Cistanche의 유효 성분: 페닐에타노이드 배당체의 분리 및 정제 방법

Mar 14, 2022

연락하다:joanna.jia@wecistanche.com


고속 역류 크로마토그래피에 의한 Cistanche Deserticola에서 페닐에타노이드 배당체의 분리 및 정제


Li a,b, Rong Tsao b,*, Raymond Yang b, Chunming Liu a,

J. Christopher Young b, Honghui Zhu b

중국 장춘시 장춘사범대학교 화학과

b Guelph Food Research Centre, Agriculture and Agri-Food Canada, 93 Stone Road West, Guelph, Ontario, Canada N1G 5C9

2007년 5월 31일 접수; 2007년 10월 16일 수정된 양식으로 접수됨; 2007년 10월 29일 수락됨


추상적인:

다섯페닐에타노이드 배당체(박사),에키나코사이드, cistanoside A, acteoside, isoacteoside 및 20-acetylacteoside는시스탄체 데저티콜라에틸 아세테이트-에탄올-물(5:{4}}.5:4.5, v/v/v)로 구성된 두 가지 이상 시스템을 사용하는 고속 역류 크로마토그래피(HSCCC)에 의해 처음으로 에틸 아세테이트-n-부탄올-에탄올-물({{1{12}}}}.5:{14}}.5:0.1:1, v/v/v/v). 총 28.5mg의 에키나코사이드, 18.4mg의시스타노사이드 A, 14.6mg악티오사이드, 30.1 mg의 isoacteoside 및 25.2 mg의 20-acetylacteoside는 1412 mg의 n-부탄올 추출물로부터 정제되었습니다.시스탄체 데저티콜라, 각각은 HPLC에 의해 측정시 92.5% 이상의 순도를 갖는다. 구조는 음이온 모드에서 머무름 시간, UV, LC-ESI-MS로 식별되었으며 NMR 실험으로 확인되었습니다. 5가지 화합물의 특징적인 LC-ESI-MSn 단편화 패턴이 논의되고 이 중요한 약용 식물에서 PhGs의 구조적 식별을 위한 매우 구체적이고 유용한 도구인 것으로 밝혀졌습니다.

Crown Copyright © 2007 발행: Elsevier Ltd. 판권 소유.


키워드:시스탄체 데저티콜라; 페닐에타노이드;에키나코사이드; 시스타노사이드 A;악티오사이드; 이소악티오사이드; 20-아세틸락테오사이드; HSCCC; LC-ESI-MS; NMR


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1. 소개

시스탄체 데저티콜라YC Ma는 잘 알려진 중국 약초이며 오늘날의 기능성 식품 성분 또는 식품 보조제와 유사한 전통 제제에 널리 사용되었습니다(Wong, Li, Cheng, & Chen, 2006). C. Deserticola의 주요 생리 활성 성분은 다음과 같습니다.페닐에타노이드다음을 포함한 배당체(PhGs)에키나코사이드, 악테오사이드, 이소악테오사이드, 20-아세틸락테오사이드 및시스타노사이드 A(Kobayashi, Karasawa, & Miyase, 1984; Kobayashi et al., 1987). PhGs는 식물계에 널리 분포되어 있으며 간보호(Xiong et al., 1998), 항염증, 항통각수용 활성(Schapoval et al., 1998) 및 항산화 활성(Cheng)과 같은 다양한 생물학적 기능에 대해 광범위하게 연구되었습니다. , Wei, Guo, Ni, & Liu, 2005; He, Lau, Xu, Li, & But, 2000; Li, Wang, & Wang, 1997; Li, Wang, Zheng, Liu, & Jia, 1993; Wang, Jiang , Wu, & Wang, 2001; Xiong, Kadota, Tani, & Namba, 1996), 성기능 개선(Xie & Wu, 1993; Zong, He, Wu, & Chen, 1996), 진정 효과(Lu, 1998) .

