RNA M6 A 리더 YTHDF2는 NK 세포의 항종양 및 항바이러스 면역을 제어합니다 5부
Feb 22, 2024
NK 세포는 종양 세포와 바이러스 감염 세포를 파괴하기 위해 두 가지 주요 접근법을 사용합니다. (1) 표적 세포 사멸 또는 파이롭토시스를 직접 유도하는 아스퍼포린 및 그랜자임과 같은 세포독성 분자의 방출(Zhou et al., 2020) 및 (2) 여러 가지의 분비 다른 선천성 및 적응성 면역 기능을 향상시키는 사이토카인(예: IFN-, TNF- 및 GM-CSF) 및 케모카인(MIP-1, MIP-1, IL-8 및 RANTES) 세포(Fauriatet al., 2010; Reiter, 1993).
종양세포는 인체 내에서 걷잡을 수 없이 증식, 확산되어 우리 몸에 큰 해를 끼치는 비정상적인 세포입니다. 종양을 치료하기 위해 많은 사람들은 화학요법, 방사선요법 및 기타 치료를 받기로 선택합니다. 이러한 치료법은 종양 세포를 어느 정도 파괴할 수 있지만, 기억력에 영향을 미치는 등 건강에 특정 손상을 주기도 합니다.
화학요법은 현재 암세포를 치료하는 가장 중요한 방법 중 하나입니다. 암세포를 죽이고 암세포의 성장과 확산을 방지하기 위해 특수 약물을 사용합니다. 그러나 이러한 약물은 특히 뇌의 일부 정상 세포도 손상시킬 수 있으므로 일부 사람들은 화학 요법을 받는 동안 기억력이 크게 저하될 수 있습니다.
그러나 이러한 이유로 치료를 포기해서는 안 됩니다. 과학과 기술의 발전으로 우리는 표적치료, 면역치료 등 많은 새로운 치료법을 접하게 되었습니다. 이러한 치료법은 화학요법으로 인해 우리 몸이 받는 손상을 줄일 수 있을 뿐만 아니라 종양 세포를 효과적으로 죽일 수 있습니다.
게다가, 우리는 기억을 보호하기 위해 몇 가지 조치를 취할 수도 있습니다. 예를 들어, 책을 잘 읽고, 외국어를 배우고, 두뇌 게임을 하는 등 두뇌 운동을 하면 기억력을 높일 수 있습니다. 또한, 잘 먹고 잘 자면 좋은 기억력을 유지하는 데에도 도움이 됩니다.
요컨대 종양세포와 기억 사이에는 일정한 관계가 있지만, 이 때문에 쉽게 치료를 포기해서는 안 된다. 우리는 신체 건강과 기억력을 보호하기 위해 적극적인 조치를 취해야 하며, 기술의 발전이 더 나은 치료를 가져올 수 있다고 믿어야 합니다. 종양세포와 싸워 우리의 건강과 밝은 미래를 지켜냅시다! 기억력 향상이 필요하다는 것을 알 수 있는데, 시스탄체 데저티콜라에는 항산화, 항염증, 항노화 효과가 있어 뇌의 산화 및 염증 반응을 감소시켜 뇌를 보호할 수 있기 때문에 기억력을 크게 향상시킬 수 있습니다. 신경계의 건강. 또한 Cistanche Deserticola는 신경 세포의 성장과 복구를 촉진하여 신경 네트워크의 연결성과 기능을 향상시킬 수 있습니다. 이러한 효과는 기억력, 학습 및 사고 속도를 향상시키는 데 도움이 될 수 있으며 인지 기능 장애 및 신경퇴행성 질환의 발병을 예방할 수도 있습니다.
