추상적인:호박씨 오일은 여러 가지 건강상의 이점을 촉진하는 영양소와 생체 활성 성분이 풍부한 부산물입니다. 본 연구는 Cucurbita moschata Duch에서 추출한 호박씨유의 화학적 조성, 항산화 및 약리활성을 비교하고자 하였다. 엑스 푸아르. (PSO1) 및 Cucurbita moschata (일본 호박) (PSO2) 수성 효소 추출. 효소 추출 공정에는 pectinase, cellulase, protease(1:1:1)로 구성된 효소 혼합물을 사용하였다. 오일의 지방산 조성은 지방산 메틸 에스테르/가스 크로마토그래피-질량 분석법을 사용하여 결정되었습니다. 항산화 활성 분석은 안정한 자유 라디칼 diphenylpicrylhydrazyl, 라디칼 양이온 2,20 -azinobis-(3- ethylbenzothiazoline-6-sulfonate, ferric 환원/항산화력, ferric thiocyanate assay를 이용하여 측정하였다. 피부노화 및 미백과정에 관여하는 효소를 조사한 결과 리놀레산은 모든 호박씨유의 주성분이며 올레산, 팔미트산, 스테아르산도 상당량이 검출되었으며, PSO2는 호박씨유에 비해 항산화 활성이 가장 높았다. PSO1 및 상업용 호박씨유(COM1 및 COM2) PSO1 및 PSO2 모두 광고용보다 히알루로니다제, 콜라게나제 및 티로시나제에 대해 더 높은 억제 효과를 나타내어 수성 효소 추출을 통해 항산화, 항노화, 미백작용이 있어 추후 약리학적 연구에 도움이 되며 피부미용기능식품으로 활용될 수 있습니다.

관련 연구에 따르면,담배"생명을 연장하는 기적의 허브"로 알려진 일반적인 허브입니다. 주요 구성 요소는시스타노사이드등의 다양한 효과가 있습니다.산화 방지제, 항염증, 그리고면역 기능 촉진. cistanche와피부 호분cistanche의 항산화 효과에 있습니다배당체. 인간 피부의 멜라닌은 티로신의 산화에 의해 생성됩니다.티로시나제, 산화 반응에는 산소의 참여가 필요하므로 체내의 산소가 없는 라디칼은 멜라닌 생성에 영향을 미치는 중요한 요인이 됩니다. Cistanche는 산화 방지제인 cistanoside를 함유하고 있으며 신체의 자유 라디칼 생성을 감소시킬 수 있습니다.멜라닌 생성 억제.

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1. 소개

호박은 Cucurbita 속과 Cucurbitaceae과에 속하며 멕시코 북부에서 재배되어 유럽, 서부 아메리카 및 아시아로 퍼진 흔하고 유명한 식물입니다[1]. 호박은 토코페롤, 카로티노이드, -시토스테롤과 같은 식물화학적 화합물과 함께 단백질, 탄수화물, 지질, 섬유질 등의 풍부한 영양소를 함유하고 있는 기능성 식품으로 꼽힌다[2]. 호박의 여러 부위에서 나오는 식물성 영양소는 약리작용을 하는 것으로 밝혀졌습니다[2]. 호박 껍질 추출물은 동물 모델에서 유익한 화상 상처 효과를 나타냈습니다[3]. 호박 펄프는 항산화, 항염증 및 항혈관신생 활성[2]과 쥐의 항피로 활성[4]을 입증했습니다. 또한 호박씨는 심혈관계 사망 위험을 낮추는 필수 지방산과 피토스테롤의 좋은 천연 공급원입니다[5,6]. 호박씨 기름은 호박씨 가공의 부산물이며 다양한 지방산과 α-카로틴, α-토코페롤, 비타민 B, 루테인, 파이토스테롤 및 기타 미네랄과 같은 생리활성 화합물이 풍부합니다[7,8]. 오일은 항산화, 항염증, 항균 및 상처 치유 효과를 발휘합니다[1,9]. 또한 고혈압, 당뇨병 및 암과 같은 질병에 대한 몇 가지 건강상의 이점이 있습니다 [8,10].

