코로나19용 mRNA 기반 백신-19: 새롭지만 알려지지 않았습니다!

추상적인:

mRNA 백신은 우리 세포가 단백질을 생산하는 데 사용하는 메커니즘을 활용합니다. 우리 세포는 DNA에 포함된 지식을 바탕으로 단백질을 생산합니다. 각 유전자는 독특한 단백질을 암호화합니다. 유전 정보는 필수적이지만 mRNA 분자가 유전 정보를 특정 단백질 생산 지침으로 변환할 때까지 세포는 이를 사용할 수 없습니다. mRNA 백신 접종은 특정 단백질을 구성하기 위해 바로 사용할 수 있는 mRNA 지침을 제공합니다. BNT162b2(Pfizer-BioNTech)와 mRNA{5}}(Moderna)는 모두 새로 승인된 mRNA 기반 코로나{7}} 백신으로 탁월한 보호와 효능을 보여주었습니다. 전체적으로 다양한 임상 개발 단계에 있는 코로나-19에 대한 mRNA 기반 백신 후보가 5개 더 있습니다. 이 리뷰는 특히 개발, 메커니즘 및 임상 측면을 다루는 코로나19용 mRNA 기반 백신에 중점을 두고 있습니다.

남성의 면역체계 강화를 위한 시스탄체의 효능

키워드:

코로나-19 백신; mRNA 백신; 백신 개발; 벡터 기반 백신

1. 소개

중증급성호흡기증후군 코로나바이러스-2(SARS-CoV-2)에 의한 코로나바이러스 질환{{0}}(COVID-19) 대유행이 전 세계적으로 확산되고 있습니다. 현재 전 세계적으로 확인된 코로나19 사례는 6억 6,200만 건입니다-19. 여기에는 세계보건기구(WHO)에 보고된 사망자 660만 명이 포함됩니다[1]. 이 바이러스는 전 세계 200개 이상의 국가에 영향을 미치며, 대부분의 사례는 브라질, 러시아 및 미국에서 보고되었습니다[2]. 코로나19 발병에 대한 첫 번째 보고는 2019년 12월 30일 중국 후베이성 ​​우한시에서 이루어졌습니다. 우한에서 집단 폐렴 사례가 기록되었습니다. 이후 2020년 1월 7일에 신종 코로나바이러스(2019-nCoV)가 원인인 것으로 밝혀졌습니다. WHO는 결국 이 질병을 코로나19라고 명명했습니다-19 [3,4]. 추정 치명률은 0.5~1.5%입니다. SARS-CoV-2는 계열에 속합니다.코로나바이러스과그리고 순서니도비랄레스. SARS-CoV-2는 SARS-CoV 및 중동호흡기증후군 코로나바이러스(MERS CoV) 두 바이러스와 게놈적으로 밀접한 관계를 갖는 베타코로나바이러스에 속합니다. SARS 및 MERS에 비해 SARS-CoV-2는 전염성이 매우 높습니다. 코로나19-19는 전 세계적으로 중요한 심각한 질병입니다. 이 질병은 특정 항바이러스 약물로 치료할 수 없으며, 질병 확산을 예방하는 열쇠는 전염 사슬을 끊는 것입니다[5]. 유병률과 사망률을 낮추기 위해 대유행에 대한 대량 예방접종이 사용됩니다[6,7]. SARS-CoV{10}} 게놈 서열이 2020년 1월 11일에 공개된 이후 150개 이상의 당국 예방접종 프로젝트가 연구되었습니다. 백신 접종의 주요 목표는 질병의 중증도에 대해 장기적인 보호를 제공하는 면역 반응을 유도하는 것입니다[8]. Paddy Ssentongo와 동료들[9]이 평가한 바와 같이, 모든 SARS-CoV-2 감염에 대한 백신 효능(VE)은 첫 번째 예방접종 시리즈 완료 후 첫 달의 83%에서 5개월 이상 후 22%로 떨어졌습니다. . 마찬가지로 증상이 있는 코로나19에 대한 VE-19는 예방접종 후 첫 달 94%에서 4개월 동안 64%로 감소했습니다. 전반적으로 중증 코로나19에 대한 VE-19는 모든 연령대에서 강력했으며, 백신 접종을 완료한 후 5개월 이상 경과 시 90%(95% CI, 87~92%) 수준을 보였습니다.

코로나바이러스는 표면에 (S) 단백질을 스파이크했습니다. 이 S 단백질은 안지오텐신 전환 효소(ACE) 수용체의 수용체 결합 도메인과 상호 작용합니다[10,11]. 대부분의 백신 후보는 바이러스의 S 단백질을 표적으로 삼고 있습니다 [12]. 화이자 BioNTech 코로나-19 백신-BNT162b2는 미국 식품의약국(FDA)이 승인한 최초의 예방접종입니다. 이는 코로나{11}} 질병 예방을 위해 12~15세 이상에 대한 긴급 사용 승인을 받은 화이자에서 만든 메신저 RNA(mRNA)를 기반으로 합니다. 미국 식품의약국(USFDA)은 2021년 8월 23일 화이자 백신을 승인했습니다[13]. 다양한 연구에서 예방접종이 SARS-CoV-2 감염을 예방하는 데 89.1%의 효율성을 가지고 있다고 보고했습니다. 또한, 백신은 코로나19 관련 입원, 사망, ICU 입원 예방도 감소시켰습니다. SARS-CoV-2의 통제 가능한 확산은 인구의 상당 부분(예: 70~80%)이 예방접종을 받으면 더 일찍 달성될 수 있습니다. 예방접종은 코로나19 발병률을 크게 감소시킵니다-19. 이 백신은 인체에서 SARS-CoV-2 감염을 근절하기 위해 강력하고 효과적인 면역 반응을 제공합니다. 감염된 사람들은 바이러스에 대해 강력한 T 세포 반응을 보였는데, 이는 감염으로부터 회복하는 능력에 도움이 될 수 있습니다[14,15]. 중화는 우려되는 SARS-CoV-2 변종의 증상 감염으로부터 보호하는 것과 강한 상관관계를 유지했습니다[16]. 따라서 백신접종은 전염병을 통제하기 위한 전략이다.

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코로나-19 백신은 다양한 플랫폼에서 개발되고 있습니다. 약독화 생 바이러스, 비활성화 백신, 복제되지 않는 바이러스 벡터, RNA 및 DNA가 이러한 예입니다. 다양한 유형의 백신과 예가 그림 1에 나열되어 있습니다. 백신 개발 전략은 사멸된 SARS-CoV-2 바이러스를 사용하는 것입니다. 이 바이러스는 복제할 수 없지만 체내에 그대로 유지될 수 있습니다. 면역 체계는 바이러스에 대한 항체를 만들어 바이러스에 대한 반응을 촉발합니다. 인도 하이데라바드 소재 Bharat Biotech에서 제조한 COVAXIN®(BBV152)과 중국 베이징 소재 Sinovac Biotech에서 개발한 sinovac®이라고도 알려진 CoronaVac은 비활성화 바이러스 접근법을 사용하여 백신을 개발했습니다[17]. 비복제 바이러스 벡터는 기업이 백신 생산을 위해 채택한 기술이기도 합니다. 아데노바이러스(Ads)는 감기의 원인 물질로 작용하는 이중 가닥 게놈을 가진 널리 사용되는 바이러스 벡터입니다. CanSino Biologics Tianjin, China는 SARS-CoV-2 바이러스의 S-단백질 전체 길이를 인코딩하는 Ad5-nCoV(Convidecia®)를 개발했습니다. 바이러스 벡터는 복제 특성을 갖고 있지 않으므로 실제 질병을 일으키지 않습니다. 일단 몸에 들어가면 바이러스 DNA가 항원 제시 세포에 제시되고 이에 대한 면역 반응이 생성됩니다. Oxford/Astrazeneca는 아데노바이러스에 대한 널리 퍼진 항체와의 상호작용을 최소화할 가능성이 있는 침팬지의 아데노바이러스(ChAdOx1)를 사용했습니다. 백신의 이름은 AZD122(Vaxzevria™)입니다. 러시아 모스크바의 Gamaleya 연구소에서 개발한 Sputnik V™ 백신은 또한 재조합 인간 Ad26 혈청형을 갖는 바이러스 벡터입니다. Janssen 백신은 미국 뉴저지의 Johnson and Johnson에서 동일한 접근법을 사용하여 제조되었습니다 [18].

mRNA는 또한 백신 제조에 대한 새로운 접근 방식으로 간주됩니다. mRNA 백신은 대중에게 새로운 것이지만 과학자들은 오랫동안 이를 연구해 왔습니다. 이들 mRNA 백신은 스파이크 단백질을 코딩하는 DNA 주형으로부터 합성한 후 지단백질 기반 담체에 포장하여 mRNA의 체내 진입 속도를 높이고 분해를 방지한다[19]. 백신이 근육내 경로를 통해 투여되면 더 깊은 조직에 주입되고 mRNA 분자가 세포 내부로 들어가 번역 과정이 촉진됩니다[20]. 체내에 들어오면 mRNA가 항원으로 인식되고 체액성 면역 반응이 활성화되어 B 세포가 기억 B 세포로 발달하도록 자극합니다. 이로써 항원에 대한 2차 노출 시; 기억 B 세포는 항원을 중화하고 차단할 것입니다 [21]. FDA는 mRNA 기반 백신을 승인했는데, 그 중 하나는 Pfizer-BioNTech's(New York, NY, USA) BNT162b2(Comirnaty®)이고 다른 하나는 Spikevax라고도 알려진 Moderna™, Cambridge, MA, USA mRNA-1273입니다. FDA는 18세 이상의 사람들에게 사용하기 위한 긴급 사용 승인(EUA)을 위해 mRNA-1273를 승인했습니다. 현재 검토에서는 백신학 및 코로나19에 대한 사실, mRNA 기반 백신 개발, mRNA 백신 작동 방식, 사용된 제제 및 성분, 안전성과 효능, 백신 규제 문제에 대한 자세한 정보를 제공할 것입니다.