본 연구에서 우리는 YTHDF2가 NK 세포의 항종양 및 항바이러스 면역을 조절하는 동일하지 않은 메커니즘을 관찰했습니다. 종양 환경에서 YTHDF2는 흑색종 전이를 조절하기 위해 NK 세포에 의한 퍼포린, 그랜자임 B 및 IFN-의 분비를 촉진하는 반면, MCMV 감염 동안 YTHDF2는 주로 퍼포린 조절을 통해 MCMV에 대한 NK 세포 매개 항바이러스 활동을 촉진합니다.
이러한 불일치에 대한 한 가지 잠재적인 설명은 종양이나 바이러스에 의한 NK 세포 활성화가 다른 방식으로 조절된다는 것입니다.
MCMV는 NK 세포 수용체 Ly49H의 리간드인 단백질 m157을 코딩하여 NK 세포를 활성화하고(Smith et al., 2002), 두 개의 세포내 어댑터인 DAP10 및 DAP12와 결합합니다(French et al., 2006; Orr et al., 2009). 그러나 종양과 관련하여 NK 세포 활성화는 종양 미세환경에서 종양 세포뿐만 아니라 IL{7}} 및 TGF-와 같은 사이토카인에 의해 발현되는 다양한 NK세포 수용체 리간드와의 상호작용에 의해 엄격하게 조절됩니다(Wu et al. al., 2020b).
또한, 우리는 YTHDF2가 Eomes를 조절하여 NK 세포 성숙을 촉진한다는 것을 발견했습니다. 그러나 Eomes mRNA에서는 결합 부위가 발견되지 않았는데, 이는 YTHDF2가 Eomes 발현을 간접적으로 조절한다는 것을 의미합니다. YTHDF2가 Eomes 발현을 조절하는 메커니즘을 조사하기 위해서는 추가 연구가 필요합니다.
또한 YTHDF2가 어떻게 바이러스나 종양 세포에 대한 NK 세포 면역 반응을 신속하게 형성할 수 있는 신호를 수신하고 중재하는지에 대해서도 추가 조사가 필요합니다. 동종 NK 세포를 백혈병 환자에게 입양하면 완화될 수 있습니다(Ruggeri et al., 2002).
CAR 조작된 NK 세포는 재발성 또는 불응성 CD{0}} 림프종 및 백혈병에 상당한 이점을 제공하는 것으로 나타났습니다(Liu et al., 2020). 그러나 생체 내에서 NK 세포의 제한된 확장 및 지속성과 제한된 NK 세포 이동 및 종양 부위로의 침윤은 NK 세포 기반 치료법의 주요 과제로 남아 있습니다(Yilmaz et al., 2020).
암 환자 또는 코로나19 환자와 같이 바이러스에 감염된 환자는 일반적으로 일시적인 림프구 감소증을 겪기 때문에(Grossman et al., 2015; Zhaoet al., 2020), 림프구 감소증 동안 NK 세포의 효율적인 확장은 종양 성장을 조절하고 바이러스 감염.
우리 연구 결과는 YTHDF2가 BM에서 NK 세포 유출을 유도하고 T, B 및 NK 세포가 결핍된 생쥐의 생체 내 림프구 감소증 동안 NK 세포 항상성 증식을 촉진한다는 것을 보여줍니다. 우리의 연구는 또한 YTHDF2가 NK 세포 이펙터 기능을 긍정적으로 조절한다는 것을 보여줍니다.
따라서 YTHDF2 발현을 NK 또는 CAR-NK 세포에 통합하면 시험관 내에서 제조하는 동안 NK 세포 확장, 지속성 및 생체 내 이펙터 기능 향상에 대한 다각적인 이점을 가질 수 있습니다. 또한, 종양 설정 및 바이러스 감염 중에 관찰된 YTHDF2의 상향 조절은 NK 또는 CAR-NK 세포가 질병 미세 환경에 침투하는 능력을 증가시킬 수 있습니다.