저온 압착[11] 및 고압 추출[12]과 같은 기계적 방법을 포함하여 종자 오일을 추출하는 다양한 방법이 개발되었습니다. 헥산, 에틸 아세테이트, 아세톤 및 메탄올과 같은 유기 용매를 사용한 종자유의 용매 추출도 문서화되었습니다[13,14]. 효소 보조 추출은 환경 친화적이고 안전한 기술이기 때문에 식물성 오일 산업의 대체 방법입니다. 수성 효소 추출의 주요 메커니즘은 식물 물질의 세포벽을 가수분해하고 파괴하여 더 많은 투과성을 유도하고 오일 상을 포함한 생체 활성 성분을 방출하는 것입니다[15]. 이 추출에 사용되는 다양한 효소 혼합물은 pectinase, cellulase, hemicellulase, arabinose, α-glucanase, xylanase로 구성되어 있다[16,17]. 예를 들어 온도, pH, 반응 시간, 입자 크기 및 효소 농도와 같은 효소 혼합물의 최적화된 조건도 효소 활성을 향상시켰습니다[16]. 오늘날 이 방법은 많은 과일과 식물 종자에서 오일을 추출하는 데 널리 사용되었습니다[18,19]. 이전의 일부 연구에서는 높은 수율과 효과적인 약리 활성을 얻기 위해 호박씨 오일의 최적화된 조건을 입증했습니다[20,21].

현재 사람들은 호박씨유를 디저트나 샐러드 드레싱으로 섭취하고 있으며, 화장품에서도 인기 있는 성분입니다. 피부 노화는 주름, 탄력 손실, 수분 손실, 산화 스트레스, DNA 손상 및 고급 당화 최종 생성물 축적으로 인한 거친 질감을 특징으로 하는 복잡한 생물학적 과정입니다[22]. 피부의 중요한 구성성분인 히알루론산, 콜라겐, 엘라스틴은 각각 히알루로니다아제, 콜라게나아제, 엘라스타아제 효소에 의해 분해되어 피부 노화를 유발할 수 있습니다. 올리브 오일, 해바라기씨 오일, 포도씨 오일, 호호바 오일과 같은 여러 식물성 오일은 수분을 유지하고 피부 장벽 기능을 개선하며 피부 노화를 방지하는 피부 미용 성분으로 사용되었습니다[23]. 또한, 피부 색소 침착은 멜라닌 생성과 관련된 인간의 가변적이고 눈에 띄는 표현형이며 티로시나아제 효소에 의해 조절됩니다[24]. 현재 다양한 식물 추출물이 미백제 역할을 하는 멜라닌 생성을 감소시키는 화장품 및 의약품에 대해 테스트되었습니다[25,26].

2. 재료 및 방법

2.1. 식물 재료

2.2. 화학물질 및 시약 

2.3. 수성 효소 추출

C. moschata Duch의 호박씨 오일. Ex Poir와 C. moschata(일본호박)는 Kanopka et al. (2016), 효소 농도, 효소 대 기질 비율, 반응 온도, pH 및 반응 시간을 포함합니다[21]. 펙티나제, 셀룰라제 및 프로테아제를 포함한 세 가지 다른 유형의 효소를 1:1:1 중량비로 결합하여 농축된 효소 칵테일을 생성했습니다. 그 후, 생성된 농축물 칵테일을 탈이온수로 희석하여 2% w/w 수성 효소 혼합물을 생성했습니다. 껍질이 없는 호박 종자를 생성된 수성 효소 혼합물에 1:1의 중량비로 첨가하였다. 이어서 혼합물을 실온에서 균질해질 때까지 Moulinex DB81 블렌더를 사용하여 미세하게 분쇄하였다. 생성된 슬러리의 pH를 0.1M HCl을 사용하여 4.7로 조정하고 54℃에서 15시간 동안 배양하였다. 슬러리를 실온으로 냉각시킨 후, 11,500×g에서 10분 동안 원심분리하였다. 유상인 상청액의 상층을 수집하였다. 추출과정에서 생성된 크림은 유화되지 않고 마이크로피펫을 이용하여 사이펀으로 제거하였다. 호박씨의 잔류물은 진공 상태에서 Whatman No.1 여과지를 통해 여과하여 제거했습니다[21]. C. moschata Duch의 호박씨 오일. Ex Poir(PSO1) 및 C. moschata(일본 호박)(PSO2)는 차후 실험 전까지 잘 밀폐된 내광성 용기에 실온에서 보관하였다.