그림 1. 다양한 유형의 코로나-19 감염 백신. (2022년 12월 31일에 액세스한 BioRender.com을 통해 생성됨)

2. 백신학 및 코로나19에 관한 사실-19

2019년 12월, 중국에서 알 수 없는 이유로 폐질환을 앓고 있는 집단이 보고되었습니다. 이후 중국 질병통제예방센터(CDC)는 실시간 중합효소연쇄반응을 통해 검출된 환자 신체 검체를 수집해 폐렴 관련 사례의 불확실성과 원인을 조사했다[22]. 이후 폐질환의 원인이 알려지면서 코로나바이러스에 의한 것이라는 사실이 밝혀졌으며, 이를 SARS-CoV-2(중증급성호흡기증후군) 또는 코로나바이러스-19라고도 명명했습니다. 이후 세계적인 팬데믹으로 발전했다. -coronaviruses 그룹에 속합니다. 구조적으로 이것은 사르베코바이러스(Sarbecovirus) 아속 및 오르토코로나바이러스(Orthocoronavirinae) 아과에 속하는 외피가 있고 분절되지 않은 바이러스입니다. 그 구조에 존재하는 게놈 물질은 단일 가닥 포지티브 센스 RNA 서열입니다[23]. 그들은 주로 조류와 포유류 숙주에서 발견됩니다. 코로나바이러스의 게놈 구조는 그림 2에 묘사되어 있으며, 이는 바이러스 구조가 외막에 서브유닛 S1과 ​​S2를 갖는 스파이크 단백질을 보유하고 있음을 나타냅니다. RNA 바이러스 게놈은 뉴클레오캡시드와 함께 막 내부에 캡슐화되어 있습니다. 따라서 우리는 스파이크 단백질(S), 뉴클레오캡시드 단백질(N), 막 단백질(M), 외피 단백질(E)의 네 가지 구조 단백질이 있다고 말할 수 있습니다[24]. 이 외에도 비구조 단백질(Nsp)도 총 16개 존재합니다. 스파이크 단백질은 단백질이 신체에 존재하는 수용체와 상호 작용할 수 있는 주요 수용체 결합 부위입니다[25]. S1 서브유닛은 수용체 결합 도메인(RBD)을 포함하며, 여기서 안지오텐신 전환 효소 II는 스파이크 단백질에 결합합니다. 또한 N-말단 도메인(NDT)으로 구성됩니다. S2 하위 단위는 융합 단백질(FP)과 막횡단 단백질(TM)을 보유합니다[26]. 바이러스가 숙주 세포에 침입하면 바이러스 막이 융합되고 코팅이 벗겨지며, 이어서 바이러스 집합체 형성에 필수적인 mRNA의 전사 및 번역이 이어지며, 이는 세포외유출을 통해 숙주 밖으로 빠져나와 감염됩니다. 다른 세포. 바이러스 입자가 신체의 다른 세포로 유입되면 면역 반응이 자극되고 항체가 생성됩니다[27].

그림 2. 코로나바이러스의 게놈 구조. (2022년 12월 31일에 액세스한 BioRender.com을 통해 생성됨)

전 세계적으로 예방접종은 널리 사용되어 왔으며 사망률을 낮추는 데 효과적입니다. 건전한 과학과 지식을 바탕으로 백신의 안전성과 유효성 평가 및 흡수 평가가 향상될 수 있습니다[28]. 백신은 약독화 생백신 또는 사백신과 같은 전통적인 백신에서 하위 단위 백신, 그리고 마지막으로 동종 또는 이종 프라임-부스트 면역화 전략으로 진화했습니다[29]. 그림 3에는 다양한 백신 전략이 나와 있습니다. 고대에는 약독화 생백신이 다양한 병원성 바이러스에 대한 구세주임이 입증되었으며 수백만 명의 인구에 대해 안전한 것으로 간주되었지만 종종 무시되었습니다. MMR(홍역, 볼거리, 풍진) 및 수두 백신을 포함한 많은 백신이 약독화 생백신입니다[25,30]. 바이러스의 약화된 형태는 불리한 조건에 노출되거나 유전자 변형을 통해 얻을 수 있습니다. 이러한 유형의 백신, 특히 경구용 소아마비 백신(OPV)은 비침습적 경로를 통해 접종할 수 있습니다. 이에 반해, 바이러스의 불활성화 버전인 사백신은 면역학적 반응 측면에서 적용이 제한적이지만, 현재 사용되는 인도 백신인 COVAXIN®(인도 하이데라바드, 텔랑가나주 하이데라바드 소재 Bharat Biotech International Limited에서 제조)은 비활성화 버전의 바이러스를 사용합니다. 백신 제제의 바이러스 [31]. 비활성화된 바이러스는 체액성 면역 반응을 조절하는 데 도움이 되는 전형 순응성을 유지할 만큼 충분히 능력이 있습니다[32].

그림 3. 백신과 숙주 세포 및 바이러스 입자의 상호 작용. (2022년 12월 31일에 액세스한 BioRender.com을 통해 생성됨)

mRNA 기반 백신이나 벡터 기반 백신과 같은 최신 기술은 코로나-19 백신의 안전성과 효능을 최대한 활용합니다[33]. 벡터 기반 백신은 이종 프라임-부스트 백신으로도 알려져 있는데, 이는 세포성 및 체액성 면역 반응을 모두 유도하는 데 도움이 되는 반면, 생 하위 단위 백신은 체액성 반응만 유발합니다[34-39]. 연구에 따르면, 동종 접근법을 사용하여 제조된 동일한 제제에 비해 이종 벡터 기반 백신의 경우 T 세포 매개 면역 반응이 5~10배 증가한 것으로 나타났습니다[40]. 따라서 벡터 기반 백신, 즉 DNA 및 RNA 기반은 하위 단위 기반보다 더 선호되며 종종 RNA 백신에 비해 더 강력하고 바이러스 구조의 스파이크 단백질을 인코딩하므로 효과적이라고 간주됩니다. 치쿤구니야 바이러스의 경우, 동물 연구에서 DNA와 바이러스 유사 입자를 사용한 공동면역 전략이 더 나은 면역 반응을 생성했습니다[41]. 때때로 DNA 백신에는 투과성을 높이기 위해 전기영동, 미세바늘 배열, 리포솜과 같은 담체 기반 시스템과 같은 특수 전달 시스템이 필요합니다. 폴리락틱-코-글리콜산 기반 미소구체는 근육내 경로를 통한 HIV{24}} DNA 백신 전달을 위해 제조되었습니다[42]. 그러나 DNA 기반 백신은 면역 반응이 미약하고 종종 추가 투여가 필요합니다. 이는 mRNA 기반 백신을 사용하여 극복할 수 있습니다[25,43].

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3. mRNA 기반 백신 개발

이전에는 시험관 내 전사된 mRNA, siRNA(소형 간섭 RNA), RNA 기반 앱타머, 리보스위치, 안티센스 분자 및 이후의 mRNA를 포함하여 다양한 형태의 RNA가 백신 제제에 사용되었습니다. 메신저 리보핵산, 즉 mRNA에 대한 인식은 기본적이고 더욱 경제적인 생성, 표적 세포에서의 일시적인 이동 및 느린 분해에 기인하며, 인간 게놈을 조정하지 않고 삽입을 억제하므로 DNA 치료법과 대조되는 보안 이점이 있습니다. 돌연변이 유발이 가능하며 세포질 내 단백질로 해석하기 위해 즉시 접근 가능합니다[44]. 1990년대 초, 연구자들은 mRNA 기반 백신 개발에 성공하기 위해 많은 노력을 기울였습니다. 다양한 실험이 시험관 내에서 수행되었으며 결과는 원하는 단백질의 후속 생산을 보여주었습니다. 따라서 mRNA는 단백질을 생산할 만큼 충분히 능력이 있기 때문에 질병을 치료하기 위한 가능한 치료법이 될 수 있다는 결론이 나왔습니다[45]. Martinon 등에 따르면 인플루엔자 치료를 위한 핵단백질 기반 mRNA 백신은 시험관 내 전사에 의해 합성되었으며 리포솜 소포에 통합되었습니다. 결과는 생체 내에서 세포독성 T 세포와 항체의 유도를 입증했습니다[46]. 그 이후로 전염성이 높은 질병 및 암 치료의 기본 요구 사항인 상당한 효율성, 쉬운 확장 및 비용 효율성으로 인해 치료 도구로 mRNA를 사용하는 데 점진적인 발전이 있었습니다. 최근 연구 연구에 따르면 mRNA 기반 치료법은 치쿤구니아 증상으로부터 생쥐를 크게 보호하고 2회 투여 후 바람직한 수준의 항체를 유지하는 것으로 나타났습니다[47]. RNA 기반 백신은 기능을 변경하고 번역을 위해 리보솜을 표적으로 삼아 신체의 면역 세포를 표적으로 삼아 면역 반응을 생성합니다[19].

mRNA 기반 면역화는 원하는 항원을 암호화하는 단일 가닥 mRNA로 구성됩니다. 이는 노출된 mRNA로 전달되거나 세포 내 전달을 용이하게 하기 위해 적합한 운반체 시스템에 캡슐화될 수 있습니다. mRNA가 세포에 들어가면 세포의 자연적 메커니즘에 의해 단백질 기반 구조로 번역됩니다. 이는 관심 있는 단백질을 얻기 위해 번역 후 변형을 더 거치고 신호 펩타이드에 의해 결정된 대로 면역 반응을 생성합니다[44,48]. mRNA 기반 백신은 동물에 주사할 때 핵 분해와 항원과 유사한 선천적 면역원성 등 최소한 두 가지 장애물에 직면해 있습니다[49]. 이 문제를 해결하기 위해 pseudo-uridine(Ψ)은 잘 알려진 RNA 변형입니다. Ψ는 우리딘을 시험관 내 전사(IVT) mRNA로 대체합니다. 이는 RNA가 있는 모든 세포에서 매우 널리 퍼져 있으며 자연적으로 발생하는 뉴클레오티드입니다. Moderna와 Pfizer-BioNTech가 생산하는 코로나 백신-19은 증상에 대해 최대 90%의 효능을 갖는 새로운 변형 Ψ로 구성됩니다[50]. 반면, CureVac NV가 개발한 백신에는 Ψ-modified mRNA가 결여되어 있으며 임상시험에서 유효성이 48%에 불과한 것으로 확인되었습니다[51].

번역 과정에서 주로 비증폭 mRNA(NMR)와 자가 증폭 mRNA(SMR)라는 두 가지 범주의 mRNA 백신이 존재합니다. 비증폭 mRNA와 자가 증폭 mRNA의 작동 메커니즘은 그림 4에 설명되어 있습니다. 구조적으로 그림 5에 표시된 것처럼 두 구조 모두 CAP, 50 및 30개의 번역되지 않은 영역(UTR), 개방 프레임(ORF), 공통적으로 포니테일이 있다[52,53].

