PART 2 Acteoside 및 그 유도체의 항산화 및 세포 보호: 비교 및 기계 화학
Mar 08, 2022
파트 2 Cistanche Acteoside 항산화제는 세포를 어떻게 보호합니까?
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3. 논의
천연 페놀 화합물의 항산화 작용은 전자 전달(ET)에 관여하는 것으로 알려져 있습니다[18,19]. 따라서 일부 ET 기반 금속 환원 분석은 FRAP 및 CUPRAC 분석과 같은 페놀의 항산화 수준을 평가하는 데 널리 사용되었습니다. FRAP 분석 지침은 3.6 미만의 pH로 충족되어야 합니다. 이러한 산성 환경은 성공적으로 페놀로부터 H와 이온화를 억제했습니다. 따라서 FRAP 분석은 단순한 ET 과정으로 간주됩니다[20,21]. 의 효과악티오사이드FRAP 분석에서 그 유도체는 acteoside와 그 유도체가 항산화제로 작용할 때 ET 경로를 사용하여 항산화 작용을 발휘할 수 있음을 의미합니다.
게다가, 우리는 또한 pH 7.4 완충액에서 CUPRAC 분석을 수행했습니다. Suppl에서 볼 수 있듯이. 1,악티오사이드및 그 유도체는 용량 의존적으로 Cu를 증가시켰습니다.2 플러스- 전력 백분율을 감소시켜 생리학적 pH에서 ET 전위를 유지할 수 있음을 나타냅니다. 그러나 ET 잠재력은 다음과 같은 순서로 감소했습니다.악티오사이드> 포시토사이드 B > 폴리우모사이드(표 1). 이 역학은 포르시토사이드 B의 아피오실 모이어티와 폴리우모사이드의 람노실 모이어티가 ET 전위를 낮췄음을 분명히 시사합니다.
라디칼 소거 과정에서 ET가 발생할 가능성을 테스트하기 위해 산소 중심의 자유 라디칼 PTIO·가 연구에 도입되었습니다. 순환 전압전류법 증거에 따르면 pH 5.{4}} 미만의 PTIO·-소거는 단일 전자-산화환원 반응입니다. 라는 관찰악티오사이드및 그 유도체는 pH 4.5에서 PTIO· 라디칼을 효율적으로 제거할 수 있으며 라디칼 제거 과정에서 ET의 가능성을 시사합니다. 분명히, 이 발견은 FRAP 및 CUPRAC 분석에서 앞서 언급한 결과와 전자 공여(e)가 페놀계 항산화제의 특징이라는 이전 결과를 추가로 뒷받침합니다[23].
그러나 생리학적 pH 7.4에서 PTIO·-소거 에세이는 단순한 ET 경로가 아니라 proton-(H plus ) 전달 경로도 포함합니다. 이 과정에서 PTIO・는 H를 수락하도록 제안되었습니다....을 더한페놀로부터 생성물 피크([PTIO-H]...을 더한). 왜냐하면 H...을 더한-전달은 항상 단계적 또는 동시적 메커니즘에서 ET를 동반하며[24], 실제(또는 최종) 생성물은 [PTIO-H] 분자[22]입니다. pH 7.4(Suppl. 1)에서의 PTIO·-소거는 다음을 의미합니다.악티오사이드그리고 그 파생물은 H 플러스 -전이 가능성도 가지고 있습니다. IC50 값(표 1)은 상대 H...을 더한- 전이 가능성은 내림차순이었다.악티오사이드>포르시토사이드 B > 폴리우모사이드. 분명히, 아피오실과 람노실 모이어티는 또한 H를 약화시켰습니다....을 더한-항산화 과정 중 전이 가능성.