위의 중요한 생물학적 활성 때문에 많은 양의 순수 화합물이 참조 표준으로 그리고 한약의 사용과 관련된 다양한 시험관 내 및 생체 내 연구에 시급히 필요합니다. 따라서 PhG의 분리, 정제 및 구조적 특성화를 위한 효과적인 방법이 필요합니다. 그러나 이러한 작업은 일반적으로 샘플 정리 및 분리를 위해 여러 크로마토그래피 단계를 사용해야 합니다(Gross, Lahloub, Anklin, Schulten, & Sticher, 1988; Nishimura, Sasaki, Inagaki, Chin, & Mitsuhashi, 1991; Ravn, Nishibe). , Sasahara, & Li, 1990; Shoyama, Matsumoto, & Nishioka, 1987), 이는 분리 동안 고체 지지체에 PhGs의 비가역적 흡착으로 인해 일반적으로 낮은 회수율을 초래합니다(Lei et al., 2001). 대조적으로, 고속 역류 크로마토그래피(HSCCC)는 식물 추출물에서 일부 PhG를 분리하기 위한 기존의 크로마토그래피 기술에 대한 효과적인 대안이 되었습니다(Lei et al., 2001; Li et al., 2005). Lei et al. 성공적으로 분리악티오사이드및 20-HSCCC를 사용하여 Cistanches salsa(CA Mey.) G. Beck의 아세틸락테오사이드(Lei et al., 2001). 이 논문의 저자들은 이전에악티오사이드및 HSCCC에 의한 Plantago psyllium L.의 isoacteoside(Li et al., 2005). 그러나 여러 PhGs의 분리 및 정제에 대한 보고서는 발표되지 않았습니다.시스탄체 데저티콜라HSCCC를 사용합니다. 표준이 없기 때문에 LC-MS 방법이 개발되어 식물 추출물에서 일부 PhGs의 신속한 특성화 및 식별을 위한 강력한 분석 도구로 사용되었습니다(Li et al., 2005; Wang et al., 2000).

이 논문에서 우리는 echinacoside의 제조를 위해 개발된 HSCCC 방법을 보고합니다.시스타노사이드 A, 악테오사이드, 이소악테오사이드 및 20-아세틸락테오사이드시스탄체 데저티콜라. 분리된 5개 PhG의 특성화 및 분석은 인라인 ESI 질량 분석 및 NMR 실험과 결합된 LC를 사용하여 수행되었습니다. 이 논문에서는 5가지 PhGs의 머무름 시간, 분자량 및 특징적인 조각 이온을 제시하고 논의합니다. 이 조사에서 확인된 5개의 PhGs의 구조는 그림 1과 같다.

echinacoside in cistanche

에키나코사이드시스탄체에서

2. 실험적


2.1. 화학물질 및 시약


악티오사이드Sigma-Aldrich(Oak-Ville, ON)에서 구입했으며 echinacoside는 ChromaDex(Santa Ana, CA)에서 구입했습니다. Isoacteoside는 P. psyllium L.에서 분리되었습니다(Li et al., 2005).시스탄체 데저티콜라Beijing TongRenTang Medicinal Store(중국)에서 구입했습니다. 모든 용매는 HPLC 등급이었고 Caledon Laboratories Ltd.(Georgetown, ON)에서 구입했습니다.

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2.2. 샘플 준비

시스탄체 데저티콜라(20 g)을 100 mL의 80% 수성 에탄올로 각각 12시간 동안 실온에서 5회 추출했습니다. 추출 혼합물을 Whatman No.1 필터 페이퍼(Whatman International Ltd., Maidstone, England)를 통해 여과할 때마다. 합한 여액을 40도 미만의 진공 하에 100mL로 농축시켰다. 얻어진 수용액을 헥산 100mL로 2회 탈지한 후, n-부탄올 100mL로 5회 추출하였다. n-부탄올 층을 합하고 40도 미만의 진공 하에 농축 건조시켜 2.2g의 n-부탄올 추출물을 수득하였다. 추출물은 HSCCC 분리 전에 -20도에서 저장되었습니다.