그림 4. mRNA의 카테고리. (2022년 12월 31일에 액세스한 BioRender.com을 통해 생성됨)

이 외에도 SMR은 세포 내에서 mRNA의 증폭을 돕는 세그먼트로 레플리카제를 보유하고 있습니다. 또한, 세그먼트는 리보솜에 의해 번역되어 관심 있는 단백질을 생성합니다. 분비된 단백질은 면역 반응의 생성을 유도합니다[54]. SMR은 NMR 및 음이온 분자보다 비교적 큽니다. 자가 복제 RNA에 대한 최근 연구에서는 다양한 돌연변이가 관찰되었을 때 베네수엘라 말 뇌염(VEE) 레플리콘의 비구조 단백질이 시험관 내 하위 게놈 발현에서 더 나은 것으로 나타났습니다. 나노 에멀젼으로 제형화된 VEE-Sindbis 바이러스 자가 증폭 RNA를 사용하여 광견병 당단백질을 표적으로 하기 위해 유사한 임상 시험 연구가 현재 진행 중입니다[55]. mRNA 치료법의 효능을 정의하는 주요 품질 속성(CQA)은 표 1에 요약되어 있습니다[54].

그림 5. mRNA 서열의 최적화. (권리 및 사용 권한을 포함하여 [56]에서 수정됨).

표 1. mRNA 백신에 대한 CQA.

mRNA의 제조는 생산과 정제를 포함하는 2단계 과정입니다. mRNA 제조 시스템에는 동물이나 세포 유래 원료가 포함되어 있지 않기 때문에 불순물이 존재하지 않으며 생산이 상대적으로 더 안전합니다[65]. mRNA 서열의 생산은 단일 단계 효소 과정일 수도 있고 두 단계 효소 과정일 수도 있다. 캐핑 아날로그는 일반적으로 실험실 규모에서 사용되는 1단계 생산 공정의 경우에 사용됩니다. 그런 다음 이 과정은 그림 6에 표시된 크로마토그래피 기술을 사용한 분리를 포함하는 정제에 의해 수행됩니다. mRNA 생산을 위한 2단계 효소 반응은 RNA 폴리머라제 서열을 형성하기 위한 DNA 주형의 시험관 내 전사를 포함합니다[66]. 이렇게 형성된 mRNA 주형은 백시니아 캡핑 효소 및 메틸 공여체를 사용하여 캡핑될 수 있습니다. mRNA의 생산은 상대적으로 높으며 산업 규모에서는 재현성을 달성하기가 어렵습니다 [67].

그림 6. mRNA 서열의 제조과정. (2023년 1월 1일에 액세스한 BioRender.com으로 생성됨)

4. mRNA 백신은 어떻게 작동하나요?

mRNA는 지질 나노입자에 캡슐화되어 있는 불안정한 음전하 분자입니다. 세포내이입을 통해 이러한 지질 나노입자가 세포 안으로 들어갑니다. 세포질에 들어가면 이러한 엔도솜은 즉시 분해를 위해 리소솜으로 이동합니다. 연구에 따르면 이온화 가능한 지질은 엔도솜의 탈출과 mRNA 방출에 중요한 역할을 하는 것으로 나타났습니다. 지질의 머리 부분은 엔도솜의 산성 환경 내에서 양성자화되고, 이 양이온 상태는 이후 엔도솜 막에 있는 인지질의 음이온 머리 부분에 부착됩니다. 양이온성 지질과 인지질의 소수성 꼬리는 확장되어 이중층 인지질 구조를 파괴하고 mRNA가 세포질 구획으로 빠져나가도록 합니다. 리보솜은 mRNA가 방출될 때 mRNA를 단백질로 변환합니다. 이 단백질은 두 가지 방식으로 면역 반응을 활성화할 수 있습니다. (1) 프로테아좀은 이러한 단백질을 펩타이드로 분해한 다음 MHC(주요 조직 적합성 복합체) 클래스 I 분자에 의해 세포 표면에 항원으로 제시됩니다. 이 분자는 TCR(T 세포 수용체)는 감염된 세포를 죽이는 CD8+ T 세포를 활성화합니다. 단백질 자체는 두 가지 방식으로 면역 반응을 활성화할 수 있습니다. (2) 세포외에서 분비된 단백질은 APC(항원 제시 세포)에 의해 삼켜지고 MHC 클래스 II에 의해 세포 표면에 제시되고 CD{4}} T 세포에 의해 인식되는 펩타이드로 분해됩니다. 그림 7에서 볼 수 있듯이 반응하고 B 세포를 공동 활성화하여 체액성 면역 반응을 생성합니다. 또한 mRNA 백신은 엔도솜의 TLR(Toll 유사 수용체)에 결합하는 이중 가닥 및 단일 가닥 RNA를 전달하여 결과적으로 수많은 IFN{10}}(유형 I 인터페론) 자극 유전자가 자극되어 항바이러스 선천 면역 반응이 활성화됩니다.

그림 7. mRNA 백신이 숙주에 대한 면역을 유도하는 메커니즘. (2023년 1월 1일에 액세스한 BioRender.com으로 생성됨)

5. mRNA 기반 백신의 제제화 측면

전사된 mRNA가 주입되면 체내에서 단백질이 발현됩니다. mRNA에서 발현된 단백질로 인해 면역학적 반응이 관찰됩니다. 이 과정은 주로 mRNA 백신 개발의 기초입니다[68].

5.1. DNA 템플릿

표적 병원체로부터 항원을 식별하는 것이 가장 중요한 단계입니다. mRNA 면역화를 개발하려면 DNA 주형에 암호화된 항원을 추가해야 하며, 이는 시험관 내에서 mRNA 번역에 도움이 됩니다. 특정 항원은 전사된 mRNA의 전사에 의해 생체 내에서 생성되며, 이는 세포질에만 도달합니다. 이는 면역 반응을 이끌어내는 데 도움이 될 것입니다. 플라스미드 DNA(pDNA)에는 T7, SP6 또는 T3와 같은 DNA 의존성 RNA 중합효소에 대한 강한 친화력을 갖는 프로모터 서열과 mRNA 구성에 적합한 서열이 포함되어 있습니다. 효소는 주형을 따라 전달되어 주형의 끝에 도달할 때까지 RNA 전사체를 확장합니다[69].

5.2. 캡핑 효소

DNA 주형에서 mRNA를 효율적으로 번역하려면 mRNA의 50번 끝 부분을 캡핑하는 것이 매우 중요합니다. 또한 분해, 유전자 발현 및 리보솜 모집으로부터 mRNA를 보호하려면 성숙한 mRNA의 50개 캡핑이 필요합니다. 5 0 -50 -삼인산염 다리는 진핵생물 mRNA의 50개 캡을 7-메틸구아노신(m7G)(m7GpppN)에 연결합니다. IVT 반응 중에 시작 부위에 천연 50 cap1 구조를 정확하게 추가하기 위해 클린 캡 키트를 사용하는 새로운 공동 전사 기술은 T7 폴리머라제에 의한 50 capped mRNA 생성을 우수한 번역과 최소한의 반응성을 갖는 일반적으로 사용되는 캡핑 방법으로 만들었습니다. 코로나-19 BNT162b1 mRNA 백신에는 클린 캡 방식을 사용하여 5 0 캡을 추가했습니다[70]. 캡 유사체가 전사된 mRNA는 폴리 1 꼬리를 갖고 있으며 진핵생물 mRNA의 30번째 말단에 30(폴리-A) 꼬리가 존재합니다. 이 폴리 A 꼬리는 mRNA의 수송, 번역 및 안정성 기능을 수행합니다. 30개의 폴리 A 테일과 50개의 캡은 번역 프로세스 시작을 위해 eIF4F 복합체를 사용하여 안정적인 폐쇄 루프 구조를 생성합니다. 30개의 폴리(A) 꼬리에 120개의 뉴클레오티드(nt)가 있기 때문에 BioNTech mRNA 백신은 뛰어난 안정성과 번역 효율성을 갖습니다[71].

5.3. 뉴클레오티드 삼인산염 기질(NTP)

DNA 플라스미드가 T7 폴리머라제 및 뉴클레오티드 삼인산과 통합되면 mRNA가 보다 효율적으로 번역되고 더 많은 수율이 생성됩니다. 백신 접종 후 제기되는 우려 사항은 면역원성입니다. 하류 신호전달이 활성화되면 신체는 바이러스 RNA를 인식하고 이에 반응합니다. 단일 및 이중 가닥 RNA의 이러한 인식은 Toll 유사 수용체(TLR3), TLR7 및 TLR8과 같은 엔도솜 수용체에 의해 이루어집니다. 이중 가닥 및 50 -삼인산 변형 RNA는 세포질 수용체의 레티노산 유도 유전자-I(RIG{10}}) 및 흑색종 분화 관련 단백질 5(MDA-5)에 의해 인식됩니다. 신체의 면역체계가 통제되지 않은 방식으로 활성화되면 알레르기 반응과 아나필락시성 쇼크가 보고되었습니다. 분자 수준에서 면역 체계를 과도하게 자극하면 단백질 번역, 항원 발현 및 백신 효능이 제한됩니다. 이러한 한계는 핵염기 변형을 통해 극복될 수 있습니다. 변형된 핵염기인 N1-메틸 슈도우리딘은 단백질 생산량을 증가시키고 TLR3의 활성화를 감소시킵니다. RIG-1를 통해 변형된 뉴클레오티드는 단백질-RNA 상호작용에 영향을 미칠 뿐만 아니라 면역학적 신호를 전파하는 mRNA의 능력도 감소시킵니다. N1-methylpseudouridin으로 인해 mRNA의 단백질로의 번역 효율이 향상됩니다. 빠르게 발생하는 번역 개시는 mRNA의 반감기를 동시에 증가시킵니다[50].

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5.4. mRNA 전달을 위한 지질 나노입자 구성요소

다른 모든 백신에 비해 mRNA 백신은 상대적으로 빠르게 개발되고 더 효과적입니다. 그러나 mRNA 백신 제조에 있어서 가장 큰 과제는 안정성이 낮다는 것입니다. 백신이 전달된 후 리보뉴클레아제에 의해 빠르게 분해되어 분해된 성분이 생성되어 신장을 통해 제거되기 때문에 백신의 안정성과 코로나{0}} 감염 치료 능력이 감소합니다. 이러한 과제를 해결하기 위해 mRNA는 지질 나노입자(LNP)로 제형화될 수 있습니다. mRNA-LNP 백신은 mRNA가 조기 분해되는 것을 방지하고 항원 제시 세포로의 세포질 전달을 촉진할 것입니다[72]. 지질은 융합이 지질 세포막과 호환되므로 세포질 부위에서 mRNA를 전달하는 완벽한 제제입니다. mRNA의 표적화되고 효과적인 방출로 이어집니다. LNP는 다양한 비율로 두 개 이상의 지질을 포함하는 직경이 1 마이크론 미만인 나노 크기의 입자입니다. LNP는 코어에 불연속 혼합물로 지질 성분이 존재한다는 점에서 리포솜과 다릅니다. 제형화된 LNP는 다중층 소포 구조, 균질한 코어 쉘 및 나노구조 코어를 가지고 있습니다[73]. LNP 코어 내부에는 물이 존재하며, 이는 수성 매질과의 상호작용을 위해 mRNA를 노출시킵니다. 그림 8에서 볼 수 있듯이 mRNA는 LNP 내부에 위치하여 외부 환경으로부터 이를 보호합니다. mRNA LNP 시스템을 구성하는 가장 일반적인 구성은 양이온성/이온화 가능한 지질, 인지질("헬퍼 지질"), 콜레스테롤 및 폴리에틸렌글리콜(PEG)입니다. 캡슐화 효과, 외부 표면 전하, 입자 크기 및 모양과 같은 LNP 전달 시스템 내부의 물리화학적 특성은 지질 구성을 조정하여 쉽게 수정할 수 있습니다. 구성 요소 비율은 원하는 표적 조직에 따라 조정됩니다[74].