앞서 논의한 바와 같이, 페놀의 항산화 과정에서 ET는 일반적으로 양성자(H...을 더한) 수소 원자 이동(HAT)[23,{3}}], 순차 전자-양성자 이동(SEPT)[26,27], 순차 양성자 손실 단일 전자와 같은 여러 항산화 메커니즘[24]을 형성하기 위한 이동 전이(SPLET)[26] 및 양성자 결합 전자 전달(PCET)[{10}},28]. 예를 들어, 단일 전자 전달(SET)[29]이 지배적인 반응인 ABTS + -소거는 최근에 H + 수준의 영향을 받는 것으로 입증되었습니다[30]. 따라서 ABTS + -소거는 다중 경로 기반 항산화 분석법입니다[21,31]. 사실 그악티오사이드그리고 그 파생물은 ABTS를 소거할 수 있습니다. 라디칼은 항산화 작용이 다중 경로를 통해 매개될 수도 있음을 나타냅니다. 이 가설은 HAT, ET, SEPT 및 PCET 다중 경로를 포함하는 반응인 DPPH·-소거 분석의 증거에 의해 추가로 확인됩니다[26,32]. 그러나 정량분석 기반 IC50값(표 1)은 다중 경로 기반 ABTS와 --소거 및 DPPH* 소거 측면에서,악티오사이드적절한 forsythoside B와 rhamnoside poliumoside보다 우월했습니다. 따라서 apiol 및 rhamnosyl 부분이 결국 다중 경로 전위(특히 ET 및 H...을 더한-transfer) 자유 라디칼 소거 과정 동안.
저자 및 다른 사람들[14,26]이 언급한 바와 같이 항산화 과정에서 RAF 반응도 발생할 수 있습니다. 그러나 RAF 가능성을 확인하기 위해 UPLC-ESI-Q-TOF-MS/MS 분석을 사용하여 카페인산과 함께 3개의 페닐프로파노이드 배당체를 연구했습니다. 카페인산은 이량체 생성물을 생성하는 것으로 밝혀진 반면, 3개의 페닐프로파노이드 글리코시드는 RAF 생성물의 피크를 생성하지 않았다. 이 발견은 3개의 페닐프로파노이드 배당체가 항산화 작용을 발휘하기 위해 RAF 경로를 거칠 수 없음을 분명히 시사합니다. 3개의 페닐프로파노이드 배당체가 카페인산의 에스테르로 간주될 수 있기 때문에(그림 1), 카페산과 카페산 에스테르 간의 이러한 차이는 거대한 부분이 RAF의 생성을 방해할 수 있음을 나타냅니다.
자유 라디칼 소거 측면에서 종합하면,악티오사이드그리고 그 유도체는 항산화 작용을 발휘하기 위해 여러 경로를 거칠 수 있습니다. 이러한 항산화 경로는 적어도 ET 및 H 플러스 -전달(RAF는 아님)에 관여합니다. 우리의 연구 결과는 다음과 같은 이론적 연구에 의해 부분적으로 뒷받침됩니다.악티오사이드SPLET 경로를 통해 항산화 작용을 발휘할 수 있습니다. 이 과정에서 악테오사이드는 먼저 탈양성자화될 수 있습니다(H...을 더한-transfer) 음이온을 생성합니다. 탈양성자화는 산성이 약한 카테콜 부분에서 발생하는 것으로 생각됩니다. 그 후 음이온은 전자를 공여하여 페녹시 라디칼 형태를 생성한다[33]. 그러나 pn 접합을 갖는 페녹시 라디칼은 어느 정도 안정합니다. 물론 이러한 점에서 앞으로 더 많은 실험적 연구가 필요하다.
세포 산화 스트레스는 전이 금속(특히 Fe2 플러스). 더 페2 플러스그러나 이온은 H를 변환할 수 있습니다.2O2Fenton 반응(Fe)을 통해 분자가 가장 유해한 •OH 라디칼로2플러스 플러스 H2O2 T Fe3플러스 플러스 ・OH 플러스 OH-). 따라서 Fe의 감쇠2플러스 수준은 세포 산화 스트레스를 방출하는 OH 라디칼을 효과적으로 억제할 수 있습니다. 사실, 천연 페놀성 항산화제에 의한 철 킬레이트화는 이제 일부 산화 스트레스 질환에 대한 효과적인 치료법으로 개발되었습니다[34,35].
본 연구에서는 acteoside 및 그 유도체가 효과적인 Fe로 제안되었습니다.2 플러스- 분광법 및 용액 색상의 변화에 따른 킬레이터(그림 2). 그럼에도 불구하고, acteoside는 Fe를 킬레이트화하는데 있어 두 글루코사이드보다 열등하다.2 플러스아피오실 모이어티가 있는 포르시토사이드 B는 람노실 모이어티가 있는 폴리우모사이드보다 열등합니다. 선호하는 형태의 비교(그림 1, 오른쪽)에 기초하여, 아피오실(또는 람노실) 부분이 Fe를 킬레이트화하는 주요 리간드(페닐프로파노이드 그룹)를 도울 수 있다고 제안됩니다.2 플러스. 이러한 시너지 효과는 의심할 여지 없이 Fe를 강화합니다.2 플러스-킬레이트 능력 및 UV-vis 피크를 확대합니다. 그러나 rhamnosyl은 Fe에서 apiosyl보다 더 효과적입니다.2 플러스- 킬레이트 능력. 그 차이는 람노실이 외환 형태(즉, αL-람노피라노실)로 발생하는 반면 아피오실은 5환 형태(즉, pD-아피오푸란실)에 있다는 사실에 기인할 수 있습니다. 외고리형은 더 크고 더 안정적인 것으로 알려져 있습니다. 따라서 Exocyclic rhamnosyl은 Fe에서 pentacyclic apiosyl에 비해 더 효과적입니다.2 플러스- 킬레이트 능력.
