Dolicandrone Serrulata 꽃(DSF) 추출물의 신장 및 간 기능에 대한 독성 평가
Mar 17, 2022
자세한 정보:ali.ma@wecistanche.com
Dolicandrone serrulata 꽃 추출물의 성체 수컷 쥐의 생명 및 생식 기관에 대한 독성 평가
C. Chaimontria 및 S. Iamsaard
추상적인
하지만돌리칸드론 세룰라타 꽃(DSF) 수성 추출물은 약리학적 특성을 갖는 것으로 나타났으며, 전신 독성은 아직 평가해야 합니다. 본 연구는 DSF의 아만성 독성 효과를 조사하는 것을 목적으로 합니다. (돌리칸드론 세룰라타 꽃)생화학적 매개변수 및 조직학적 구조에 대한 추출물간, 신장, 고환. 및 부고환 플러스 정관. 성인 수컷 쥐에게 DSF를 투여했습니다(돌리칸드론 세룰라타 꽃) 연속 48일 동안 경구 위관 영양법을 통해 100,300 및 600 mg/kg BW에서 대조군에 증류수를 제공했습니다. 실험이 끝나면 피.간, 신장, 고환, 부고환 및 정관 샘플을 수집하여 ALT, ALP 및 크레아티닌 수준 및 조직학적 구조를 포함한 혈청 생화학적 성분의 변화를 확인했습니다. 결과는 대조군과 DSF 사이에 체중과 음식 또는 물 섭취량에 유의한 차이가 없음을 보여주었습니다. (돌리칸드론 세룰라타 꽃)- 치료 그룹. DSF가 발견되었다. (돌리칸드론 세룰라타 꽃)부고환과 정관의 무게를 크게 증가시키는 반면,신장그리고간고용량 그룹(P walue< 0.05).="" histological="" changes="" in="" these="" vital="" and="" reproductive="" tissues="" including="" fibrosis="" were="" not="" observed="" after="" administration="" but="" alt,="" alp,="" and="" creatinine="" levels="" were="" significantly="" altered="" in="" the="" treated="" groups(pwlue="" <="" 0.051.="" these="" altered="" levels.="" however,="" were="" still="" within="" normal="" ranges="" in="" conclusion,="" these="" findings="" demonstrated="" that="" d.serulata="" flower="" extract="" had="" no="" sub-chronic="" toxicity="" on="" vital="" and="" reproductive="" structures="" but="" slightly="" altered="" some="">간 및 신장 기능.
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키워드:돌리칸드론세룰라타, 간, 신장, 고환, 부고환.
1. 소개
질병 치료에 약초를 사용하는 것은 오랜 전통입니다. 식물의 잠재적인 의약 특성은 화합물의 유형과 양에 따라 다릅니다. 개별 약용 식물의 각 부분에는 다른 화합물이 있는 것으로 알려져 있습니다. 또한, 물질의 종류와 양은 허브의 종, 재배환경, 수확시기 등의 요인에 따라 달라질 수 있다(Sringeunyuan and Hongwiset, 1990). 현재 태국 정부는 식물 제품이 대부분 무독성이라는 점을 감안할 때 현대 건강 관리에 대한 의학적 대안으로 간주되는 약용 식물 및 허브의 사용을 장려하고 있습니다(Sringeunyuan and Hongwiset., 1990). 또한 한방 치료는 태국 전통 의학에 대한 현지 지식에서 비롯됩니다. 카에나 또는돌리칸드론 세룰라타(또는D.serrulata 꽃(DSF))는 전통적으로 많은 약리학적 특성이 있다고 믿어져 온 고대 약용 식물입니다(Sriprasert, 2016). 이 식물의 대부분의 부분(꽃, 꼬투리, 껍질 및 뿌리)은 유용하며 수많은 약리학적 특성으로 인해 소비됩니다(Sriprasert, 2016; Kiratipaiboon et al., 2012). 현재 연구에서 DSF의 보호 효과가 밝혀졌습니다. (돌리칸드론 세룰라타 꽃)당뇨병 쥐의 생식 손상 방지(Yannasithinon et al.,2021). DSF의 메탄올 추출물에 대한 생물학적 연구 (돌리칸드론 세룰라타 꽃)유망한 항산화 활성을 입증했습니다(Phanthong et al., 2015). DSF가 발견되었다. (돌리칸드론 세룰라타 꽃)추출물에는 Hallerone, protocatechuic acid, rengyolone, cleroindicin B, inside 및 isomaltose를 포함한 6가지 화합물이 포함되어 있습니다(Phanthong et al, 2015). 