그림 8. 효율적인 mRNA 전달에 사용되는 지질 나노입자의 구조. (2023년 1월 1일에 액세스한 BioRender.com으로 생성됨)

5.4.1. 양이온성 지질

순 양전하를 부여하는 아민기, 소수성 사슬 및 친수성 부분을 소수성 사슬에 부착할 수 있는 연결기를 통해 양이온성 지질은 양친매성 특성을 나타냅니다. 그들은 극성 머리에 영구적인 양전하를 가지고 있어 음전하를 띤 핵산과의 상호작용을 돕고 포획 효율을 향상시킵니다. 순 양전하로 인해 LNP 시스템의 엔도좀 탈출과 세포 흡수도 증가합니다. mRNA 투여를 위해 양이온성 지질, 이온화 ​​가능한 지질 및 기타 지질 유형이 조사되었습니다. 비이온성 양이온성 지질과 비교하여, 낮은 pH에서 양전하를 띠고 생리학적 pH에서 중성을 유지하는 이온성 지질은 pH 변화로 인해 상대적으로 독성이 적습니다. 세포막 내부에서는 양전하를 띠고 있으며 혈류에서는 전하를 띠지 않는 특성을 가지고 있습니다. BNT162b2 백신은 양이온성 지질 ALC-0315를 포함하는 반면 mRNA-1273는 SM-102를 포함합니다. 낮은 pH에서는 두 지질이 모두 양성자화되어 mRNA와 쉽게 복합체를 형성합니다. 물 속의 mRNA 흐름은 미세유체 장치를 사용하여 에탄올의 지질 혼합물과 결합됩니다. 음전하를 띤 mRNA를 포획하기 위해 이 두 흐름의 구성 요소가 빠르게 결합하여 나노입자를 생성합니다[75]. BNT162b2 백신의 경우 양이온성 지질:PEG-지질:콜레스테롤:DSPC의 몰비는 (46.3:1.6:42.7:9.4)이고 mRNA{18}}의 경우 (50:1.5:38.5:10)입니다. 나노입자는 직경이 80-100nm이고 지질 나노입자 하나에 약 100개의 mRNA 분자가 있습니다[73].

5.4.2. 폴리에틸렌 글리콜(PEG) 지질

콜로이드의 안정성과 나노입자 폴리에틸렌 글리콜 지질에 대한 단백질 결합 방지를 위해 사용됩니다. 이는 나노입자의 제거를 최소화하여 더 긴 전신 순환을 제공합니다. LNP는 용액에서 물리적 응집을 일으킬 수 있으며, 이는 LNP의 입자 크기를 증가시킬 수 있으며, PEG 지질은 캡슐화된 mRNA의 조기 방출 문제도 극복할 수 있습니다. 더욱이, LNP의 저장 안정성도 향상될 것이다[76].

5.4.3. 콜레스테롤

세포의 형질감염과 LNP 안정화를 위해 콜레스테롤은 중요한 역할을 합니다. LNP에서 콜레스테롤 함량이 증가하면 더 낮은 전이 온도가 달성되며, 이는 LNP에서 mRNA를 방출하고 엔도솜 막을 가로지르는 mRNA의 전이에 도움이 됩니다[77]. Zhang 등이 수행한 연구에서, 변형된 리포솜은 mRNA 전달을 위한 담체로서 디올레오일-3- 트리메틸암모늄 프로판(DOTAP)과 함께 콜레스테롤 변형 양이온 펩타이드 DP7을 사용하여 제제화되었습니다. 필름 수화 기술로 리포솜을 제조한 후 형질감염 효율을 평가했습니다. 시험관 내에서 형질감염 연구에서는 DP7 펩타이드 농도가 증가함에 따라 형질감염 효율이 증가하는 것으로 나타났습니다. 이 외에도 생체 내 항종양 연구에서는 복합체가 종양에 대해 더 나은 효능을 갖는 것으로 나타났습니다[78].

5.4.4. 기타 부형제

mRNA 백신은 안정제로 구성됩니다. 7-8의 pH를 유지하기 위해 완충제인 트로메타민, 염분: 신체의 산도 균형을 맞추는 데 도움이 되고, 동결 보호제 역할을 하는 냉동 중에 분자의 모양을 유지하는 데 도움이 되는 설탕은 지질 나노입자-mRNA 제형의 장기간 안정성을 유지합니다. [73]. mRNA 기반 백신에 사용되는 주요 성분에 대한 요약은 표 2와 3에 나와 있습니다.

표 2. mRNA 기반 백신에 사용되는 주요 성분.

표 3. 화이자 및 모더나 mRNA 백신의 제제 성분.

5.5. 기타 mRNA 전달 시스템

5.5.1. 고분자 나노입자

고분자 나노입자는 PLGA[폴리(락틱-코-글리콜산)], 키토산, PLA(폴리락트산), 폴리카프로락톤, 젤라틴 및 폴리-알킬-시아노아크릴레이트와 같은 합성 또는 천연 고분자로부터 합성될 수 있습니다. 이러한 고분자 나노입자는 소수성 및 친수성 화합물과 단백질을 캡슐화할 수 있으며 수명이 길다. 치료 화합물의 전달을 수정할 수 있습니다. RNA는 소수성 변형을 통해 자가 조립된 양이온 폴리머에 캡슐화될 수 있습니다[80,81].

5.5.2. 양이온성 나노 에멀젼

양이온성 나노 에멀젼은 핵산 전달을 위한 효과적인 전달 수단으로 입증되었습니다. 나노에멀젼에 존재하는 양이온성 지질은 정전기적 상호작용을 통해 핵산과의 복합체를 이루는 데 중요하며, 핵산의 형질감염 효율과 안정성을 향상시킵니다. 연구에 따르면 mRNA 양이온성 나노 에멀젼 전달 시스템은 면역 세포를 모집하고 비교적 낮은 용량에서 항체 및 T 영장류에 대한 세포 반응을 촉진함으로써 면역 반응을 향상시키는 것으로 나타났습니다[80,82].

5.5.3. 실리카 나노입자

메조다공성 실리카 나노입자는 메조다공성 범위의 다공성이 잘 배열된 비정질 실리카 매트릭스로 구성됩니다. 이러한 나노입자는 큰 기공 부피를 갖는 큰 표면적을 갖고 있으며 그 표면은 음전하를 띤 RNA를 효과적으로 운반하기 위해 특정 양전하를 띤 부분에 의해 쉽게 변형될 수 있습니다. 더욱이, 표면에 특정 리간드를 부착함으로써 RNA의 표적화된 전달이 가능할 수 있다[81]. Adam 등이 수행한 연구에 따르면, 변형된 다공성 실리콘 미세입자(mPSM) 기반 비강 백신이 코로나-19용으로 제조되었습니다. 제제는 보조 T 세포(Th1)와 면역 반응의 증가를 가져왔고 mPSM은 비강 경로를 통한 항원 흡수를 유발했습니다. 바이러스 부하가 크게 감소한 것으로 나타났습니다 [83].

5.5.4. 탄소 및 금 나노물질

탄소 나노튜브, 금 나노입자, 나노그래핀 산화물 및 양자점은 RNA를 표적 부위에 전달하고 분해로부터 보호할 수 있는 잠재력을 가진 합성된 나노구조입니다[81].

6. 백신 보관에 대한 과제

mRNA 백신의 주요 관심사는 안정성과 보관 요건입니다. 안정성은 부형제, pH, 온도 등의 요인에 따라 달라집니다. BioNTech/Pfizer의 코로나-19 백신은 −80 ◦C에서 보관해야 하며 유효 기간은 최대 6개월이며, Moderna의 코로나{3}} 백신은 -20에서 보관해야 합니다. ◦C이며 유통기한은 동일합니다. BioNTech/화이자 백신은 운송 시 드라이아이스와 함께 포장해야 합니다. mRNA 백신은 초저온에 보관해야 하기 때문에 전 세계 가난한 국가에 두 백신을 모두 배포하는 것은 어렵습니다. 이러한 요구 사항은 비용이 많이 들고 자원이 제한된 세계 지역에서는 준비가 어렵습니다. 임상적으로 효능이 있으면서도 큰 보관 비용을 들이지 않고 장기간 보관할 수 있는 내열성 mRNA 백신의 개발이 문제 중 하나이다. EMA 보관 권장 사항에 따르면 Moderna와 BioNTech에서 만든 mRNA 백신은 냉동 시 -25°C에서 최대 6개월, 냉장고 온도(4°C)에서 최대 30일, 실온에서 최대 6시간 동안 안정적입니다. 84].