2.3. HSCCC 분리 절차

예비 HSCCC는 모델 CCC{{0}} 고속 역류 크로마토그래피(Pharma-Tech Research, Baltimore, Maryland USA)에서 수행되었습니다. 이 장치에는 직렬로 연결된 3개의 예비 코일이 있습니다(총 부피, 325mL). 장치의 회전 속도는 0에서 2000rpm 사이에서 조절될 수 있습니다. HSCCC 시스템은 HPLC 펌프(Pharma-Tech Research, Baltimore, Maryland, USA), Model 450 UV 검출기(Alltech, USA), Model L 120 E 평판 기록기(Linseis Inc., Princeton Jct, USA), 분획 수집기(Advantec MFS Inc., USA) 및 10-mL 샘플 루프가 있는 샘플 주입 밸브.

에틸 아세테이트-에탄올-물(5:{2}}.5:4.5, v/v/v)의 혼합물을 분별 깔때기에서 세게 흔들고 실온에서 방치하고 분리합니다. 두 단계가 평형에 도달한 후 HSCCC에서 사용되었습니다. 코일형 기둥 전체는 먼저 고정상 역할을 하는 상층으로 채워졌습니다. 그런 다음 하부 층(이동상)을 1.5mL/min의 유속으로 컬럼의 헤드 엔드로 펌핑했습니다. 회전 속도는 1{16}}5{20}} rpm으로 설정되었습니다. 시스템이 유체 역학에 도달한 후 에틸 아세테이트-에탄올-물(5:0.5:4.5, v/v/v)의 혼합물 8ml에 용해된 샘플(매회 약 230mg)을 주입 밸브에 로드했습니다. 평형. 이 2상 용매 시스템은 0.87, 1.11 및 1.32인 분배 계수(K)를 기반으로 선택되었습니다.악티오사이드, isoacteoside 및 20 acetylacteoside 각각. K 값은 HPLC에 의해 결정된 동일한 화합물의 상부 및 하부 층 농도의 비율이었다(도 2). 컬럼의 출구에서 나오는 유출물은 254 nm에서 UV 검출기로 연속적으로 모니터링되었고 각 튜브에 대해 4분으로 설정된 분획 수집기로 테스트 튜브에 수집되었습니다.

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2.4. LC 조건


n-부탄올 추출물에서 PhGs 분석을 위해 정적 자동 샘플러와 포토다이오드 어레이 검출기(DAD)를 사용했습니다.시스탄체 데저티콜라및 HSCCC 분리로부터 수집된 분획. 분리는 C18 보호 컬럼이 있는 Phenomenex ODS-C18 컬럼(250 × 4.6 mm, 5 lm)에서 수행되었습니다. 이원 이동상은 아세토니트릴(용매 A)과 2% 아세트산을 함유한 물(용매 B)로 구성되었습니다. 모든 용매는 다음을 통해 여과되었습니다.

{{0}}.45lm 필터를 사용하십시오. 유속은 25분의 총 실행 시간 동안 1.{6}}mL/min으로 일정하게 유지되었습니다. 시스템은 기울기 프로그램으로 실행되었습니다. 0–2{16}} 분: 90% B에서 60% B; 20–22분: 60% B에서 0% B; 및 22-25분, 0% B에서 90% B. 샘플 주입 부피는 10 lL입니다. 관심 피크는 DAD 검출기에 의해 320 nm에서 모니터링되었습니다.