악테오사이드와 그 유도체가 ROS를 소거할 수 있는지 여부를 테스트하기 위해 피로갈롤 자동 산화 분석을 수행했습니다. Suppl에서 볼 수 있듯이. 1, 모두 세포에서 발생하는 전형적인 ROS인 라디칼을 효율적으로 소거할 수 있습니다. 그러나 상대적인 생체활성은 poliumoside > forsythoside B > 순으로 감소하였다.악티오사이드. 이 순서는 세포 보호 효과의 순서와도 유사합니다(표 2). 이 발견은 람노실 모이어티 또는 아피오실 모이어티의 일반적인 효과가 ROS 소거 또는 세포 보호 효과를 향상시키는 것임을 나타냅니다.
4. 재료 및 방법
4.1. 화학 물질 및 동물
Acteoside(CAS 번호: 61276-17-3, 97%), forsythoside B(CAS 번호: 81525-13-5,97%)는 BioBioPha(Kunming, China, Suppl. 3)에서 입수했습니다. Poliumoside(CAS 번호: 94079-81-9, 97%)는 우리 팀에 의해 전통 중국 허브에서 분리되었습니다.칼리카르파 페리HT Chang(Suppl. 3). DPPH・,(±)-6-히드록실-2,5,7,8-테트라메틸크로만-2-카르복실산(Trolox), 2,{8}}디메틸{{ 9}},{10}}페난트롤린(네오쿠프로인), 2,4,{13}트리피리딜트리아진(TPTZ) 및 피로갈롤은 Sigma-Aldrich Shanghai Trading Co.(중국 상하이)에서 구입했습니다. (NHq'ABTS [2,2'-azino-bis(3-에틸벤젠-티아졸린-6-술폰산 디암모늄염)]는 Amresco Chemical Co.(Solon, OH, USA)에서 입수했습니다. PTIO・라디칼은 TCI Development Co., Ltd.(중국 상하이)에서 구입했습니다. 카페인산은 National Institute for Control of Pharmaceutical and Biological Products(중국 베이징)에서 구입했습니다. Dulbecco의 변형 독수리 배지(DMEM), 태아 소 혈청 (FBS) 및 트립신은 Gibco(Grand Island, NY, USA)에서 구입했으며 AnnexinV/propidium iodide(PI) 분석 키트는 Invitrogen(Carlsbad, CA, USA)에서 구입했습니다. 다른 모든 시약은 분석 등급이었습니다.
4주령의 Sprague-Dawley(SD) 쥐를 광저우 중의과대학 동물센터에서 얻었다. 이 실험의 프로토콜은 중국 광저우 대학교의 기관 동물 윤리 위원회의 감독하에 수행되었습니다(승인 번호 20170306A).
4.2. 금속 환원 분석(FRAP)& 큐프락)
금속 환원 분석에는 Fe가 포함됩니다.3 플러스- 환원력 분석 및 Cu2 플러스- 환원력 분석. 더 페3 플러스- 환원 분석은 Benzie와 Strain에 의해 확립되었으며 공식적으로 FRAP[20]으로 명명되었습니다. 이 분석의 실험 프로토콜은 이전 보고서에 설명되어 있습니다[9]. 간단히 말해서, FRAP 시약은 10mM TPTZ, 20mM FeCl을 혼합하여 새로 제조되었습니다.3,및 {{0}}.25M 아세테이트 완충액(pH 3.6에서 1:1:10 비율). 테스트 샘플(x{7}} L, 0.05mg/mL)을 95% 에탄올(20 - x)에 첨가한 다음 80RL의 FRAP 시약을 첨가했습니다. 주변 온도에서 30-분 인큐베이션한 후 마이크로플레이트 판독기(Multiskan FC, Thermo Scientific, Shanghai, China)를 사용하여 595nm에서 흡광도를 측정했습니다. 샘플의 상대 환원력은 다음 공식을 사용하여 계산되었습니다.
