수성효소추출로부터 호박(Cucurbita Moschata) 종자유의 지방산 조성, 항산화 및 약리활성 평가 2부

May 08, 2023

3.3. 호박씨 오일의 항산화 활성

관련 연구에 따르면,담배"생명을 연장하는 기적의 허브"로 알려진 일반적인 허브입니다. 주요 구성 요소는시스타노사이드등의 다양한 효과가 있습니다.산화 방지제, 항염증, 그리고면역 기능 촉진. cistanche와 피부 미백 사이의 메커니즘은 citanche의 항산화 효과에 있습니다.배당체. 인간 피부의 멜라닌은 티로신의 산화에 의해 생성됩니다.티로시나아제, 산화 반응에는 산소의 참여가 필요하므로 체내의 산소가 없는 라디칼은 멜라닌 생성에 영향을 미치는 중요한 요인이 됩니다. Cistanche는 산화 방지제인 cistanoside를 함유하고 있으며 신체의 자유 라디칼 생성을 감소시켜 멜라닌 ​​생성을 억제할 수 있습니다.

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모든 호박씨 오일 샘플은 용량 의존적 방식으로 DPPH• 라디칼을 감소시켰습니다(그림 1). PSO2는 대부분 효과적인 DPPH• 억제를 나타냈으며, 5% w/v 농도의 PSO2는 PSO1, COM1 및 COM2와 비교할 때 DPPH• 라디칼의 상당한 억제를 나타내는 것으로 나타났습니다(p < 0.05). . 또한, 호박씨유 샘플의 주요 지방산 조성인 리놀레산(LA)도 용량 의존적으로 DPPH• 라디칼을 감소시켰으며, 이는 LA가 호박씨유에서 생물학적 효과를 발휘할 수 있음을 나타냅니다. 라디칼과 반응하는 리놀레산의 메커니즘은 아직 명확하지 않습니다. Yu(2001)의 이전 연구에서는 리놀레산이 자유 DPPH• 라디칼과 직접 반응하지만 지연 단계를 가지며 라디칼 소광 활성을 나타내지 않는다고 보고했습니다. 그러나 공액 리놀레산은 친수성 및 친유성 환경 모두에서 반응하여 DPPH• 라디칼을 켄칭했습니다[51].

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반면에 10% w/v 농도의 PSO1, PSO2, COM1 및 COM2는 ABTS• 플러스 라디칼을 감소시켰습니다. PSO2는 PSO1, COM1, COM2 및 LA(p<0.005). Interestingly, PSO2 exhibited comparable ABTS•+ inhibition with ascorbic acid, which was a positive control (Figure 2).

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제2철(Fe3 plus )을 제1철(Fe2 plus )로 환원시키는 항산화 잠재력에 기초한 호박씨 오일 샘플의 항산화 활성은 그림 3에 나와 있습니다. 이 조사는 PSO1, PSO2, COM1의 동등한 철 환원 항산화력을 나타냅니다 , COM2 및 10% w/v 농도의 LA. 반면, 양성대조군인 ascorbic acid는 가장 높은 EC1 값을 보였다(p< 0.05).

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PSO1, PSO2, COM1, COM2 및 LA는 다양한 농도(0.25% , 0.5% 및 1% w/v)에서 용량 의존적으로 다음과 같이 지질 과산화를 억제했습니다. 도 4에 도시된 바와 같다. LA, PSO1 및 COM1에 의한 억제는 1% w/v의 농도에서 거의 완전하였다. 그룹 간에 지질 과산화의 유의하게 다른 억제는 없었습니다. 또한 α-토코페롤은 호박씨 오일 샘플보다 낮은 농도에서 지질 과산화를 효과적으로 억제하는 것으로 나타났습니다.