또한, 이전 연구에서는 DSF의 식물화학적 프로파일과 생물학적 활성을 평가했습니다. (돌리칸드론 세룰라타 꽃)에탄올 추출물(Sriprasert, 2016). 이 식물의 에탄올 추출물에 대한 식물화학적 연구는 플라보노이드, 쿠마린, 사포닌, 탄닌, 테르페노이드, 스테로이드 및 심장 배당체와 같은 2차 대사산물을 밝혀냈습니다(Sriprasert, 2016). 최근 DSF의 수성 추출물 (돌리칸드론 세룰라타 꽃)항산화 능력과 rengyolone 및 cleroindicin B와 같은 모노테르페노이드가 있는 것으로 보고되었습니다(Chaimontriet al., 2021). 그러나 이 D. serrulata와 관련된 일부 식물은 필수 및 생식 기관에 독성이 있는 것으로 나타났습니다. 예를 들어 급성 독성 연구에서 에탄올로 추출한 P.alliaceum 물 추출물은 백혈구 능력을 감소시켰습니다(Granados-Echegoyenet al., 2015). 이전에 Aba와 Amadi(2019)는 A. carambola 과일 추출물이 간 및 신장 조직을 손상시킬 수 있다고 보고했습니다. 또한, 태양 인삼은 ALT, ALP 및 크레아티닌 수치를 포함한 혈청 매개변수를 변경할 수 있음이 밝혀졌습니다.간 및 신장 기능 장애(Kim et al. 2013). 또한 Azu et al. (2010)은 고용량의 K. Africana 과일 추출물이 정자 형성을 억제할 수 있다고 보고했습니다. 최근 식물 제품을 장기간 지속적으로 섭취하면 생명 및 생식 기관에 손상을 줄 수 있다는 점에 주목했습니다(Kiratipaiboon et al, 2012; Freitas et al, 2013; Joshi et al, 2011; Karnati et al, 2013; Lee et al, 2012). 비록 DSF (돌리칸드론 세룰라타 꽃)오랫동안 소비되어 왔으며, 수성 추출물의 독성 효과간, 신장, 고환 및 부고환은 아직 평가되지 않았습니다. 이 질문에 대한 이해를 높이기 위해 본 연구에서는 DSF의 아만성 독성을 조사하고자 했습니다. (돌리칸드론 세룰라타 꽃)장기간에 걸쳐 이 물질을 안전하게 섭취할 가능성을 결정하기 위해 생명 및 생식 기관에 대한 추출물.
돌리칸드론 세룰라타 꽃(DSF)
2. 재료 및 방법
2.1.동물
40마리의 성체 수컷 Sprague-Dawley 쥐(120-150g)를 태국 방콕의 Nomura Siam International에서 구입했습니다. 동물은 실험실 조건(12시간 명암 주기, 온도 23±2도, 습도 40-60%, 소리)에서 스테인레스 스틸 케이지에 보관되었습니다.<85 decibels,="" and="" light="" intensity="" approximately="" 350-400="" lux)in="" the="" northeast="" laboratory="" animal="" center,="" khon="" kaen="" university,="" thailand.="" this="" experimental="" study="" was="" approved="" by="" the="" animal="" ethics="" committee="" research="" of="" northeast="" laboratory="" animal="" center="" khon="" kaen="" university.="" the="" code="" of="" this="" animal="" ethic="" is="">
2.2. D.serrulata 꽃의 수집 및 준비
신선한 Khae Na의 식물 표본은 태국 Khon Kaen 지방 Mueang 지역 Ban Thum Subdistrict에서 수집되었으며 Assist에서 인증했습니다. Pimwadee Pornpongrungrueng 교수, Khon Kaen University 이학부 생물학과(D.serrulata의 바우처 샘플, KKU 식물 표본관에 보관된 S.lamsaard02).추출 시 건조된 DSF (돌리칸드론 세룰라타 꽃)물에 담그기 전에 작은 조각으로 썰어 90-95도의 증류수에 40분 동안 끓였습니다. 수성 DSF (돌리칸드론 세룰라타 꽃)추출물을 동결건조기(M-00359-1/57,13-1011-18-2019, Labconco, Becthai Scientific Industry, Thailand)를 사용하여 동결건조했습니다. 조DSFextract의 백분율 수율은 40.78%였습니다. 이 추출물은 이전에 추출 세부 정보(Chaimontri et al., 2021; Yannasithinon et al, 2021)에 설명된 대로 Dr.