2.4. Fatty Acid Methyl Ester/Gas Chromatographic-Mass Spectrometric (FAME/GC/MS)법을 이용한 호박씨유의 화학성분 측정

2.5. 항산화 활성의 결정

2.5.1. 2,2-Diphenyl-1-Picrylhydrazyl (DPPH) 라디칼 소거 분석

DPPH 라디칼(DPPH• ) 소거 활성은 Chaiyana et al. (2017) [27]. 간단히 말해서 20µL의 오일 샘플(PSO1, PSO2, COM1, COM2)과 DMSO에 용해된 리놀레산을 96-웰 플레이트에서 180µL의 167µM DPPH 에탄올 용액과 혼합한 다음 어둠 속에서 실온. 아스코르브산(1 mg/mL)을 양성 대조군으로 사용하였다. 광학 밀도(OD)는 마이크로플레이트 판독기(Microplate reader EZ Read 2000, Biochrome, England)를 사용하여 520 nm에서 측정하였다. 실험은 3중으로 수행되었으며 3명의 독립 실험에서 수행되었습니다. DPPH 억제율은 방정식 (1)을 사용하여 계산되었습니다.

DPPH 억제(퍼센트)={[(ODA - ODB) - (ODC - ODD)]/(ODA - ODB)} × 100, (1)

2.5.2. 2,20 -아지노-비스-3-에틸벤즈티아졸린-6-술폰산(ABTS) 분석

ABTS 양이온 라디칼(ABTS• plus ) 소거 활성은 Chaiyana et al. (2017) 및 Paradee 외. (2019) [27,28] 약간의 수정. ABTS• plus는 3mL의 2.45mM 과황산칼륨과 함께 2mL의 7mM ABTS를 추가하여 생성하고 어두운 곳에서 실온에서 16-24시간 동안 배양했습니다. 생성된 ABTS• plus는 이후 에탄올로 희석되어 750 nm에서 0.7 ± 0.1의 OD를 얻었습니다. 간단히 말해서, 20µL의 오일 샘플(PSO1, PSO2, COM1, COM2) 및 DMSO에 용해된 리놀레산을 96-웰 플레이트에서 180µL의 ABTS• 및 에탄올 용액과 혼합하고 실온에서 5분 동안 배양했습니다. . OD는 마이크로플레이트 리더(Microplate reader EZ Read 2000, Biochrome, England)를 사용하여 750 nm에서 측정하였다. 아스코르브산(1 mg/mL)을 양성 대조군으로 사용하였다. 표준 곡선은 2.5–30 µg/mL 범위의 다양한 Trolox 농도에 대해 750 nm에서의 흡광도를 플로팅하여 생성되었습니다. ABTS• 및 소거 활성은 Trolox 표준 곡선(R2=0.9922)에서 계산되었으며 Trolox 동등 항산화 용량(TEAC)으로 표시되었습니다. 실험은 3중으로 수행되었으며 3명의 독립 실험에서 수행되었습니다.