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항산화 활성은 천연 화합물에서 산화 스트레스에 대항하고 건강상의 이점을 제공하며 일부 질병을 개선하는 데 중요한 역할을 합니다. 상당한 수의 연구에서 다양한 식물의 종자유가 페놀, 토코페롤 및 파이토스테롤 형태의 항산화제를 함유하고 있음을 입증했습니다[52,53]. 호박씨 오일에 함유된 폴리페놀과 카로티노이드의 출현은 항산화 방어 시스템을 자극하고 고혈압, 죽상경화증, 제2형 당뇨병 및 암을 예방했습니다[54]. 이전 분석에서 호박씨유는 0.664 ± 0.09 ~ 1.18 ± 0.04 µM Trolox/g [55 ]. 유사하게, Boujemaa I et al. (2020)은 C. maxima가 C. moschata 및 C. pepo [56]보다 더 높은 항산화 활성을 나타냈으며 [56], 이는 더 많은 양의 PUFA, 토코페롤 및 페놀 화합물 [18,57]에 의해 부분적으로 설명될 수 있습니다. 최근 호박씨유의 항산화 활성은 DPPH•, ABTS• plus, FRAP, FTC assay 등 4가지 방법으로 측정되었다. 그 결과 PSO2가 PSO1, COM1, COM2에 비해 DPPH•, ABTS• plus, FeSO4의 라디칼을 현저하게 감소시킨 소거 활성 값이 더 높게 나타났다. PSO2는 다른 것보다 낮은 리놀레산 수율을 나타냈지만 비슷한 항산화 활성을 나타내었지만 뛰어난 DPPH• 라디칼 소거 특성을 가졌습니다. PSO2의 소거 활성을 발휘하는 것은 이전 연구에서 뒷받침되는 카로티노이드, 토코페롤 및 페놀 화합물과 같은 생체 활성 화합물에서 유래할 수 있습니다[52-54]. 호박씨 오일의 수성 효소 추출은 강력한 추출 방법이며 항산화 활동을 강화하기 위해 더 많은 생리 활성 성분의 방출을 지원한다는 결론을 내릴 수 있습니다. 따라서 모든 종자유 샘플, 특히 PSO2는 항산화 능력을 입증했으며 건강상의 이점 및 치료와 관련된 응용 분야에 유용할 수 있습니다.

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3.4. 호박씨 오일의 노화 방지 작용

PSO1, PSO2, COM1 및 COM2는 다양한 농도(0.25% , 0.5% 및 1% w/v)에서 용량 의존적으로 히알루로니다아제 활성을 억제하였다. 낮은 농도({{10}}.25% w/v)에서 PSO1, PSO2 및 COM1은 매우 효과적인 억제(약 70–100%)를 나타냈습니다. 도 5에 나타낸 바와 같이 COM2(p < 0.05)와 비교할 때 히알루로니다아제 활성을 유의하게 억제하였다. 양성 대조군인 올레아놀산(OA)도 히알루로니다아제 활성을 감소시켰다. 호박씨유의 주성분인 LA는 가장 높은 억제력(120.6±0.7%)을 나타내어 다른 호박씨유 시료 및 OA(p<0.05)와 비교할 때 히알루로니다제 활성을 유의하게 억제하였다.

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호박씨 오일 샘플의 항콜라게나제 활성은 그림 6에 나와 있습니다. PSO1, PSO2 및 COM1은 콜라게나제 활성을 억제한 반면 COM2는 그렇지 않았습니다. PSO1 및 PSO2(1% w/v)는 각각 COM1 및 COM2와 비교할 때 상당한 콜라게나제 억제 활성을 나타냈습니다(p < 0.05). 양성 대조군으로서의 OA는 또한 콜라게나제 활성의 억제를 나타내었다. 그럼에도 불구하고 LA는 본 실험에서 콜라게나아제에 영향을 미치지 않았다. 이것이 LA 함량이 가장 높은 COM2가 콜라게나아제에 영향을 미치지 않는 이유일 수 있습니다.