어디 A최대샘플과의 반응 혼합물의 최대 흡광도이고, A분테스트에서 최소 흡광도입니다. A는 샘플의 흡광도입니다.
구2 플러스- 환원력은 또한 항산화 수준을 특징지을 수 있으므로 CUPRAC라고 합니다. 이 분석은 이전에 발표된 방법에 따라 수행되었습니다[36]. 간단히 말해서, 12 RL의 CuSOq 수용액(10mmol/L), 12RL의 네오쿠프로인 에탄올 용액(7.5mmol/L) 및 (75 - x) RL의 CH3쿤4완충 용액({0}}.1 mol/L, pH 7.5)을 샘플의 다른 부피(0.05 mg/mL, 4-20 |^L)로 웰에 첨가했습니다. 30분 후 450 nm에서의 흡광도는 전술한 마이크로플레이트 리더를 사용하여 측정하였다. 상대 CUPRAC 전력은 FRAP 공식을 사용하여 계산되었습니다. ㅏ최대샘플과의 반응 혼합물의 최대 흡광도이고, A분테스트에서 최소 흡광도입니다. A는 샘플의 흡광도입니다.
4.3. PTI0・- 청소 분석
PTIO*-소거 분석(pH 4.5 또는 pH 7.4)은 우리의 방법을 기반으로 수행되었습니다[16]. 간단히 말해서, 테스트 샘플 용액(x=0-20 ^L, pH 4.5의 경우 1mg/mL 및 pH 7.4의 경우 {{10}.5 mg/mL)을 (20 — x) 95% 에탄올 rL, 이어서 PTIO* 수용액 80RL. PTIO* 수용액은 포스페이트-버터 용액(0.1mM, pH 4.5 또는 pH 7.4)을 사용하여 제조되었습니다. 혼합물을 37도에서 2시간 동안 유지한 후, 전술한 마이크로플레이트 리더를 사용하여 560 nm에서 흡광도를 측정하였다. PTIO* 억제 백분율은 다음과 같이 계산되었습니다:
여기서 A도는 시료가 없는 대조군의 흡광도이고 A는 시료가 있는 반응 혼합물의 흡광도입니다.
4.4. 방탄소년단...을 더한*- 청소 및 DPPH*- 소거 분석
ABTS*...을 더한-소거 활성은 방법[37]에 따라 평가하였다. ABTS plus *는 0.2mL의 ABTS 디암모늄 염(7.4mmol/L)과 0.2mL의 과황산칼륨(2.6mmol/L)을 혼합하여 생성되었습니다. 혼합물을 실온에서 12시간 동안 암소에서 보관하여 라디칼 생성이 완료되도록 하고 증류수(약 1:20의 비율)로 희석하여 734 nm에서의 흡광도가 { {16}}.35 土 0.01 앞서 언급한 마이크로플레이트 리더를 사용합니다. 소거 활성을 결정하기 위해 테스트 샘플(x=4-20 RL, 0.05 mg/mL)을 (20 — x) RL의 증류수에 첨가한 다음 80RL의 ABTS + * 시약을 첨가하고 734에서의 흡광도 nm는 초기 혼합 후 3분 후에 증류수를 블랭크로 사용하여 측정되었습니다.
DPPH* 라디칼 소거 활성은 이전에 설명한 대로 결정되었습니다[18]. 간단히 말해서, 75 RL의 DPPH* 용액(0.1 rM)을 메탄올에 용해된 표시된 농도의 샘플(0.025 mg/mL, 5-25 RL)과 혼합했습니다. 혼합물을 실온에서 30분 동안 유지하고, 전술한 마이크로플레이트 리더를 사용하여 519 nm에서 흡광도를 측정하였다.
ABTS + -소거 활성 및 DPPH*-소거 활성의 백분율은 섹션 4.3에 제시된 공식을 기반으로 계산되었습니다.
