코사이드 회수 테스트 결과
표 2 에르고스테롤 배당체 회수 시험 결과
2.9 샘플 결정
각 튜브에서 Cistanche deserticola의 약용 분말을 취하고 "2.2"의 방법에 따라 작동합니다. 측정 결과를 표 3에 나타내었다.
표 3 Cistanche deserticola에서 Echinacetin 및 Ergosteroside의 결정
3 토론
3.1 이동상의 선택
두 세트의 이동상을 비교했습니다: 1) 메탄올 아세토니트릴 1% 아세트산 용액(14:9:77); (2) 메탄올: 1% 포름산(21.5:78.5). 결과는 이동상(1)을 사용한 용출이 중간 정도의 상대 머무름 시간, 더 적은 불순물 피크 및 두 성분의 우수한 분리를 초래한다는 것을 보여주었습니다.
3.2 추출 조건의 선택
추출 용매로 이동상을 사용하여 다양한 추출 방법(가열 환류, 초음파) 및 추출 시간(40분, 50분)이 유효성분 함량에 미치는 영향을 비교했습니다. 최종적으로 50분간 가열 환류 후 가장 높은 함량을 측정하였으나 피크 모양이 좋지 않아 선택의 여지가 없음을 알 수 있었다. 초음파 40분과 초음파 50분으로 측정한 함량이 비슷하여 추출 조건으로 초음파 40분을 선택하였다.
3.3 연구에 따르면
중국 허브 시탕슈
기주와 서식지에 따라 Cistanche deserticola의 에키나코사이드와 에르고스테롤 함량에 상당한 차이가 있어 약재의 품질이 위치와 기주에 따라 크게 영향을 받는다는 것을 나타냅니다. 따라서 관자나무의 약재의 기원, 기주 및 품질의 상관관계에 대한 체계적인 연구는 최적의 기주식물을 선정하고 관자나무의 품질을 평가하는데 큰 의의가 있다.
참조
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