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호박씨 오일 샘플의 항-엘라스타제 활성은 그림 7에 나와 있습니다. 1% w/v 농도의 PSO1만이 엘라스타제 활성을 억제했으며 PSO2, COM1 및 COM2와 비교할 때 엘라스타제 활성을 상당히 감소시켰습니다(p < {{7 }}.05). LA는 PSO1 및 OA와 유사한 효과를 나타냈다. 또한, 양성 대조군으로서의 OA는 PSO1, PSO2, COM1, COM2 및 LA(p < 0.05)와 비교했을 때 가장 높은 엘라스타제 활성 억제를 나타내었고 엘라스타제 활성을 상당히 감소시켰습니다.

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피부의 건강과 아름다움은 인간의 "웰빙"의 가장 중요한 요소 중 하나로 간주되므로 최근 몇 년 동안 여러 노화 방지 전략이 수립되었습니다[58]. 자외선 조사나 광노화는 산화 스트레스를 유발하는데, 이는 인간의 피부 노화 과정과 피부 색소 침착의 중요한 원인입니다[59]. 일반적으로 인체는 활성산소종(ROS)을 억제하기 위해 SOD(superoxide dismutases), 카탈라아제(catalases), GSH(glutathione peroxidase)와 같은 항산화 효소를 생성할 수 있지만 [50] 더 많은 항산화제가 필요합니다. 현재 식물 및 종자 오일 추출물은 항산화 특성으로 인해 약리 및 화장품에 사용되어 왔으며, 이는 페놀, 토코페롤 및 피토스테롤을 포함한 생리 활성 화합물을 기반으로 피부 노화를 개선합니다[23,60]. 이전 연구에서는 동백나무 종자유가 높은 보습 효과로 인간 제1형 콜라겐 합성을 유도한다는 사실을 발견했습니다. 그럼에도 불구하고 MMP1 활성을 억제했습니다[61]. PUFA 및 항산화 효과가 강화된 석류씨 오일 및 그 제품; 나노에멀젼과 크림은 피부 장벽 기능을 개선했습니다[62]. 그러나 호박씨유의 미용적 특성에 대한 연구는 거의 수행되지 않았기 때문에 본 연구는 항노화 활성과 관련된 히알루로니다아제, 콜라게나아제 및 엘라스타아제 효소의 억제를 결정하는 데 초점을 맞추었습니다. 그 결과 PSO1과 PSO2는 히알루로니다제 효소를 잠재적으로 억제함과 동시에 COM1과 COM2도 유사한 히알루로니다제 활성을 억제하는 효과를 보였다. 또한 PSO1과 PSO2는 콜라게나아제 효소 활성을 상당히 감소시켰고 COM1은 효소 활성을 약간 감소시켰습니다. PSO1만이 엘라스타제 효소의 억제를 수행하였다. 따라서, 호박씨유(PSO1 및 PSO2)의 수성 효소 추출이 호박씨유의 냉압착보다 항히알루로니다아제, 항콜라게나아제 및 항엘라스타아제 활성을 나타내는 더 강력한 항노화 활성을 가짐을 알 수 있다. COM1 및 COM2) 항산화 활동과 관련이 있습니다. 결론적으로, 결과는 PSO1 및 PSO2가 효과적인 노화 방지 효과를 나타내고 피부 화장품에 적용될 수 있음을 뒷받침했습니다.

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3.5. 호박씨 오일의 항티로시나제 활성

과색소침착은 UV 노출 후 발생할 수 있는 또 다른 피부 문제입니다. 멜라닌 생성은 멜라닌 색소를 생성하는 티로시나아제 효소의 작용에 의해 제어되는 피부 색소 침착에 중요한 역할을 합니다. 초기에 L-tyrosine은 tyrosinase에 의해 수산화되어 L-3,4-dihydroxyphenylalanine(L-DOPA)으로 전환된 다음 DOPA-quinone으로 산화되고 최종적으로 멜라닌 색소로 변환됩니다[63]. L-DOPA와 티로신을 호박씨유 시료의 기질로 사용한 경우의 항티로시나제 활성은 그림 8에 나타내었다. PSO1, PSO2, COM1, COM2는 L-DOPA를 기질로 사용한 티로시나제 활성을 용량 의존적으로 억제하였다 , COM2 제외. PSO1은 PSO2, COM1 및 COM2와 비교할 때 0.5% 및 1% w/v 농도에서 가장 높은 티로시나제 억제 활성을 보였다(p<0.05). Likewise, all pumpkin seed oil samples inhibited tyrosinase activity when tyrosine was used as a substrate. The inhibitions were in a dose-dependent manner, except COM2. PSO2 showed the highest tyrosinase inhibitory activity at a concentration of 0.5% and 1% w/v when compared with PSO1, COM1, and COM2 (p<0.05). Similarly, LA performed tyrosinase inhibition in a dose-dependent manner, and kojic acid (positive control) also decreased tyrosinase activity in both substrates. It was indicated that PSO1 and PSO2 had potent anti-tyrosinase activities, supporting their use in applications for whitening skin.