IL-15은 NK 세포 발달, 항상성, 생존 및 효과기 기능의 핵심 조절자입니다(Becknell and Caligiuri, 2005; Mishra et al., 2014; Yu et al., 2013). 우리 그룹은 이전에 인간 NK 세포의 효과기 기능과 생존에 기여하는 새로운 IL{4}}-AKT-XBP1s 신호 전달 경로를 보고했습니다(Wang et al., 2019b). 그러나 IL-15이 NK 세포 생존을 조절하는 정확한 메커니즘은 아직 완전히 이해되지 않았습니다.
여기에서 우리는 STAT5-YTHDF2가 IL-15 마우스 내 NK 세포의 하류에서 양성 피드백 루프를 형성하여 결과적으로 NK 세포 증식, 생존 및 효과기 기능을 제어한다는 또 다른 새로운 메커니즘을 발견했습니다. 이전 보고서에 따르면 IL{3}}은 XBP1의 전사를 유도하지 않으며 XBP1은 NK 세포에서 STAT5와 상호작용하지 않으며(Wang et al., 2019b), 이는 IL-15에 의한 XBP1 조절이 STAT5와 무관함을 시사합니다. .
따라서 우리는 NKcell, XBP1 및 YTHDF2에서 IL{0}}의 두 가지 새로운 매개체를 확인했습니다. 이 매개체에 대한 XBP1은 STAT5에 의해 규제되지 않지만 YTHDF2는 STAT5에 종속됩니다. 이러한 특성화된 IL-15 신호 전달의 복잡성은 종양 미세 환경의 염증 환경과 바이러스 감염에 대한 반응의 핵심 구성 요소인 IL-15의 복잡하고 다발성 역할과 일치할 수 있습니다(Nguyen et al., 2002; Santana Carreroet al., 2019).
복잡성은 또한 Ythdf2 결핍이 생체 내에서 휴식 중인 NK 세포의 생존 및 증식에 영향을 미치지 않는 반면, YTHDF2는 IL{2}} 또는 MCMV 감염에 의해 활성화된 NK 세포의 증식 및/또는 생존을 조절하는 데 중요한 역할을 한다는 점에서도 반영됩니다. .
우리의 연구는 또한 일반적으로 YTHDF2 또는 m6A 변형이 활성화된 상태 및/또는 질병 설정에서 NK 세포 역학에서 더 중심적인 역할을 한다는 개념을 뒷받침합니다.
본 연구에서는 NK세포에서 YTHDF2의 표적을 확인하기 위해 다중 오믹스 전략(RNA-seq, m6A-seq 및 RIP-seq)을 적용했습니다.
Ythdf2-결핍 NK 세포가 세포 성장을 상당히 지연시킨다는 연구 결과에 맞춰, 우리는 Ythdf2ΔNK NK 세포에서 세포 주기 및 세포 분열과 관련된 많은 유전자가 현저히 감소한 것을 발견했습니다. 이는 YTHDF2가 세포 주기를 조절하여 세포 성장을 조절한다는 것을 시사합니다. . 주목할 만한 점은 m6A 변형이 세포 주기 조절에 널리 관여해 왔다는 것입니다.
METTL3은 세포 주기 경로에서 유전자 번역을 강화하여 급성 골수성 백혈병에서 세포 성장을 촉진합니다(Barbieri et al., 2017; Vu et al., 2017). METTL14 결실은 방사상 교세포의 S에서 M으로의 상전이를 연장함으로써 피질 신경발생을 출생 후 단계로 확장합니다(Yoonet al., 2017).
우리 연구와 일치하게, inHeLa 세포, YTHDF2는 분자 기능뿐만 아니라 세포 증식 및 생존에도 관여하는 경로를 표적으로 삼는 것으로 보고되었습니다(Wanget al., 2014).