2.5. LC-ESI-MS 실험


LC-MS 실험은 ESI(electrospray ionization) 소스가 장착된 Finnigan LCQ DECA 이온 트랩 질량 분석기(Thermo Finnigan, San Jose, CA, USA)를 사용하여 수행되었습니다. 샘플은 동일한 크로마토그래피 조건에서 분석되었습니다. 데이터 수집에는 네거티브 모델이 사용되었습니다. 시스 가스 및 보조 유량은 각각 96 및 7(임의 단위)로 설정되었습니다. 모세관 전압은 29V로 설정하고 온도는 350도로 조절하였다. 입사 렌즈 전압은 40V로 고정되었고 다극 RF 진폭은 540V로 설정되었습니다. ESI 바늘 전압은 4.5kV에서 제어되었습니다. 튜브 렌즈 오프셋은 16V, 다중극 렌즈 1 오프셋은 8.20V, 다중극 렌즈 2 오프셋은 10.5V입니다. 전자 증배관 전압은 이온 검출을 위해 980V로 설정되었습니다.

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2.6. 식별을 위한 NMR


NMR 스펙트럼은 Bruker Avance{0}} 분광계(Bruker BioSpin Ltd., Milton, Canada)에서 기록되었습니다. 화합물 2 및 5(사용 가능한 표준 없음)만이 NMR 실험에 적용되었습니다. 샘플을 CD3OD에 용해시켰다.

Phenylethanoid Glycosides in cistanche (2)

3. 결과 및 논의


3.1. HSCCC 분리


n-부탄올 추출물시스탄체 데저티콜라HSCCC에 의해 분리된 각 피크에 해당하는 분획을 HPLC로 분석하였고, 그 결과를 그림 2에 나타내었다. ,

각각 13.3분과 16.2분.

성공적인 HSCCC 분리는 원하는 화합물에 대해 약 1의 이상적인 분배 계수(K)를 제공하는 적합한 2상 용매 시스템에 크게 좌우됩니다. 이러한 2상 시스템은 또한 상당히 짧은 안정화 시간을 제공해야 합니다(Chen, Games, & Jones, 2003; Foucault & Chevolot, 1998; Oka, Oka, & Ito, 1991). 우리의 실험에서 우리는 표적 화합물의 용해도에 따라 4가지 계열의 용매 시스템을 선택했습니다.시스탄체 데저티콜라. HPLC를 이용하여 각 상의 농도를 측정하여 목적 화합물의 K 값을 계산하였다. 두 시스템, 에틸 아세테이트-n-부탄올-에탄올-물(4:0.6:0.6:5, v/v/v/v) 및 에틸 아세테이트-물(1: 1, v/v)는 이전에 HSCCC에서 분리하기 위해 사용되었습니다.악티오사이드및 20-아세틸락테오사이드 fromC. 살사,악티오사이드, 및 P. Psyllium의 isoacteoside 각각(Lei et al., 2001; Li et al., 2005). 첫 번째 시스템은 상대적으로 안정 시간이 짧았지만 PhGs를 분리하는 데 성능이 좋지 않았습니다.시스탄체 데저티콜라, 화합물 1과 2에 대한 낮은 K 값과 화합물 3-5에 대한 높은 K 값 때문입니다. K 값은 두 번째 시스템에서 화합물 1-4에 대해 매우 낮았지만 화합물 5에 대해서는 매우 높았습니다(표 1). 에틸 아세테이트-에탄올-물(5:{1{16}}}}.5:4.5, v/v/v)을 포함하는 수정된 시스템은 0.87, 1.11에서 화합물 3-5에 대한 이상적인 K 값을 제공했습니다. 및 1.32로 각각 나타났고, 이들 3가지 화합물의 양호한 분리를 초래하였다(도 3A 및 B). 그러나 이 시스템이 생산한