7. mRNA 백신의 안전성과 유효성

7.1. mRNA 기반 백신의 안전성

mRNA 백신에 대한 안전성 관련 결과 평가가 수행되었습니다. mRNA-1273에 대한 1상 용량 증량, 공개 라벨 시험이 18~70세 이상의 참가자를 대상으로 수행되었습니다[85]. 이 연구는 18~55세 참가자에게 250μg의 백신 용량을 투여하고 노년층 대상에게 25μg 또는 100μg의 용량을 투여하는 두 그룹으로 나누어 수행되었습니다. 백신 접종 후 원치 않는 국소 및 전신 이상반응, 원치 않는 이상반응, 심각한 이상반응 및 새로운 만성 질환의 발생이 관찰되었습니다. 그 결과 심각한 부작용이 발생하지 않은 것으로 나타났습니다. 보고된 가장 일반적인 이상반응은 두통, 피로, 근육통, 오한, 주사 ​​부위 통증 등이었습니다. 중화 항체 수준은 인간의 다양한 바이러스에 대한 방어 및 동물 공격에서 SARS-CoV-2에 대한 방어와 상관관계가 있는 것으로 입증되었습니다. 노인을 대상으로 한 mRNA{15}} 백신은 높은 수준의 결합 및 중화 항체를 생성했으며, 시간 및 용량 의존적 경향은 젊은 성인의 반응과 유사했습니다. 두 번째 백신 접종 후의 반응은 코로나19에서 회복되어 회복기 혈청을 기증한 환자(일부 중병 환자 포함)에게서 나타나는 반응과 비슷했습니다. 100μg 용량을 투여받은 노인 환자는 25μg을 투여받은 환자에 비해 더 높은 항체 및 T세포 반응을 보였으며, 그 반응은 100μg 용량을 투여받은 18~55세 참가자의 반응과 동일했습니다. 56세 이상의 환자는 중화항체를 얻기 위해 2차 백신 접종을 받아야 한다. 추가 접종을 받으면 항체 역가가 급격히 증가합니다. 다양한 임상시험에서 관찰된 모더나와 화이자 백신의 안전성 주요 결과는 표 4에 나열되어 있습니다.

표 4. 임상시험에서 mRNA 백신의 안전성 및 유효성 연구

표 4. 계속

두 번째 백신 접종 후 국소 및 전신 반응성 사건의 빈도가 증가했으며 주로 중등도의 심각도였습니다. 홍반 발생률은 3명의 참가자에게서 발견되었으며 5~7일 동안 지속되었습니다. 발열 및 피로와 같은 전신적 이상반응은 노년층 하위군에서 두드러지게 발생했습니다. 이러한 모든 발견은 요청된 또는 요청되지 않은 부작용이 경증에서 중등도까지 심각했음을 시사합니다. 따라서 mRNA-1273는 대규모 모집단에서 안전성과 효능을 평가하기 위한 2/3상 시험에 대해 추가로 테스트되었습니다[95]. 3상 임상 시험은 무작위, 계층화, 관찰자 ​​맹검 및 위약 대조 연구로, 18세 이상의 지원자 30,420명을 대상으로 무작위로 배정되어 백신(100μg의 0.5mL)을 접종받았습니다. 복용량) 또는 위약. 예방접종 후 7일 동안의 국소 반응, 전신 이상반응, 용량 투여 28일 후 예상치 못한 이상반응, 모든 유의미한 이상반응을 안전성 평가를 위해 추적했습니다. 위약군(84.2% 대 19.8%)에 비해 mRNA{17}}에서 요청된 부작용이 우세했습니다. 가장 많이 관찰된 증상 중 일부는 백신 접종 후 주사 부위의 통증, 홍반, 압통 및 경결이었습니다. 이러한 현상은 백신 접종 후 4~5일 이내에 사라졌습니다. 두 번째 투여 후 mRNA-1273 그룹은 더욱 심각해지는 전신 증상을 유발했습니다. 과민반응의 존재는 백신군과 위약군 참가자의 각각 1.5%와 1.1%에서 나타났습니다. 이러한 불만 외에 백신 투여 후 안전성 문제는 제기되지 않았습니다[106].

두 번의 SARS CoV-2 mRNA 주사에 따른 방어력 약화와 변종 도입으로 인해 세 번째 백신 접종이 필요했습니다. 이전에 1상 연구에서 mRNA-1273 1차 시리즈를 접종받은 사람들에게 3차 mRNA 백신을 투여한 후 이들의 초기 안전성과 면역원성을 평가했습니다. 나폴리(이탈리아)에서 수행된 단면적 연구에서는 코로나-19 백신 추가 접종에 대한 준비 상태를 평가했습니다. 이 그룹에서 추가 접종 허용률은 거의 86%였습니다. 또한, 주요 백신 접종 후 건강이 좋아진 노인, 코로나 양성 반응을 보인 친구나 가족과 함께 살고 있는 사람, 공식 공공기관으로부터 질병 관련 정보를 받은 사람 등은 추가 접종 의향이 있었습니다. 복용량 [107].

2가 백신 접종에는 각각 25mcg의 mRNA-1273 및 mRNA{2}}.351이 포함된 반면, 추가 백신 제제에는 100mcg의 mRNA-1273와 50mcg의 mRNA-1273가 포함되어 있었습니다. .351은 베타 변종 스파이크 단백질을 암호화합니다. mRNA 백신의 세 번째 용량은 적절한 반응성과 안전성을 보여주었습니다. 두 번째 투여 후 최고 반응과 비교했을 때, D614G, 베타 및 델타 변이체에 대한 결합 및 중화 항체 역가의 백신접종으로 인한 증가는 비슷하거나 더 컸습니다. 중화 항체와 결합 항체가 지속적으로 감소하는 것으로 나타났습니다. 그러나 연령 및 초기 1차 시리즈 용량(예: 25, 50, 100 및 250 µg)에 관계없이 참가자의 경우 10~11개월(3차 용량 전)에 항체가 검출되었습니다. 접종 부위 통증, 피로, 근육통 및 오한은 mRNA 백신의 세 번째 투여 후 가장 자주 보고된 부작용이었고, 이러한 사례의 빈도는 세 가지 추가 백신 요법(1가 프로토타입, 1가 변형 및 2가 그룹) 간에 유사했습니다. ). 1가 또는 2가 베타 변이체 백신을 사용하면 베타 돌연변이 펩타이드 내의 에피토프에 대한 세포 반응에서 특별한 이점이나 단점이 나타나지 않았습니다. 이러한 모든 발견은 변이체 간의 광범위한 면역학적 교차 보호를 제공하기 위해 1가 프로토타입 mRNA-1273 부스트가 사용된다는 현재의 제안을 뒷받침합니다[95]. 조사에 따르면, ChAdOx1(ChAd) 프라이밍된 참가자(ChAd/BNT)의 이종 BNT162b2(BNT) 투여는 동종 BNT 투여(프라임 및 부스터 모두 BNT 백신, BNT/BNT)에 비해 비열등한 면역원성을 나타냈으며 허용 가능한 반응성을 보였습니다. 그리고 더 큰 T 세포 반응. 동종 ChA dOX1 백신 접종(ChAd/ChAd)과 비교하여, 이종 ChAd/BNT 백신 접종은 더 강한 면역원성을 유도했습니다(ChAd/BNT 대 ChAd/ChAd, 항체 역가 비율: 9.2)[108].

BNT162b2에 대한 1상 시험은 76명의 참가자를 대상으로 진행되었습니다. 그들은 무작위로 10 µg, 30 µg 및 100 µg 백신 용량을 투여받았고, 다른 그룹에는 위약이 투여되었습니다. 10μg, 30μg 및 100μg을 100% 투여받은 피험자의 58.3%는 첫 번째 투여 후 주사 부위에 국소 반응 통증을 경험했습니다. 모든 국소 반응의 심각도는 경증에서 중등도였습니다. BNT162b2의 피로와 두통은 일반적인 전신 증상이었습니다. 그 밖에 오한, 근육통, 관절통 등도 관찰되었다. 용량을 늘리면 두 번째 용량을 투여한 후 전신 증상이 더 많이 보고되었습니다. BNT162b1 10g 또는 30g을 투여받은 참가자의 총 50.0%, BNT162b1 100g을 투여받은 참가자의 58.3%, 위약 투여자의 11.1%가 부작용을 경험했다고 보고했습니다. 심각한 부작용은 보고되지 않았습니다[109].

다국적, 위약 대조, 관찰자 ​​맹검, 무작위 배정 및 중추적 효능 시험인 화이자/바이오엔텍 백신(BNT162b2)의 임상 시험에서는 16세 이상의 참가자 43,548명이 무작위로 배정되었습니다. 총 21,720명의 지원자에게 BNT162b2 1회당 30μg을 투여했고, 21,728명에게 위약을 투여했습니다. BNT162b2의 안전성 프로파일을 확인하기 위해 단기적으로 나타나는 주사 부위 통증, 중증도의 경우 경증~중등도, 피로, 두통 등의 특성을 평가했다. 무작위 배정에 따라 21일 간격으로 삼각근에 BNT162b2 또는 위약을 2회 주사했습니다[98]. BNT162b2 백신을 접종한 사람들의 국소 반응은 위약군에 비해 더 많이 보고되었습니다. 주사 부위의 경증 내지 중등도 통증은 일주일 이내에 BNT162b2 수용자들 사이에서 등록된 가장 흔한 불만 사항이었습니다. 심한 통증은 전체 인구의 1% 미만에서만 보고되었습니다. 젊은 참가자에 비해 노인 참가자의 통증이 덜 관찰되었습니다. 발적이나 붓기가 덜 관찰되었습니다. 2차 투여 후 국소반응은 덜 보고되었다[110].

백신을 접종받은 젊은 참가자는 나이가 많은 참가자보다 더 많은 전신 증상을 겪었습니다. 피로와 두통(59% 및 52%)이 가장 흔하게 보고된 증상이었으며, 백신 접종을 거의 받지 않은 대상자였습니다(<2%) experienced any severe systemic events. After the second dose of the vaccine, 16% of younger groups and 11% of older age reported fever (temperature ≥ 38 ◦C), which increased the use of antipyretic or painkillers. However, post-delivery of the first dose cases of fever were reported very less [110]. Lymphadenopathy was noticed as an adverse event in BNT162b2 receivers in comparison to the placebo group. A shoulder injury related to the vaccination, right axillary lymphadenopathy, paroxysmal ventricular arrhythmia, and right leg paresthesia were among the unfavorable events recorded among BNT162b2 recipients [98]. Rare adverse effects observed are Bell's palsy, acute myocardial infarction, cerebral venous sinus thrombosis, pulmonary embolism, Guillain–Barré syndrome, lymphadenopathy, herpes zoster reactivation, stroke, neurological complications, and thrombosis with thrombocytopenia syndrome, and autoimmunity (e.g., autoimmune peripheral neuropathies and autoimmune hepatitis). Among these certain adverse effects such as anaphylaxis, myocarditis, and appendicitis were common in younger people while Guillain–Barré syndrome and myocardial infarction increased with age. These vaccine-associated adverse effects are less frequent than the additional serious adverse effects that occur after severe COVID-19. A recent study reveals the risk of neurological complications in COVID-19 vaccine receivers. The molecular foundation of these adverse effects is unknown. We hypothesize that, since most of these are also apparent in severe COVID-19, it may be associated with acute inflammation produced by both the vaccine and the virus, as well as in the common SARS-CoV-2 S protein. In the BNT162b2 and mRNA-1273 vaccines encoded antigen (S protein) is stabilized it is therefore probable that, if entering the circulation and systemically distributed throughout the body, it can contribute to these adverse effects in susceptible individuals [111].