2.5.3. 철 환원 항산화력(FRAP) 분석

Chaiyana et al.의 이전 연구에서 설명한 대로 FRAP 분석을 사용하여 각 샘플의 철 환원 항산화력(FRAP)을 결정했습니다. (2017) Saeio et al.에서 약간 수정되었습니다. (2011) [27,29]. FRAP 시약은 300mM 아세테이트 완충액(pH 3.6), 10mM 2,4,6 트리피리딜-s-트리아진(TPTZ)을 40mM HCl 및 20mM FeCl3를 10:1:1의 비율로 혼합하여 새로 생성했습니다. 이 연구에서는 20µL의 오일 샘플(PSO1, PSO2, COM1, COM2) 및 리놀레산을 96-웰 플레이트에서 180µL의 FRAP 시약과 혼합하고 어두운 곳에서 실온에서 5분 동안 배양했습니다. OD는 마이크로플레이트 리더(Microplate reader EZ Read 2000, Biochrome, England)를 사용하여 595 nm에서 측정하였다. 아스코르브산(1 mg/mL)을 양성 대조군으로 사용하였다. 표준 곡선은 0.003~0.5mM 범위의 다양한 농도의 황산제이철(FeSO4)에 대해 595nm에서의 흡광도를 플로팅하여 생성되었습니다. FRAP 값은 FeSO4 표준 곡선(R2=0.9965)에서 계산되었으며 등가 용량(EC1)으로 표시되었습니다. 실험은 3중으로 수행되었으며 3명의 독립 실험에서 수행되었습니다.

2.5.4. FTC(Ferric Thiocyanate) 분석

2.6. 항노화 활성 결정

2.6.1. 항히알루로니다제 활성

항-히알루로니다제 활성 측정은 이전에 Chaiyana et al. (2020) [31]. 먼저 20 µL의 오일 시료(PSO1, PSO2, COM1, COM2)를 100 µL의 15 U/mL 히알루로니다아제 용액과 혼합하고 37 °C에서 10분 동안 배양했습니다. 배양 후, 20mM 인산 완충액(pH 5.35)에 용해된 0.03% w/v 히알루론산 100μL를 첨가하고, 37℃에서 45분 동안 배양하였다. 그 후 0.1% 소 혈청 알부민 1mL를 첨가하고 실온에서 10분 동안 배양하였다. OD는 멀티모드 검출기(Beckman Coulter DTX880, Fullerton, CA, USA)를 사용하여 600nm에서 결정되었습니다. 올레아놀산(0.25% w/v)을 양성 대조군으로 사용했습니다. 실험은 3중으로 수행되었으며 3명의 독립 실험에서 수행되었습니다. 히알루로니다아제 억제율은 방정식 (3)을 사용하여 계산되었습니다.

2.6.2. 항콜라게나제 활성

항콜라게나제 활성 측정은 Chaiyana et al. (2019) 및 Thring 외. (2009) 약간 수정 [32,33]. 간략히 설명하면, 오일 샘플(PSO1, PSO2, COM1, COM2) 20µL를 Clostridium histolyticum의 0.1U/mL 콜라게나제 용액 20µL와 혼합하고 37°C에서 15분 동안 배양했습니다. 배양 후, 80 μL의 50 mM 트리신 완충액(400 mM NaCl 및 10 mM CaCl2, pH 7.5) 및 40 μL의 N-[3-(2-furyl) acryloyl]-Leu-Gly- Pro-Ala(FALGPA) 기질 용액을 첨가하였다. OD는 340 nm에서 즉시 검출되었고 마이크로플레이트 리더(Microplate reader EZ Read 2000, Biochrome, England)를 사용하여 20분 동안 연속적으로 측정하였다. 올레아놀산(1% w/v)을 양성 대조군으로 사용했습니다. 실험은 3중으로 수행되었으며 3명의 독립 실험에서 수행되었습니다. 콜라게나제 억제율은 방정식 (4)를 사용하여 계산되었습니다.