화합물 1과 2에 대한 K 값이 너무 작아 두 화합물이 용매 전면 근처에서 동시 용출됩니다(그림 3A의 분획 1). 시스템 추가 수정(에틸 아세테이트-n-부탄올-에탄올-물(0.5:{9}}.5:{11}}.1:1, v/v/v/ v) 화합물 1 및 2에 대한 K 값을 각각 0.52 및 0.92로 상승시켜 완전한 분리를 유도했습니다(그림 3C). 그림 3A는 a의 HSCCC 분리를 보여줍니다. 230mg의 n-부탄올 추출물을 함유한 샘플시스탄체 데저티콜라에틸 아세테이트-에탄올-물 사용(5:0.5:4.5, v/v/v). HPLC에 의해 화합물 3, 4 또는 5만 포함하는 것으로 확인된 분획을 별도로 합쳤고, 화합물 3과 4를 포함하는 분획을 모아서 동결 건조하고 추가 분리를 위해 HSCCC에 다시 처리했습니다(그림 3B). 위에서 설명한 2단계 HSCCC 분리를 통해 1412mg의 n-부탄올 추출물에서 총 14.6mg, 3{31}}.1mg 및 25.2mg의 화합물 3-5가 생성되었습니다. 그림 3C는 에틸 아세테이트-n-부탄올-에탄올-물(0.5:{35}}.5 :0.1:1, v/v/v/v). 총 28.5 및 18.4 mg의 화합물 1 및 2를 얻었다. 동결 건조된 화합물 1-5의 크로마토그래피 순도는 92.5% 이상으로 LC-ESI-MS 및 NMR 분석에 직접 사용되었습니다.


3.2. LC-ESI-MS 및 NMR에 의한 구조 식별


화합물 1, 3 및 4의 잠정적 식별은 정통 에키나코사이드와 일치하는 머무름 시간 및 UV 스펙트럼 데이터에 의해 달성되었습니다.악티오사이드, 및 이소악티오사이드(그림 2). 화합물 2와 5는 알려지지 않았지만, 5가지 화합물 모두의 UV 스펙트럼은 매우 유사하여 유사한 구조적 특징을 나타냅니다.

이들 5개 화합물의 구조를 더 조사하기 위해 LC-ESI-MSn 실험을 시도하였고 그 결과를 그림 4 및 표 2에 나타내었다. [MH] - 네거티브 모드에서 각각 m/z 785, 799, 623, 623 및 665. 이량체 [2M H]- 이온은 그림 2의 피크 1-4에서도 관찰되었습니다. 이는 피크 1-5의 분자량이 각각 786, 800, 624, 624 및 666임을 확인했습니다. LC-MSN 데이터(표 2)는 5가지 PhG에 대한 매우 유용한 구조적 정보를 제공했습니다.


The K (partition coefficient) values of compounds 1–5 in different solvent systems

실험 절차: 미리 평형화된 2상 용매 시스템의 각 상의 1mL가 첨가된 10mL 시험관에서 각 샘플의 약 1mg을 칭량했습니다. 시험관의 마개를 닫고 1분간 세게 흔든 다음 완전히 분리될 때까지 방치하였다. 각 층의 100 lL의 분취량을 취하여 진공에서 건조될 때까지 별도로 증발시켰다.<40 °c.="" the="" residue="" was="" dissolved="" in="" 10="" ll="" methanol="" and="" analyzed="" by="" hplc="" for="" determining="" the="" partition="" coefficient="" (k)="" of="" compounds="" 1–5.="" the="" k="" value="" was="" expressed="" as="" the="" peak="" area="" of="" the="" target="" compound="" in="" the="" upper="" phase="" divided="" by="" that="" in="" the="" lower="">

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카페오일 부분(162), 포도당 부분(162), 람노스 부분(146), CH2 라디칼(14) 및 COCH2 기(42).