7.2. mRNA 백신의 효능

mRNA{0}}의 효능 평가에서 백신의 1차 평가변수는 두 번째 백신 접종 후 14일 후 증상이 있는 코로나19 감염을 예방하는 효능이었습니다. 2차 평가변수로는 증상이 지속되는 중증 코로나{3}} 감염의 예방이 사용되었습니다. 백신 접종 후 결과에 따르면 백신 접종 그룹에서는 11건의 코로나-19 사례가 있었고 위약 그룹에서는 185건의 사례가 있었으며 이는 증상이 있는 코로나바이러스 치료에 대한 mRNA{9}} 백신의 94.1% 효능을 나타냅니다.-19 . 2차 유효성 평가변수에 대해 중증 코로나19 예방에 대한 평가가 수행되었습니다-19. 바이러스 감염이 있는 참가자 30명이 위약군에 속했기 때문에 결과는 백신의 효능이 100%임을 나타냈습니다. 카타르에서 수행된 연구에서는 중증, 심각 또는 치명적인 코로나19 감염에 대한 mRNA-1273 95.7%의 백신 효능(VE)이 나타났습니다. 1차 접종 후 14일 이상 경과한 후 유효성은 B.1.1.7(알파) 변종에 대해 88.1%였으며 2차 접종 후 100%였습니다. B.1.351(베타) 균주에 대한 1차 및 2차 면역화 후에 61.3% 및 96.4%의 VE가 보고되었습니다. 따라서 이 백신은 증상이 있든 없든 상관없이 해당 변종과 모든 코로나19 입원 및 사망에 대해 단 한 번의 접종 후에도 꽤 성공적입니다[112].

SARS-CoV-2 감염의 바이러스학적 또는 혈청학적 증거가 없는 개인의 두 번째 접종 후 최소 7일에 발병한 확인된 코로나-19에 대한 BNT162b2 백신의 효능(VE)이 첫 번째 주요 백신이었습니다. 끝점. 두 번째 1차 평가변수는 이전 감염의 증거가 있거나 없는 참가자의 효과와 중증 코로나-19 감염 예방을 측정했습니다. 총 36,523명을 대상으로 한 연구에서 두 번째 접종 후 7일에 시작된 코로나{10}} 사례는 백신 접종 그룹에서 8건, 위약 그룹에서는 162건이었습니다. 이는 백신 효능의 95%를 보여준다. 그러나 바이러스 질환에 대해 관찰된 VE는 1차 접종과 2차 접종 사이에 52%였으며, 2차 접종 후 첫 7일 동안 91%를 기록해 2차 접종 후 최소 7일 이상 발병하면서 질병에 대한 완전한 효능을 달성했다. 백신 접종을 받은 그룹에서는 첫 번째 투여 후 발생한 심각한 코로나19{22}} 사례 10건 중 1건만 발생했습니다. 이러한 관찰은 모든 코로나{23}} 환자에 대한 우수한 전반적인 효능과 일치합니다. 고혈압 환자 중 백신 접종자에게서 감염 사례가 2건, 위약군에서는 44건이 발생했습니다. 이 사례는 고혈압 환자에서 백신 효능의 94.6%를 보고합니다. 따라서 BNT162b2 백신은 백신 접종을 받은 참가자의 1차 및 2차 효능 종점을 모두 충족합니다[113]. SARS-CoV-2 감염 외에도 BNT162b2 백신의 단회 투여로 델타 변종(B.1.617.2)을 사용하는 증상 질환에 대한 예상 예방접종 효능은 약 36%였습니다. 2회 투여 후 VE는 약 88%였습니다[114].

시스탄체 식물의 면역 체계 증가

8. 규제 문제

규제과학은 규제 결정이 내려지는 기초입니다. 주요 목적은 수명주기의 모든 단계에서 규제 대상 제품의 안전성, 효능, 품질 및 성능을 평가하기 위한 새로운 방법, 도구 및 표준을 개발하는 것입니다[115]. mRNA 백신은 전임상 연구, 임상 시험, 시판 후 감시에서 안전성과 효능에 대한 증거를 보여주고, mRNA 백신에 대한 높은 기준을 유지해야 하는 등 다른 유형의 백신과 동일한 종류의 규제 장애물에 직면해 있습니다. 생산에 사용되는 원료 및 제조의 일관성. 백신 테스트는 효소, 뉴클레오티드 및 선형 DNA 템플릿의 신뢰성과 재현성에 크게 의존합니다[116]. 지질과 같은 원료 성분은 엄격하게 규제되어야 하며 순도가 입증되어야 합니다. 선형 DNA 템플릿을 만들 때 현재 우수 제조 관리 기준(cGMP)을 따라야 합니다. 약물 성분의 최고 품질을 보장하려면 캡핑 및 폴리아데닐화 mRNA의 비율, 짧은 전사체의 수, 이중 가닥 RNA의 존재 여부를 주의 깊게 관찰하는 것이 중요합니다. 폴리아데닐화와 mRNA의 50번 끝 캡핑은 안정성과 효과적인 번역을 보장합니다[21]. 번역 효율성은 폴리(A) 꼬리와 밀접하게 연관되어 있습니다[114]. 입자에 캡슐화된 mRNA의 양을 정량화하고 입자의 크기 분포를 결정하는 것은 제조업체가 제조 균일성을 보장할 수 있도록 하기 때문에 의약품에 매우 중요합니다. 모니터링은 일반적으로 안정성, 확인, 무균성과 관련된 특성을 포함하여 다양한 특성에 대해 수행됩니다. 백신 개발자, 규제 기관 및 사용자의 문제 중 하나는 mRNA 백신의 열 안정성입니다[115]. 기존 백신접종은 다양한 보관 환경에서 안정성을 확인하기 위해 고온에 장기간 노출하는 등의 스트레스 테스트를 거칩니다. 이는 mRNA 분자의 안정성뿐만 아니라 백신 입자 자체의 구조 보존도 평가해야 하는 mRNA 백신에 대해서도 수행되어야 합니다. 다성분 mRNA 백신의 개별 mRNA 성분에 대한 무결성 테스트 프로토콜은 여전히 ​​개발이 필요합니다. 핵산 백신의 식별은 서열에 따라 결정됩니다. 일반적으로 주형으로 사용되는 첫 번째 DNA 플라스미드의 서열은 mRNA 백신접종에 충분합니다. 이는 DNA가 즉시 RNA로 번역되기 때문입니다. 직접적으로 또는 이를 cDNA로 변환한 다음 해당 DNA를 서열 분석하여 mRNA의 서열을 분석하면 추가 정보를 제공하는 것으로 알려져 있지 않습니다. 비록 RNA 폴리머라제의 오류율이 DNA 폴리머라제의 오류율보다 상당히 높더라도, 104-105 뉴클레오티드마다 1개의 오류라는 명시된 오류율은 오류의 무작위 특성으로 인해 RNA에서 감지하기 어려울 것입니다. mRNA 백신이 동물 모델에서 보호 면역을 제공한다고 제안하는 현재 연구에 따르면, 이 오류율은 면역원성 항원의 형성을 변경하지 않는 것으로 보입니다. 지질 정량화는 LC-MS/MS로 수행할 수 있습니다[116]. 단백질이 너무 빨리 번역되면 기능성 항원으로 적절하게 접히지 않아 백신 효능이 저하되는 의도하지 않은 결과를 초래할 수 있습니다.

9. 토론

2021년에는 mRNA 백신이 코로나19에 대한 제약 산업의 반응에서 중요한 위치를 차지하고 있어 주목을 받았습니다-19. 약화되고 복제되지 않는 바이러스 복사본을 사용하여 항원을 표시하고 면역 반응을 유도하는 전통적인 바이러스 백신과 달리 mRNA 전략은 생물학적 유도를 제공할 수 있는 최적화된 단일 가닥 mRNA 분자를 사용합니다. 일단 백신을 접종하면 세포는 이를 받아들여 mRNA 서열을 '읽고' 스파이크 단백질을 생산합니다. 신체에는 그 스파이크와 유사한 단백질이 부족하기 때문에 면역 체계는 이를 해로운 것으로 해석하여 이에 대한 공격을 시작합니다. 게다가 나중에 코로나바이러스에 감염되면 면역체계는 스파이크 단백질을 기억하고 심지어 인식하기도 한다. 처음 두 개의 코로나-19 백신이 미국에서 개발되어 공개된 놀라운 속도는 Pfizer와 Moderna의 mRNA 백신이 12월에 FDA로부터 긴급 사용 허가를 받았다는 개념을 뒷받침합니다. 2020- 중국 과학자들이 코로나바이러스의 유전자 구성을 발표한 지 1년 후. mRNA 기반 백신 기술의 주요 이점은 표적 항원의 처리 과정이 숙주 세포에 '아웃소싱'되기 때문에 다양한 질병에 대해 신속하게 변형될 수 있다는 것입니다. 즉, 항원의 유전자 코드만이 백신 설계에 사용된다는 의미입니다. 후보자. 중국 정부가 SARS-CoV-2 유전자 구조를 교환한 후 Moderna가 1상 연구를 위해 백신 후보를 미국 국립 보건원(NIH)으로 운송하는 데 걸린 시간은 단 44일이었습니다. mRNA 백신 백신은 이 방법에 대한 임상 시험이 부족하고 제품 안정성 및 배포와 관련된 기술적 문제로 인해 역사적으로 인류에게 사용하기 위한 규제 승인을 얻지 못했습니다. 시장에서 mRNA 백신이 증가함에 따라 새로운 mRNA 백신의 개발 및 평가에 도움이 되는 보다 정확한 조언이 가능합니다. 제어는 mRNA 백신 과학이 초기 단계에 있는 또 다른 분야입니다. mRNA 백신이 주요 임상 시험에 충분히 안전함에도 불구하고 현재 미국 식품의약국(FDA)이나 유럽 의약청(European Medicines Agency)의 공식 지침은 없습니다.