4.5. 업LC—ESI—Q-TOF—PPH의 MS/MS 분석* 반응 생성물
이 방법은 이전 연구[25]를 기반으로 합니다. 액테오사이드의 메탄올 용액을 메탄올 중의 DPPH* 라디칼 용액과 1:2의 몰비로 혼합하고, 생성된 혼합물을 실온에서 24시간 동안 인큐베이션하였다. 그런 다음 생성물 혼합물을 0.{5}}Rm 필터를 통해 여과하고 C18 컬럼(2.{8}} mm id x 1{12}}0 mm, 1.6 Rm, Phenomenex, Torrance, CA, USA). 이동상은 시스템의 용출에 사용되었으며 메탄올(상 A)과 물(상 B)의 혼합물로 구성되었습니다. 컬럼은 다음과 같은 구배 용출 프로그램을 사용하여 0.3mL/min의 유속으로 용리되었습니다. 0-10 min, 60-100% A; 10-15 분, 100% A. 샘플 주입 부피는 다른 구성요소의 분리를 위해 1RL로 설정되었습니다. ESI-Q-TOF-MS/MS 분석은 Triple TOF 5600을 사용하여 수행되었습니다....을 더한ESI 소스가 장착된 질량 분석기(AB SCIEX, Framingham, MA, USA)는 음이온화 모드에서 실행되었습니다. 스캔 범위는 100-2000 Da로 설정되었습니다. 시스템은 다음 매개변수로 실행되었습니다: 이온 스프레이 전압, -4500V; 이온 소스 히터, 550℃; 커튼 가스(CUR, N2), 30psi; 분무 가스(GS1, 공기), 50psi; 가스(GS2, 공기), 50psi. 디클러스터링 전위(DP)는 -100V로 설정한 반면 충돌 에너지(CE)는 20V의 충돌 에너지 확산(CES)으로 -40V로 설정했습니다. RAF 제품
총 이온 크로마토그램(Suppl. 2)에서 해당 분자식을 추출하여 정량화했습니다.
포시토사이드 B, 포디움사이드, 카페인산을 이용하여 전술한 실험을 반복하였다. 해당m/z피크는 총 이온 크로마토그램(Suppl. 2)의 해당 분자식에서 추출되었습니다.
4.6. Fe의 UV-Vis-Spectra 분석2 플러스- 킬레이트 제품
더 페2 플러스-acteoside-Fe의 킬레이트 반응 생성물2 플러스UV-Vis-spectroscopy를 사용하여 평가되었습니다[13]. 실험을 위해 30액테오사이드(0.24mM)의 메탄올성 용액 700rL의 FeCl? 4H2O(168mM). 그 다음 용액을 격렬하게 혼합하였다. 이어서, 생성된 혼합물을 200-850 nm에서 1시간 후에 UV-Vis 분광 광도계(Unico 2600A, Shanghai, China)를 사용하여 스캔하였다.
악테오사이드 대신 포시토사이드 B 또는 포디움 사이드를 사용하여 앞서 언급한 실험을 반복하였다.
4.7. 과산화물 음이온에 대한 피로갈롤 자가산화 분석(•O2~) 청소
슈퍼옥사이드 음이온(・.{0}}) 소거 활성의 측정은 우리의 방법을 기반으로 했습니다[17]. 간단히 말해서, 샘플을 1 mg/mL의 에탄올에 용해시켰다. 샘플 용액(x rL)을 EDTA(1mM)를 함유하는 Tris-HCl 완충액(980 - x rL, 0.05M, pH 7.4)과 혼합하였다. 20 RL 피로갈롤(1mM HCl 중 60mM)을 첨가했을 때, 혼합물을 실온에서 즉시 진탕시켰다. 혼합물의 325 nm에서의 흡광도를 5분 동안 매 30초마다 블랭크로서 Tris-HCl 완충액에 대해 측정하였다(Unico 2100, Shanghai, China). — 소거 능력은 다음과 같이 계산되었습니다.
4.8. 산화 스트레스를 받은 bmMSC에 대한 세포 보호 효과(MTT 분석)
bmMSC는 약간 수정된 우리의 이전 보고서[38]에 따라 배양되었습니다. 간단히 말해서, 골수는 쥐의 대퇴골과 경골에서 얻었습니다. 골수 샘플을 10% FBS를 포함하는 DMEM(저 포도당)으로 희석했습니다. bmMSC는 1.073g/mL Percoll에서 30분 동안 900g에서 구배 원심분리에 의해 제조되었습니다. 준비된 세포를 0.25% 트립신 처리하여 분리하고 1 x 104/cm로 배양 플라스크에 통과시켰다.2. 계대 3의 bmMSC는 MTT 분석을 사용하여 CD44의 검출을 사용하여 배양된 세포 균질성에 대해 평가되었습니다[39].
MTT 분석은 bmMSC에 대한 acteoside 및 그 유도체의 세포 보호 효과를 평가하는 데 사용되었습니다[40]. 부상 모델은 선행 연구[41]를 기반으로 수립되었다. 실험 프로토콜은 그림 3에 간략하게 설명되어 있습니다.