Feiet al. (2020)은 최근 YTHDF2가 HeLa 세포의 세포 주기 동안 mRNA 분해를 촉진함으로써 세포 증식을 촉진한다고 보고했는데, 이는 YTHDF2의 보편적 메커니즘 또는 세포 생존과 기능을 유지하는 데 관련된 m6A 변형을 암시합니다. 다중 오믹스 전략 분석에는 수백만 개의 세포가 필요하기 때문에 생체 외에서 확장되고 증식성이 높은 NK 세포에 의존해야 했습니다.
이는 YTHDF2의 스크리닝된 표적이 주로 세포 주기 유전자인 반면, 세포 생존, 효과기 기능 및 NK 세포의 성숙을 제어하는 잠재적인 표적은 나타나지 않았다는 관찰을 설명할 수 있습니다. 그럼에도 불구하고, 우리는 우리의 데이터가 YTHDF2 표적이 면역 세포, 특히 NK 세포의 세포 주기 및 세포 분열 과정에 기여한다는 첫 번째 증거를 제공한다고 믿습니다.
결론적으로, 우리는 NK 세포 항종양 및 항바이러스 활성뿐만 아니라 NK 세포 항상성 및 성숙의 양성 조절자로서 이전에 알려지지 않은 YTHDF2 또는 m6A 메틸화의 역할을 발견했습니다. 이러한 발견은 NKcell이 m6A mRNA 메틸화를 통해 종양 전이 및 바이러스 감염에 대해 어떻게 효과적으로 조사하는지에 대한 통찰력을 제공합니다. 재료 및 방법MiceYthdf2fl/fl 마우스는 J. Chen의 실험실에서 생성되었습니다.
간단히 말하면, 기증자 구성은 마우스 배아 줄기 세포에서 전기 천공(상동 재조합) 시 특정 표적 유전자의 조건적 돌연변이를 생성하도록 설계되었습니다. 표적화 카세트(En2SA-IRES-LacZ-pA-hBactP-Neo-pA)는 플립파제 재조합 효소(Flp) 인식 표적 재조합 부위 옆에 위치하여 Flp 재조합효소로 표적화 카세트를 제거할 수 있습니다.
한 쌍의 loxP는 Ythdf2의 네 번째 엑손 주변에도 도입되는데, 이는 Cre 재조합효소에 의해 Ythdf2의 네 번째 엑손의 조건부 삭제에 사용됩니다. floxed 대립유전자(Ythdf2fl/fl)를 가진 마우스는 F1 자손 마우스를 ROSA26-FlpE 마우스(재고 번호 003946, TheJackson Laboratory)와 교배하여 생성되었습니다. Ythdf2fl/fl 마우스는 실험에 사용되기 전에 적어도 10세대 동안 C57BL/6과 교배되었습니다.
Ncr1-iCre 마우스는 Eric Vivier(프랑스 마르세유 소재 Centre d'Immunologie de Marseille-Luminy; NarniMancinelli et al., 2011)로부터 선물이었습니다. Rag2-/-Il2rg-/- 마우스는 City of Hope의 동물 시설에서 제공되었습니다. NCI B6-Ly5.1/Cr 마우스(CD45.1 마우스)는 Charles River Laboratories에서 구입했습니다. IL{10}}Tgmice는 우리 그룹에 의해 생성되었으며 C57BL/6 배경과 역교배되었습니다(Fehniger et al., 2001). Stat5fl/fl 마우스는 원래 John J. O'Shea(국립 관절염 및 근골격계 및 피부 질환 연구소, Bethesda, MD; Cui et al., 2004) 출신이었습니다.
Stat5fl/fl Ncr1-iCre mice were generated in the laboratory of J.C. Sun (Wiedemann et al., 2020). All mice were on a C57BL/6 background for >10세대. 실험에는 6~12-주령의 수컷 및 암컷 쥐가 사용되었습니다. Cre 음성 한배새끼는 WTcontrol로 사용되었습니다. 모든 동물 실험은 City of Hope 기관 동물 관리 및 사용 위원회의 승인을 받았습니다.
For more information:1950477648nn@gmail.com