10. 맺음말 및 향후 전망

2020년 이전에는 mRNA는 백신계에서 잘 알려진 과학용어가 아니었습니다. 치명적인 글로벌 코로나19(COVID{2}}) 대유행이 시작된 지 1년이 넘도록 mRNA 기반 임상 프로그램에 대한 일반 대중과 대형 제약회사의 지원이 크게 증가했습니다. 8천만 명이 넘는 미국인이 획기적인 가능성을 지닌 mRNA 기술을 사용하여 SARS CoV-2-COVID를 유발하는 바이러스-19에 대한 예방 접종을 받았습니다. 하버드 의과대학 바이러스학 및 백신 연구 센터 소장인 Dan Barouch 박사는 "COVID-19로 인해 백신 분야는 영원히 변화하고 발전했습니다."라고 말합니다. 대부분 코로나-19 백신의 경우 mRNA 가닥은 고유한 코로나바이러스의 "스파이크 단백질"을 생성하도록 설계되어 실제 바이러스 감염을 예방할 수 있는 면역 반응을 생성합니다. Moderna와 Pfizer/BioNTech가 개발한 백신은 주요 규제 기관으로부터 긴급 승인을 받은 유일한 mRNA 기반 백신이었으며 글로벌 코로나19 출시로 인한 실제 증거는 이 백신의 장기적인 효과를 입증하는 데 매우 중요합니다. 코로나 바이러스 및 기타 바이러스 에이전트에 대한 안전 기능. 엑소좀 기반 mRNA 전달은 또한 mRNA 기반 치료법의 미래가 될 것입니다[117,118]. 이러한 1세대 백신이 전 세계적으로 배포되기 시작하면서 mRNA 기반 기술의 의미가 명백해지면서 현재 감염성 질환에 대한 mRNA 임상 연구가 붐을 일으키고 있으며 업계 연구자들은 다른 치료 분야의 mRNA 플랫폼에 대한 관심이 증가할 것으로 예상하고 있습니다. , 특히 종양학, 그러나 심지어 흔하지 않은 자가면역 질환 및 신경 유전자에 대해서도 마찬가지입니다.

참고자료

1. 누구. WHO 코로나바이러스(COVID-19) 대시보드 2023. 온라인 제공: https://covid19.who.int/(2023년 1월 17일 액세스).

2. Pal, R.; Yadav, U. 코로나19-19 인도의 전염병: 현재 시나리오와 앞으로의 가파른 상승. J. 프림. 케어 커뮤니티 건강 2020, 11, 2150132720939402. [CrossRef] [PubMed]

3. 케니, R.; 알렉산더, A.; 나약, PG; 머드갈, J.; Nandakumar, K. 코로나19-19: 출현, 확산, 가능한 치료 및 글로벌 부담. 앞쪽. 공중보건 2020, 8, 216. [CrossRef] [PubMed]

4. 차브다(VP); 핑, F.-F.; 첸, Z.-S. 암 치료에 대한 코로나-19의 영향: 업데이트. 백신 2022, 10, 2072. [CrossRef] [PubMed]

5. 하라판, H.; 이토, N.; 유피카, A.; 위나르디, W.; 김, S.; 테, H.; 메가와티, D.; 하야티, Z.; 와그너, 앨라배마; Mudatsir, M. 코로나바이러스 질병 2019(COVID-19): 문헌 검토. J. 감염. 공중 보건 2020, 13, 667-673. [상호참조] [PubMed]

6. 차브다(VP); 몬타나주 차브리아; Apostolopoulos, V. 노인 인구 및 면역 저하 환자: SARS-CoV-2 변종 및 치료 결과에 미치는 영향. 생물학 2022, 2, 165-170. [상호참조]

7. 차브다(Chavda) 부사장; Redwan, EM SARS-CoV-2: 면역펩티도믹스 및 기타 면역학 연구. 백신 2022, 10, 1975. [CrossRef]

8. 노스캐롤라이나주 키리아키디스; 로페즈-코르테스, A.; 곤잘레스, EV; 그리말도스, AB; Prado, EO SARS-CoV-2 백신 전략: 3상 후보에 대한 종합 검토. Npj 백신 2021, 6, 28. [CrossRef]

9. 센통고, P.; 센통고, AE; 볼레티, N.; 그로프, D.; 썬, A.; 바, DM; 누네즈, J.; 학부모, LJ; 친칠리, VM; Paules, CI SARS CoV-2 감염, 증상 및 중증 코로나바이러스에 대한 백신 효과-19: 체계적인 검토 및 메타 분석. BMC 감염. 디스. 2022, 22, 439. [상호참조]

10. 차브다(Chavda) 부사장; 보라, LK; Vihol, DR COVAX-19® 백신: 면역이 없는 사람에게 바이러스가 전파되는 것을 완전히 차단합니다. 클린. 의학을 보완하십시오. Pharmacol. 2021, 1, 100004. [상호참조]

11. 차브다, 부사장; 보라, LK; 알래스카 판디아; Patravale, SARS-CoV-2용 VB 비강내 백신: 코로나-19 관리의 과제부터 잠재력까지. 약물 발견. 오늘 2021년 26일, 2619–2636. [상호참조]

12. 카우르, SP; Gupta, V. 코로나19-19 백신: 종합 현황 보고서. 바이러스 해상도. 2020, 288, 198114. [상호참조]

13. 바시레디, D.; 아틀루리, P.; 말라얄라, SV; Vanaparthy, R.; Mohan, G. 미국에서 긴급 사용을 위해 승인된 코로나19-19 백신에 대한 검토. J. 클린. 메드. 결의안. 2021, 13, 204. [CrossRef] [PubMed]

14. 정(Zheng), C.; 샤오, W.; 첸, X.; 장, B.; 왕, G.; Zhang, W. 코로나19-19 백신의 실제 효과: 문헌 검토 및 메타 분석. 국제 J. 감염. 디스. 2022, 114, 252–260. [상호참조]

15. 알라고즈, 오.; 알래스카 세티; 패터슨, BW; 추르펙, M.; 알하나에, G.; 스칼리아, E.; Safdar, N. 미국의 코로나-19 부담을 통제하기 위한 백신 접종의 영향: 시뮬레이션 모델링 접근 방식. PLoS ONE 2021, 16, e0254456. [상호참조]

16. 크로머, D.; 스타인, M.; 레이날디, A.; 슐럽, 테네시; 알래스카주 휘틀리; 주노, 재팬; 켄트, SJ; 트리카스, JA; 쿠리, DS; Davenport, MP 중화항체역가를 SARS-CoV-2 변종에 대한 보호 예측변수 및 부스팅의 영향: 메타 분석. Lancet Microbe 2022, 3, e52–e61. [상호참조]

17. 자오, J.; 자오, S.; 오, J.; 장, J.; 란, W.; 관, W.; 우, X.; 얀, Y.; 자오, W.; 우, J.; 외. 코로나19-19: 코로나바이러스 백신 개발 업데이트. 앞쪽. 면역. 2020, 11, 2256. [CrossRef] [PubMed]

18. 정용화; 바이스, V.; 파이어링, SN; Steinmetz, NF 코로나-19 백신 선두주자와 나노기술 설계. ACS 나노 2020, 14, 12522-12537. [상호참조] [PubMed]

19. 제인, S.; 벤카타라만, A.; 메인 웩슬러; Peppas, NA 메신저 RNA 기반 백신: 코로나-19 전염병 상황에서 과거, 현재, 미래 방향. 고급 약물 전달 2021, 179, 114000. [CrossRef] [PubMed]

20. 아라쉬키아, A.; 잘릴반드, S.; 모하젤, N.; 아프창이, A.; 아자드마네쉬, K.; Salehi-Vaziri, M.; 파즐라리푸르, M.; 푸리아예발리, MH; 잘랄리, T.; 무사비 나사브(SD); 외. 중증 급성 호흡기 증후군-코로나바이러스-2 스파이크(S) 단백질 기반 백신 후보: 최신 기술 및 미래 전망. 메디브 목사. 비롤. 2021, 31, e2183. [상호참조]

21. 박재욱; 라그니톤, PNP; 리우, Y.; Xu, RH 코로나바이러스용 mRNA 백신-19: 내용, 이유 및 방법. 국제 J. Biol. 과학. 2021, 17, 1446. [상호참조]

22. 주, 엔.; 장, D.; 왕, W.; 리, X.; 양, B.; 송제이; 자오, X.; 황, B.; 시, W.; 루, R.; 외. 2019년 중국 폐렴 환자의 신종 코로나바이러스. N. Engl. J. Med. 2020, 382, ​​727-733. [상호참조] [PubMed]

23. 왕, 미네소타; 자오, R.; 가오, LJ; 가오, XF; 왕, DP; Cao, JM SARS-CoV-2: 구조, 생물학 및 구조 기반 치료법 ​​개발. 앞쪽. 셀. 감염. 미생물. 2020, 10, 7269. [CrossRef] [PubMed]

24. 차브다, 부사장; 호세인, MK; 벨라디야, J.; Apostolopoulos, V. 코로나19용 핵산 백신-19: 백신 개발 분야의 패러다임 전환. 생물학 2021, 1, 337-356. [상호참조]

25. 차브다, 부사장; 판디아, R.; Apostolopoulos, V. SARS-CoV-2에 대한 DNA 백신: 3세대 백신 접종 시대를 향하여. 전문가 개정 백신 2021, 20, 1549-1560. [상호참조] [PubMed]

26. 양, H.; Rao, Z. SARS-CoV-2의 구조적 생물학 및 치료법 개발에 대한 영향. Nat. 미생물 목사. 2021, 19, 685–700. [상호참조]

27. 쿠마르, S.; Nyodu, R.; 마우리아, VK; 삭세나, SK; 쿠마르, S.; Nyodu, R.; 마우리아, VK; Saxena, SK 인간 SARS-CoV-2 감염의 숙주 면역 반응 및 면역생물학. 코로나바이러스 디스. 2019(코로나19-19) 2020, 43–53. [상호참조]

28. 아스투리아스, EJ; 듀클로스, P.; 맥도날드, 네브라스카; 노하이넥, H.; Lambert, PH 고급 백신학 교육: 성장 및 글로벌 입지 조경. 백신 2020, 38, 4664-4670. [상호참조]

29. 카르다니, K.; 볼하사니, A.; Shahbazi, 바이러스 감염에 대한 S. Prime-Boost 백신 전략: 메커니즘 및 이점. 백신 2016, 34, 413-423. [상호참조]

30. Chen, JM 무시된 코로나19용 약독화 백신을 개발하기 위해 전 세계가 즉시 협력해야 합니까?-19? J. Med. 비롤. 2022, 94, 82–87. [상호참조]

31. 차브다, 부사장; 비홀, DR; 홍콩 솔란키; Apostolopoulos, V. 코로나19의 백신 세계-19: 인도의 기여. 백신 2022, 10, 1943. [CrossRef]

32. 아쉬라프, MU; 김영수; 쿠마르, S.; 서디; 아쉬라프, M.; Bae, YS 코로나-19 백신(재검토) 및 잠재적 백신 플랫폼으로서의 구강 점막 벡터 시스템. 백신 2021, 9, 171. [CrossRef]