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현재 여러 연구자들이 피부 미백 제품의 성분으로 사용되는 많은 천연 화합물을 조사했습니다[64]. 올레산과 항산화력이 풍부한 차씨유는 tyrosinase와 TPR-2 활성을 억제하여 멜라닌 생성 과정을 억제합니다[65]. 또한, Hong Xin Cui, et al. (2018)은 토레야 그란디스의 종자유가 티로시나제 반응에서 산소 공급 감소를 통해 티로시나제 활성을 억제하는 강력한 항산화 활성을 나타냄을 발견했습니다[66]. 우리의 연구 결과는 호박씨 오일이 티로시나제 효소 활성을 나타냄을 입증했습니다. PSO1은 L-DOPA를 기질로 사용하여 티로시나아제를 현저하게 억제했습니다. PSO2는 티로신을 기질로 사용하여 티로시나아제를 현저하게 억제한다고 보고했습니다. 우리의 결과는 호박씨 오일(PSO1 및 PSO2)의 수성 효소 추출이 항산화 활성을 통해 미백 효과를 위한 강력한 항티로시나제 활성을 가지고 있음을 나타냅니다.

4. 결론

C. moschata 종자의 오일은 수성 효소 추출에 의해 성공적으로 추출되었습니다. 리놀레산은 모든 C. moschata 종자 오일 샘플에서 주성분이었지만, 상업용 오일에 비해 PSO1 및 PSO2에서 더 적은 양이 검출되었습니다. 수성 효소 추출(PSO1 및 PSO2 모두)로 추출한 C. moschata 종자유는 시판되는 호박씨유에 비해 항산화 활성이 유사하지만 콜라게나아제, 히알루로니다아제 및 티로시나아제에 대한 억제 효과가 우수합니다. 따라서 호박씨 오일의 수성 효소 추출은 오일과 생물 활성 화합물을 동시에 함유하는 데 유용한 것으로 입증되어 용매 추출에 대한 보다 환경 친화적인 대안임을 보여줍니다. 또한 PSO1 및 PSO2는 기능성 식품 및 화장품 산업에서 대체적으로 사용될 수 있는 영양소 및 생리 활성 화합물의 좋은 공급원으로 제안되었습니다.

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저자 기여:개념화, WC; 방법론, RK 및 NS; 공식 분석, AP; 조사, RK 및 NS; 자원, WC, RK 및 NS; 작문 - 원본 초안 준비, AP 및 WC; 쓰기—검토 및 편집, AP 및 WC; 자금 조달, AP 모든 저자는 원고의 게시된 버전을 읽고 동의했습니다.
자금 조달:AP는 박사 후 연구를 위한 CMU 대통령 장학금 2021에 감사드립니다. APC는 태국 치앙마이 대학교의 제약 나노기술 연구 센터와 태국 치앙마이 대학교 약학부 총체적 건강, 건강 기능 식품 및 코스메슈티컬 혁신 센터의 자금 지원을 받았습니다.
기관 검토 위원회 성명서: 해당 없음.
정보에 입각한 동의서:적용되지 않습니다.
데이터 가용성 진술:이 원고의 모든 데이터, 표 및 그림은 원본입니다.
이해 상충:저자는 이해 상충을 선언하지 않습니다.

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