피크 1의 LC-ESI-MS는 그림 4A에 나와 있습니다. 탈양성자화된 분자 이온 [MH] - m/z 785에서 풍부하고 이량체 탈양성자 분자

LC–ESI-MSN data of peaks 1–5 shown in Fig. 2

이온 [2M H]- m/z 1571에서 음의 모드에서 관찰되었으며, 이는 echinacoside의 분자량과 동일한 786의 분자량을 시사합니다. m/z 785 이온의 LC-MS2 실험에서 추가 조사는 [M 162 H]—. m/z 623의 LC-MS3 스펙트럼은 m/z 477 및 461에서 두 개의 주요 이온과 ​​m/z 315 및 179에서 두 개의 작은 이온을 나타냈습니다(그림 3C, 표 2). m/z 623과 조각 이온 m/z 477 및 461 사이의 질량 차이는 각각 146 및 162였으며, 이는 람노오스 단위 및 포도당 부분 또는 카페 느낌 부분[M 162 H]의 손실에 해당합니다. m/z 623 이온은 또한 m/z 315 이온을 생성하기 위해 caffeoyl 부분과 rhamnose 부분을 잃었습니다. m/z 179의 이온은 카페인 부분의 분열에서 생성되었으며, 음전하가 카페인 부분 부분에 남아 있습니다. 진정한 echinacoside에 대한 LC-ESI-MSN 실험은 동일한 단편화 패턴을 보여주었습니다. 따라서 피크 1은 에키나코사이드인 것으로 확인되었습니다.

피크 2의 경우 LC-ESI-MS는 탈양성자화된 분자 이온[MH]으로 m/z 799를 나타내고 이량체 이온으로 m/z 1599를 나타내어 분자 질량이 800임을 암시합니다. MS2 실험 동안 m/z 799개의 이온이 3개의 딸을 형성

m/z 637, 623 및 475에서 이온(표 1). m/z 637의 이온은 다시 m/z 799의 모 이온으로부터 직접 생성되었는데, 이는 카페오일[M-162-H]- 또는 포도당 부분[M-162-H]-의 중성 손실로 인해 발생했습니다. m/z 623에서의 이온은 CH2 라디칼의 손실로 인한 것입니다. m/z 475에서 이온은 카페인 잔기[M 162 H]-와 모 이온의 포도당 잔기 모두의 중성 손실로 인해 형성되었습니다. m/z 637에 대한 MS3 실험은 m/z 619, 491 및 475에서 3개의 이온을 생성했으며, 이는 각각 물, 람노오스 단위 및 포도당 부분의 손실에 해당합니다. m/z 623 딸 이온은 MS3 연구에서 m/z 461 및 315를 생성했으며, 이는 위에서 논의한 바와 같이 에키나코사이드와 동일한 단편화 경로를 따랐습니다. LC-ESI-MSN 데이터는 다음과 같이 피크 2에 대한 잠정적 식별을 지원했습니다.시스타노사이드 A.

LC-ESI-MS 실험도 피크에 대해 수행되었습니다.

3 및 4(도 2에서 tR 12.49 및 13.46분). 두 피크 모두 음의 모드에서 m/z 623에서 동일한 [MH]- 이온과 m/z 1247에서 이량체를 나타냈으며(표 1), 동일한 분자량을 가진 이성질체일 가능성이 있음을 나타냅니다.

624, 와 동일악티오사이드및 이소악티오사이드. [MH]- 이온의 MS2 스펙트럼은 또한 m/z 461의 동일한 딸 이온 하나를 보여주었으며, 이는 모 이온 m/z 623에서 ca-오일 부분의 손실을 나타냅니다(표 1). 두 화합물에 대해 유사한 MS3 스펙트럼이 얻어졌습니다. 피크 3의 경우 m/z 461에서 이온의 MS3 스펙트럼은 m/z 315, 161 및 135에서 3개의 이온을 형성했습니다. m/z 315는 앞서 논의한 바와 같이 람노스를 잃은 후에 형성됩니다. 이온 m/z 161은 caffeoyl 모이어티의 절단으로 인해 생성되었으며, 그 후 하나의 물이 추가로 손실되었습니다. 전하는 caffeoyl 부분에 남아 있었다. m/z 135 [aglycone 18 H]의 이온은 C1 위치의 글리코시드 결합이 절단되어 물 1개가 추가로 손실되어 발생하여 전하가 aglycone 부분에 남게 됩니다. 피크 4의 MS3 스펙트럼은 m/z 135에서 누락된 이온을 제외하고 피크 3과 동일한 단편화 경로를 따랐습니다. 이 두 화합물의 분자 이온 및 단편화 패턴은 에 대한 문헌 데이터와 일치합니다.악티오사이드및 isoacteoside(Wang et al., 2000), 추가 이온 m/z 153이 발견되었고


Proton NMR data of cistanoside A and 20-acetylacteoside

[aglycone H]로 지정 - Wang et al. (Wang et al., 2000). 이 이온은 우리 실험에서 m/z 135를 제공하기 위해 불안정하고 물을 잃었을 수 있습니다. MS 데이터 및 표준과 피크 3 및 4의 일치하는 머무름 시간을 기반으로 하여 다음과 같이 식별됩니다.악티오사이드및 isoacteoside 각각.