33. 레서, K.; Whittaker, GR 코로나바이러스 예방접종-19: 공중 보건 및 바이러스 전파의 벤치마크. 공중 보건 2021, 197, e23. [상호참조] [PubMed]

34. 차브다, 부사장; Apostolopoulos, V. SARS-CoV-2의 Omicron 변종에 대한 추가 접종 전략이 충분합니까? 백신 2022, 10, 367. [CrossRef] [PubMed]

35. 차브다, 부사장; 베즈바루아, R.; 아탈리에, M.; 파리크, PK; 치파, AS; 파텔, S.; Apostolopoulos, V. 코로나19에 대한 바이러스 벡터 기반 백신 복제-19: 백신 접종 분야의 잠재적 길. 바이러스 2022, 14, 759. [교차참조]

36. 차브다, 부사장; Apostolopoulos, V. 코로나19-19 신흥 변종을 위한 백신 설계 및 백신 접종 전략. 전문가 개정 백신 2022, 21, 1359-1361. [상호참조] [PubMed]

37. 차브다, 부사장; 부푸, S.; 미쉬라, T.; 카마라즈, S.; 파텔, AB; 샤르마, N.; 첸, Z.-S. 코로나-19 관리에 대한 최근 검토: 진단, 치료 및 예방접종. Pharmacol. 의원 2022, 74, 1120–1148. [상호참조]

38. 차브다, 부사장; 첸, Y.; 데이브, J.; 첸, Z.-S.; 사우스캐롤라이나 주 차우한; 얄라푸, MM; VN 우베르스키; 베즈바루아, R.; 파텔, S.; Apostolopoulos, V. 코로나19-19 및 예방접종: 신화 대 과학. 전문가 개정 백신 2022, 21, 1603-1620. [상호참조]

39. 차브다, 부사장; 베즈바루아, R.; 데카, K.; 농랑, L.; Kalita, T. SARS-CoV-2의 Delta 및 Omicron 변종: 지금까지 알려진 내용. 백신 2022, 10, 1926. [CrossRef]

40. 피오레티, D.; 유레시아, S.; 파지오, VM; Rinaldi, M. DNA 백신: 암에 대한 새로운 전략 개발. J. Biomed. 생명공학. 2010, 2010, 174378. [상호참조]

41. 자오, Z.; 덩, Y.; 니우, P.; 송제이; 왕, W.; 두, Y.; 황, B.; 왕, W.; 장, L.; 자오, P.; 외. CHIKV VLP 및 DNA 백신의 공동 예방접종은 생쥐에서 유망한 체액 반응을 유도합니다. 앞쪽. 면역. 2021, 12, 925. [상호참조]

42. 칼람스, SA; 파커, SD; 엘리자가, M.; 메치, B.; 에두푸간티, S.; 후럴, J.; 데 로사, S.; 카터, DK; Rybczyk, K.; Frank, I. 플라스미드 인터루킨 12와 결합된 HIV-1 DNA 백신의 안전성 및 비교 면역원성 및 전달을 위한 근육내 전기천공의 영향. J. 감염. 디스. 2013, 208, 818-829. [상호참조]

43. 베즈바루아, R.; 차브다(VP); 농랑, L.; 알롬, S.; 데카, K.; 칼리타, T.; 알리, F.; 바타차르지, B.; Vora, L. 백신용 나노입자 기반 전달 시스템. 백신 2022, 10, 1946. [CrossRef] [PubMed]

44. 카람, M.; Daoud, G. MRNA 백신: 과거, 현재, 미래. Asian J. Pharm. 과학. 2022, 17, 491-522. [상호참조] [PubMed]

45. Dolgin, E. MRNA 백신의 뒤엉킨 역사. 자연 2021, 597, 318–324. [상호참조] [PubMed]

46. ​​Hoerr, I.; 옵스트, R.; 람멘제, HG; Jung, G. 정의되지 않음 RNA의 생체 내 적용은 특정 세포독성 T 림프구 및 항체의 유도를 유도합니다. 유로. J. Immunol. 2000, 30, 1–7. [상호참조]

47. 코세, N.; 폭스, JM; 사파라푸, G.; 롬바르디, R.; 테네쿤, RN; 다르샨 데 실바, A.; 엘바시르, 에스엠; 매사추세츠주 테이슨; Humphris-Narayanan, E.; 시아라멜라, G.; 외. 잠재적으로 중화하는 인간 단클론 항체를 암호화하는 지질 캡슐화 mRNA는 치쿤구니야 감염으로부터 보호합니다. 과학. 면역. 2019년 4월, eaaw6647. [상호참조]

48. Sahin, U.; 카리코, K.; 투레시, Ö. mRNA 기반 치료법-새로운 종류의 약물 개발. Nat. 마약 발견 목사. 2014, 13, 759-780. [상호참조]

49. Moss, P. SARS-CoV-2에 대한 T 세포 면역 반응. Nat. 면역. 2022, 23, 186–193. [상호참조] [PubMed]

50. 낸스, KD; Meier, JL 긴급 상황에서의 수정: 코로나-19 백신에서 N1-메틸슈도우리딘의 역할. ACS 센트. 과학. 2021, 7, 748–756. [상호참조]

51. 크렘스너, PG; 아후아드 게레로, RA; 아라나-아리, E.; 아로카 마르티네즈, GJ; 본텐, M.; 챈들러, R.; 코럴, G.; 드 블록, EJL; 에커, L.; 가보, JJ; 외. 유럽 ​​및 라틴 아메리카 10개국에서 CVnCoV SARS-CoV-2 mRNA 백신 후보의 효능 및 안전성(HERALD): 무작위, 관찰자 ​​맹검, 위약 대조, 2b/3상 시험. 랜싯 감염. 디스. 2022, 22, 329–340. [상호참조]

52. 알래스카주 블래크니; IP, S.; Geall, AJ 자가 증폭 mRNA 백신 개발에 대한 업데이트. 백신 2021, 9, 97. [CrossRef] [PubMed]

53. Yılmaz, E. 백신 기술의 새로운 희망: mRNA 백신. 미생물. 불. 2021, 55, 265-284. [상호참조]

54. 잭슨, NAC; 케스터, KE; 카시미로, D.; 구루나단, S.; DeRosa, F. MRNA 백신의 전망: 생명공학 및 산업적 관점. Npj 백신 2020 51 2020, 5, 11. [CrossRef] [PubMed]

55. 블룸, K.; 반 덴 버그, F.; Arbuthnot, P. 전염병에 대한 자가 증폭 RNA 백신. 유전자. 거기. 2021, 28, 117–129. [상호참조]

56. 콘, 이.; 엘리아, U.; Peer, D. 최적의 mRNA 지질 나노입자 백신 설계를 위한 원리. 현재 의견. 생명공학. 2022, 73, 329. [CrossRef] [PubMed]

57. 리, Y.; 티그, B.; 장 Y.; 수, Z.; 포터, E.; 도보쉬, B.; 와그너, T.; 어바인, DJ; Weiss, R. 면역요법을 위한 강화된 RNA 복제물의 시험관 내 진화. 과학. 2019, 9, 6932. [CrossRef] [PubMed]

58. 리나레스-페르난데스, S.; 라크로아, C.; 엑스포지토, JY; Verrier, B. 타고난/적응 면역 반응의 균형을 맞추기 위한 mRNA 백신 조정. 트렌드 몰. 메드. 2020, 26, 311–323. [상호참조]

59. 샘플, PJ; 왕, B.; 리드, DW; 프레스냑, V.; 맥파딘, IJ; 모리스, DR; Seelig, G. Human 50 UTR 설계 및 대규모 병렬 번역 분석을 통한 변형 효과 예측. Nat. 생명공학. 2019, 37, 803-809. [상호참조]

60. 쿠마르, 피.; 스위니, TR; 매사추세츠주 스캅킨; Skabkina, OV; 헬렌, CU; Pestova, IFIT 계열 구성원에 의한 TV 번역 억제는 50 -Cap의 말단 영역0-, Cap1- 및 50 Ppp-MRNA와 선택적으로 상호작용하는 능력에 의해 결정됩니다. 핵산 해상도. 2014, 42, 3228-3245. [상호참조]

61. 스트렌코프스카, M.; 그레젤라, R.; 마예프스키, M.; Wnek, K.; 코왈스카, J.; 루카스제비치, M.; 주베렉, J.; Darzynkiewicz, E.; 쿤, AN; 사힌, 유.; 외. 1,2-디티오디포스페이트 잔기로 변형된 캡 유사체는 mRNA의 디캡핑을 방지하고 번역 가능성을 향상시킵니다. 핵산 해상도. 2016, 44, 9578-9590. [상호참조]

62. 오전 Rydzik; 워민스키, M.; 시코르스키, PJ; 바라노프스키, MR; 월자크, S.; 코왈스카, J.; 주베렉, J.; 루카스제비치, M.; 노박, E.; 클라리지, TDW; 외. CX2로 테트라포스페이트 사슬에 대체된 mRNA 캡 유사체: 번역을 손상시키지 않고 디캡핑에 대한 저항성을 부여하는 최초의 브리징 변형으로서 O에서 CCl2로의 식별. 핵산 해상도. 2017년, 45, 8661–8675. [상호참조] [PubMed]

63. 앨라배마주 니콜슨; Pasquinelli, AE 상세한 폴리(A) 꼬리 이야기. 동향 세포 Biol. 2019, 29, 191-200. [상호참조] [PubMed]

64. 펠레티에, J.; Sonenberg, N. 진핵생물 리보솜 모집의 조직 원리. 아누. 화학 목사. 2019, 88, 307-335. [상호참조]

65. Pascolo, S. 예방접종을 위한 메신저의 위대한 메시지. 전문가 개정 백신 2014, 14, 153–156. [상호참조]

66. 로사, SS; 프라제레스, DMF; 오전 아제베도; Marques, MPC MRNA 백신 제조: 과제 및 병목 현상. 백신 2021, 39, 2190. [CrossRef] [PubMed]

67. Pascolo, S. 메신저 RNA: 저렴한 생물약제. J. 다분야. 영어 과학. 기술. JMEST 2017, 4, 2458-9403.

68. 탄 레, T.; 안드레아다키스, Z.; 쿠마르, A.; 고메즈 로만, R.; 톨레프센, S.; 사빌, M.; Mayhew, S. 코로나19-19 백신 개발 환경. Nat. 마약 발견 목사. 2020, 19, 305–306. [상호참조]

69. 마루기, G.; 장, C.; 리, J.; 울머, JB; Yu, D. 전염병 통제를 위한 백신 개발을 위한 변혁적 기술로서의 mRNA. 몰. 거기. 2019, 27, 757-772. [상호참조]