2.6.3. 항 엘라스타제 활성

Anti-elastase 활성 측정은 Chaiyana et al. (2019) 및 Thring 외. (2009) 약간의 수정[32,33]. 간략하게, 10µL의 오일 샘플(PSO1, PSO2, COM1, COM2)을 돼지 췌장에서 추출한 40µL의 0.03U/mL 엘라스타제 용액과 혼합한 다음 50µL의 200mM Tris-HCL 완충액(pH 8.0) 및 100µL의 0.8mM N-숙시닐-Ala-Ala-Ala-p-니트로아닐리드(AAAPVN) 기질 용액을 첨가하였다. OD는 410 nm에서 즉시 검출되었고 마이크로플레이트 리더(Microplate reader EZ Read 2000, Biochrome, England)를 사용하여 20분 동안 연속적으로 측정하였다. 올레아놀산(1% w/v)을 양성 대조군으로 사용했습니다. 실험은 3중으로 수행되었으며 3명의 독립 실험에서 수행되었습니다. 엘라스타제 억제율은 방정식 (5)를 사용하여 계산되었습니다.

2.7. Anti-Tyrosinase 활성 결정

천연추출물의 미백효과는 Saeio et al. (2011) 및 Laosirisathian 외. (2020) [29,34]. L-tyrosine과 L-DOPA는 이 연구에서 tyrosinase 효소의 기질이었다. 간단히 말해서, 10µL의 오일 샘플(PSO1, PSO2, COM1, COM2)을 96-웰 플레이트에서 30µL의 티로시나아제와 혼합한 다음 실온에서 10분 동안 배양했습니다. 배양 후, 2.5 mM의 L-티로신 또는 L-DOPA인 기질 100 μL를 첨가하고 30분 동안 배양하였다. OD는 마이크로플레이트 판독기(마이크로플레이트 판독기 EZ Read 2000, Biochrome, England)를 사용하여 450nm에서 결정되었습니다. Kojic acid(20μg/mL)를 양성 대조군으로 사용했습니다. 실험은 3중으로 수행되었으며 3명의 독립 실험에서 수행되었습니다. 티로시나제 억제율은 방정식 (6)을 사용하여 계산되었습니다.

2.8. 통계 분석

모든 데이터는 평균 ± 표준 편차(SD)로 입증되었습니다. 통계적 유의성은 일원 분산 분석(ANOVA)에 이어 GraphPad Prism(버전 8.0, GraphPad Software)을 사용하는 Tukey의 사후 테스트를 사용하여 분석되었으며 p < 0.05는 고려되었습니다. 통계적으로 유의미한.