4.9. 통계 분석
섹션 4.{1}}.4 및 4.7의 각 실험은 3회 수행되었으며 MTT 분석 실험은 5회 수행되었습니다. 데이터는 평균으로 기록되었습니다.土SD(표준편차). 용량-반응 곡선은 Origin 6.{2}} 전문 소프트웨어(OriginLab, Northampton, MA, USA)를 사용하여 플로팅되었습니다. IC5{8}} 값은 50% 라디칼 억제(상대 환원력)의 최종 농도로 정의되었습니다[42]. Windows용 SPSS 13.0(SPSS Inc., Chicago, IL, USA)을 사용하여 유의미한 차이를 탐지하기 위해 일원 ANOVA로 통계적 비교를 수행했습니다.p< 0.05는 통계적으로 유의한 것으로 간주되었습니다.
5. 결론
3개의 천연 페닐프로파노이드 배당체, 즉 악테오사이드, 포르시토사이드 B 및 포디움 사이드는 ET, H 플러스 -전달을 포함하여 항산화 작용을 발휘하는 여러 경로에 관여할 수 있습니다. 및 철2 플러스-킬레이트화, 그러나 RAF는 아닙니다. 동부 표준시와 H...을 더한-전달 경로는 람노실 모이어티 또는 아피오실 모이어티에 의해 방해받을 수 있습니다. 그러나, Fe2 플러스-킬레이트화 경로는 당 잔기(특히 람노실 부분)에 의해 향상될 수 있습니다. 람노실 모이어티 또는 아피오실 모이어티의 일반적인 효과는 다중 경로 관련 ROS 소거 능력을 향상시키는 것입니다. 따라서, forsythoside B와 poliumoside는 세포 보호 효과에서 acteoside보다 우수합니다.
보충 자료:보충 자료는 온라인에서 사용할 수 있습니다. 1. 용량-반응 곡선; 2. HPLC-MS 스펙트럼; 3. acteoside, forsythoside B 및 poliumoside의 분석 증명서.
감사의 말:이 작업은 중국 국가 과학 재단(81573558, 81603269), 광동 과학 기술 프로젝트(2017A050506043) 및 광동성 자연 과학 재단(2 017A030312009, 2015A030310491)의 지원을 받았습니다.
저자 기여:Xian Li와 Dongfeng Chen은 실험을 구상하고 설계했습니다. Aichi Wu는 폴리우모사이드를 준비했습니다. Yulu Xie, Qian Guo 및 Penghui Xue는 항산화 실험을 수행했습니다. Ke Li와 Wei Zhao는 MTT 실험을 수행했습니다. Hong Xie는 데이터를 분석했습니다. Jiasong Guo는 그림 2D에서 실험을 수행했습니다. Xian Li가 논문을 작성했습니다. 모든 저자는 최종 원고를 읽고 승인했습니다.
이해 상충:저자는 이해 상충을 선언하지 않습니다.
악티오사이드안에시스탄체
약어
ABTS 플러스 • 2,2'-아지노-비스(3-에틸벤조-티아졸린-6-설폰산) 라디칼
bmMSCs 골수유래 중간엽 줄기세포
항산화 능력을 감소시키는 CUPRAC 제2구리
dAMP 2'-데옥시아데노신-5'-모노포스페이트 라디칼
DMEM Dulbecco의 변형된 Eagle 배지
dGMP 2/-데옥시구아노신-5'-모노포스페이트 라디칼
DPPHe 1,{1}}디페닐{2}}피크릴-히드라진 라디칼
ET 전자 전달; FBS: 태아 소 혈청
FRAP 제2철 이온 환원 항산화력;
HAT 수소 원자 이동
MTT 3-(4,5-디메틸티아졸-2-일)-2,5-디페닐
PCET 양성자 결합 전자 전달
PTIOe 2-페닐{1}},4,5,5-테트라메틸이미다졸린-1-옥실 3-옥사이드 라디칼
RAF 라디칼 부가물 형성
ROS 활성산소종
SCNT 체세포 핵 이식
SEPT 순차 전자-양성자 이동
SPLET 순차 양성자 손실 단일 전자 전달
TPTZ 2,4,6-트리피리딜 트리아진
트롤록스(±)-6-히드록실-2,5,7,8-테트라메틸크로만-2-카르복실산
참고문헌
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