피크 5의 LC-ESI-MS 데이터는 표 2에 나와 있습니다. 탈양성자화된 분자 이온 [MH]-(m/z 665)은 음 모드에서 발견된 유일한 이온으로, 분자 질량이 666임을 의미합니다. 세 개의 딸 이온 MS2 실험에서 m/z 623, 503 및 461에서 관찰되었습니다(표 2). m/z 623 및 503에서 딸 이온은 각각 COCH2 그룹과 카페오일 부분의 손실에 의해 부모 이온으로부터 직접 형성되었습니다. m/z 461에서 이온은 모 이온에서 caffeoyl과 COCH2 부분 [M 162 42 H]의 손실에서 비롯되었습니다. MS 실험에서 m/z 623은 m/z 461을 생성하고 m/z 503은 m/z 485, 461 및 315에서 3개의 이온을 생성했습니다. 딸 이온 m/z 461의 MS3 스펙트럼은 443에서 2개의 이온을 생성했습니다. 및 315. 피크 5의 LC-MSN 단편화 패턴을 이 연구에서 보고된 다른 화합물 및 보고된 다른 화합물과 비교함으로써(Li et al., 2005; Wang et al., 2000), 피크 5가 구조적으로 매우 관련이 있다는 결론을 내렸습니다. 유일한 차이점은 R3 위치의 COCH3 단위입니다. 따라서 피크 5는 20-acetylacteoside로 잠정적으로 확인되었습니다(그림 1).

2개의 잠정적으로 확인된 화합물인 피크 2(cistanoside A)와 피크 5(20-acetyl-acteoside)의 구조는 1H NMR에 의해 확인되었습니다. 표 3에 나타난 바와 같이 화합물 2와 5의 모든 proton의 화학적 이동 및 결합 상수는 보고된 NMR 데이터와 일치합니다.시스타노사이드 A및 20-아세틸락테오사이드 각각(Kobayashi et al., 1984, 1987). 2D NMR 실험(장거리 COSY, ROESY 및 CH 상관관계)도 본 연구에서 수행되었으며 식별을 추가로 확인했습니다(데이터는 표시되지 않음).

phenylethanoid glycosides in cistanche

페닐에타노이드시스탄체의 배당체

4. 결론


본 논문에서 HSCCC는 echinacoside의 분리 및 정제에 성공적으로 사용되었으며,시스타노사이드 AC. Deserticola의 n-부탄올 추출물의 , 액테오사이드, 이소악테오사이드 및 20-아세틸락테오사이드. 따라서 이것은 생체 활성 물질의 반-분취 분리를 위한 입증된 수단입니다. 한편, Cistanche Deserticola의 5개 PhGs의 구조는 LC-ESI-MSN을 사용하여 조사되었습니다. PhGs의 몇 가지 특징이 발견되어 구조의 기능 그룹을 결정할 수 있었습니다. 따라서 LC-ESI-MSN 방법은페닐에타노이드및 그들의 배당체시스탄체 데저티콜라특히 NMR 데이터로 입증될 때 추출합니다.


승인


저자는 NMR 실험에 도움을 준 캐나다 온타리오주 구엘프 대학교의 핵자기 공명 센터의 준 구에게 감사를 전합니다. 이 프로젝트는 중국 길림성(No. 20060904)의 자금으로 부분적으로 지원되었습니다.

acteoside in cistanche (3)

참고문헌


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