3. 결과 및 논의

3.1. 호박씨 기름 캐릭터

본 연구에서는 C. moschata Duch에서 호박씨유를 추출하기 위해 유기용매 추출 대신 수성 효소 추출을 사용하였다. Ex Poir(PSO1) 및 C. moschata(PSO2)는 간단하고 효과적이며 생산적인 공정이기 때문입니다[15,21]. PSO1은 점도가 낮은 암갈색 액체인 반면, PSO2는 점도가 낮은 녹갈색 액체였다. 두 호박씨 오일 모두 특유의 냄새가 났습니다. PSO1 및 PSO2의 수율은 각각 17.7% v/w 및 15.6% v/w였다. 오일 외에도 호박씨에는 다양한 영양 화합물이 포함되어 있는 것으로 보고되었습니다. C. moschata의 대략적인 구성은 주로 탄수화물(39.51%), 지방(28.49%), 단백질(19.23%), 물(7.67%), 회분(5.18%) 순이었습니다[35]. 그러나 용매와 기계적 압착을 사용한 이전 연구와 비교할 때 본 연구에서는 C. moschata 오일의 수율이 낮았다. 용매 추출이 가장 효과적인 오일 추출 방법으로 설명되어 있지만 종자에서 최대 98%의 오일을 추출하지만 용매 잔류물 및 생산된 오일의 순도와 관련하여 몇 가지 문제가 있습니다[36]. 또한 추출 공정에 사용된 용매는 생성된 오일의 수율에 영향을 미쳤습니다. 헥산, 석유 에테르, 석유 벤젠, 시클로헥산, 이소프로필 에테르, 에틸 아세테이트, 테트라히드로푸란, 프로판-2-올 및 아세톤을 사용한 추출은 43.4~64.4%[37,38]를 얻었다. 따라서 냉간 압착이 용매 추출보다 선호되었습니다. 그러나 냉간 프레스는 스크류 프레스를 사용하는 초기 단계에서 약간의 복잡성을 유발할 수 있습니다[39]. 따라서 냉압착유(33.5%)에 비해 호박씨유 함량(36.0%)이 높아 수성효소추출이 대체 추출법이 될 수 있다[21]. 수성 효소 추출 공정은 냉압착 공정보다 더 복잡하지만 상대적으로 저렴한 투자 비용, 상업적 효소 준비 비용의 지속적인 감소, 독특하고 가치 있는 식물 화학 성분을 동시에 분리할 수 있는 가능성, 녹색 기술의 구현에 대한 광범위한 요구 [21]. 예비 연구에서는 셀룰라아제, 펙티나아제, 헤미셀룰라아제 및 프로테아제와 같은 여러 효소가 종종 식물에서 생체 활성 추출을 강화하기 위해 식물 세포벽 구조를 파괴하는 데 사용되었다고 설명했습니다[16,17]. 따라서 우리는 이전에 Kanopka et al.에 의해 기술된 바와 같이 pectinase, cellulase 및 protease를 포함하는 효소 혼합물(1:1:1)을 사용하여 종자유를 추출하도록 본 연구를 설계했습니다. (2016), 호박씨유의 최고 수율을 얻기 위해 효소 가수분해 조건을 최적화했습니다[21]. 또한 이 방법은 여기서 "녹색 추출"이라고 하는 용매 추출에 대한 더 안전하고 환경적으로 지속 가능한 대안을 보여줍니다.

3.2. 호박씨 오일의 화학 성분

지방산 조성 분석은 수성효소추출법을 이용한 호박씨유(PSO1, PSO2)와 냉압착법으로 생산된 시판용 호박씨유(COM1, COM2)를 함께 비교 분석하였다. PSO1, PSO2, COM1 및 COM2의 지방산 조성은 표 1에 나와 있습니다. 모든 호박씨 오일 샘플은 다중 불포화(PUFA), 단일 불포화(MUFA) 및 포화 지방산으로 구성되었습니다. 시스-리놀레산(C18:2)은 모든 오일 샘플의 주성분이었습니다. 지방산 함량은 COM2가 가장 높았고(51.74%), COM1(48.00%), PSO1(39.09%), PSO2(37.63%) 순이었다. 유사하게, 시스-올레산(C18:1)은 특히 PSO2(37.45%)에 높은 비율로 존재했고, COM1(33.39%), PSO1(31.22%), COM2(28.64%) 순이었다. 팔미트산(C16:0) 및 스테아르산(C18:0)과 같은 포화 지방산은 각 오일 샘플에서 소량만 발견되었습니다. 미량의 다른 PUFA, MUFA 및 포화 지방산도 관찰 및 확인되었습니다.

문헌에서 리놀레산은 오메가-6로도 알려져 있으며 인체에서 합성할 수 없고 음식을 통해서만 섭취할 수 있는 필수 지방산입니다. 리놀레산은 세포막의 주성분인 세라마이드, 비타민 D 및 다양한 호르몬의 전구체를 포함하는 인간의 건강 기능에 중요한 영양소입니다[40,41]. 동물 연구에 따르면 리놀레산 결핍은 비늘 모양의 가려운 피부를 유발할 수 있습니다 [23]. 또한 식물성 오일의 리놀레산은 피부 염증 및 여드름 예방과 함께 피부 상처 치유를 지원했습니다[23]. 또한 올레산 또는 오메가-9는 암, 자가 면역 및 염증성 질환을 예방하는 데 도움이 되었습니다[42]. 실제로, 올레산은 상처 부위에서 산화질소 생성을 상당히 감소시켜 상처 봉합을 더 빠르게 합니다[43]. 이러한 데이터는 리놀레산(오메가-6)과 올레산(오메가-9)을 풍부하게 하는 호박씨 오일이 잠재적인 건강상의 이점을 나타낸다는 것을 뒷받침합니다.

연구 결과에 따르면 호박씨유(PSO1, PSO2, COM1 및 COM2)는 리놀레산(C18:2), 올레산(C18:2), 팔미트산(C16:0)을 비롯한 많은 지방산으로 구성되어 있습니다. 스테아린산(C18:0)은 호박씨유에서 발견되는 공통 성분입니다[44]. 리놀레산(오메가-6)과 올레산(오메가-9)은 모든 오일 샘플에서 지배적이었습니다. 리놀레산의 함량이 가장 높은 것은 COM2, COM1, PSO1, PSO2 순이었다. 또한, 올레산의 함량이 가장 많은 것은 PSO2였으며 그 다음으로 COM1, PSO1, COM2 순이었다. 이러한 결과는 호박씨유의 수성 효소 추출이 냉압착 추출보다 리놀레산이 약간 더 낮았지만 올레산은 아니라는 것을 설명합니다. 시판 오일 샘플보다 수성 효소 추출 호박씨의 리놀레산 함량이 낮은 이유는 추출 공정의 차이 때문이었습니다. 이전 연구에서는 별개의 추출물에서 추출한 호박씨 오일에서 불포화 지방산, 특히 올레산과 리놀레산의 양에 불일치가 있음을 발견했습니다[39]. 올레산의 함량은 냉압착 호박씨유의 28.19%에서 펜탄으로 추출한 호박씨유의 30.56%인 반면, 리놀레산의 함량은 펜탄으로 추출한 호박씨유의 43.86%이었다. 냉압착 호박씨유[39]에서 46.67%까지. 다른 추출 방법과는 별도로 추출 과정에 사용되는 용매와 종자 성숙 중 온도도 식물 종자의 리놀레산 함량에 영향을 미쳤습니다. 이전 연구에서는 석유 에테르가 낮은 리놀레산 함량(26.2%)을 가진 아마인유를 생산하는 반면, n-헥산은 46.5%의 리놀레산 함량으로 모순된 결과를 낳았다고 강조했습니다[45]. 또한 리놀레산은 해바라기 종자 성숙 동안 온도에 반비례합니다[46].

또한, 상대 연구에서는 디에틸에테르를 이용하여 추출한 호박씨유(C. maxima)에 지방산 조성으로 환산한 화학성분 리놀레산이 47.45%, 올레산이 35%로 나타났다[47] . Akin et al. (2018), 리놀레산 함량은 53.19% ~ 53.27% 범위였으며, 그 다음으로 올레산 함량이 높았으며 냉압착 C. pepo L. 씨 오일 추출에서도 27.52% ~ 27.59% 범위의 높은 함량으로 존재했습니다 [48 ]. 따라서 본 연구의 수성 효소 추출 역시 이전 연구에서 언급한 용매 추출 및 냉간 압착 추출보다 낮은 지방산 수율을 얻었다. 품종 비교에서는 PSO1(C. moschata Duch. Ex Poir)이 PSO2(C. moschata, 또는 일본 호박)보다 리놀레산 함량이 더 높은 것으로 나타났습니다. 반대로, PSO2는 PSO1보다 더 많은 양의 올레산을 나타냈다. 중요한 것은 지방산 프로필과 호박씨유의 양이 특정 품종의 기원, 기후 조건 및 수확 후 관리에 따라 달라졌다는 것입니다[49]. 다른 추출 방법으로 얻은 호박씨 오일의 지방산 프로필의 차이와는 별개로, 수성 효소 기술로 얻은 오일은 파이토스테롤과 토코페롤이 풍부한 것으로 보고되었습니다[50]. 따라서 녹색추출법으로 생산된 PSO1과 PSO2가 대체 호박씨유로 제안되어 향후 응용이 가능할 것으로 판단된다.

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