2.3. 실험적 설계
7일 동안 순응시킨 후, 수컷 랫트를 대조군, DSF를 포함하여 무작위로 4개 그룹(그룹당 10마리)으로 나누었다. (돌리칸드론 세룰라타 꽃)100, DSF (돌리칸드론 세룰라타 꽃)300, DSF (돌리칸드론 세룰라타 꽃)각각 600개 그룹. DSF (돌리칸드론 세룰라타 꽃) 추출물 복용량은 DSF의 최대 소비량을 기준으로 계산되었습니다. (돌리칸드론 세룰라타 꽃)평균 체중이 60kg인 사람의 경우. 간단히 말해서, 600mg/Kg BW 용량은 40송이/일/사람의 소비 능력으로부터 계산되었습니다. 중간 용량(300mg)과 최저 용량(100mg)의 비례 비율은 600mg에서 계산되었습니다. DSF의 경우 (돌리칸드론 세룰라타 꽃)처리 그룹, 쥐는 DSF로 처리되었습니다 (돌리칸드론 세룰라타 꽃)-추출물을 각각 100, 300 및 600 mg/kg BW의 용량으로 증류수(DW)에 녹인 경구 위관영양법을 통해. 대조군의 동물에게는 DW만 제공되었습니다. 그들의 체중은 연속 48일 동안 투여하는 동안 매일 기록되었습니다.
2.4. 생화학적 분석
실험 종료 시 경추 탈구에 의한 안락사 전에 모든 쥐를 thiopental sodium(60 mg/kg BW via ip)으로 마취시켰다. 흉벽을 연 후, 심장 천자로 혈액을 채취하고 4도에서 12,{2}} r/min의 속도로 10분간 원심분리하여 미세원심분리기(Microfuge 22R Centrifuge, Beckman Coulter TM, USA)를 사용하여 혈구를 분리하였다. 혈청에서. 혈청은 혈액 요소 질소(BUN) 및 크레아티닌 측정을 위해 태국 콘캔 대학교 의과대학 스리나가린드 병원 면역학 부서로 즉시 보내졌습니다.신장기능) 및 알부민, 아스파르테이트 아미노트랜스퍼라제(AST), 알라닌 아미노트랜스퍼라제(ALT) 및 알칼리성 포스파타제(ALP)(간 기능용). 생화학적 수준은 Cobas 및 면역 분석기(Roche Diagnostics, Mannheim, Germany)와 함께 전기화학발광 면역분석(Roche Diagnostics)을 사용하여 결정되었습니다.
2.5. 중요한 장기의 조직학적 연구
채혈 후,간, 신장, 고환과 부고환을 포함한 생식 기관을 신속하게 채취하여 무게를 쟀습니다. 모든 조직은 10% 포르말린 고정액으로 72시간 동안 고정하였다. 그런 다음 일상적인 파라핀 절편으로 처리하고 Masson의 삼색 염료로 염색하여 콜라겐 섬유 발달을 조사했습니다. 간단히 말해서, 조직 절편을 자일렌으로 탈파라핀화하고 연속적인 내림차순 알코올로 재수화했습니다. 그런 다음, 섹션을 Bouin's 용액에 담그고 Weigert's iron hematoxylin으로 염색하였다. 이어서 Masson's trichrome 염색 키트(Catalogue no. HT15, Sigma-Aldrich, Inc, USA)를 이용하여 절편을 염색하였다. 마지막으로 섹션을 1% 아세트산으로 세척했습니다. DXM1200 디지털 카메라가 장착된 니콘 라이트 ECLIPSE E200 현미경으로 주요 장기와 생식기의 조직학적 변화를 관찰하고 촬영했습니다.
2.6. 통계 분석
모든 데이터는 평균±표준편차(SD)로 표현하였다. 4개 그룹 간의 차이를 비교하기 위해 정규분포 데이터에 대해서는 사후 다중비교를 사용하였고, 데이터의 차이는 프로그램 SPSS 통계 19를 사용하는 One Way ANOVA를 사용하여 수행하였다.0.2software(statistical package for The Social Sciences, version 19.0.2, SPSS Inc, Armonk, New York, USA KKUSoftware Center, Khon Kaen University에서 설치) 데이터 분석. SPSS 프로그램을 사용하여 그룹 간의 유의한 차이를 조사했습니다. p-값<0.05 was="" considered="" a="" significant="">
3. 결과
3.1. D.serrulata 꽃 추출물이 체중, 생명 및 생식 기관에 미치는 영향
평균 체격은 변화하였으며 대조군과 처리군의 고환 무게는 유의한 차이를 나타내지 않았다. 대조적으로, DSF에서 부고환과 정관의 무게는 (돌리칸드론 세룰라타 꽃)600 처리군은 대조군에 비해 유의하게 증가하였다. 모든 동물의 물 섭취량과 음식 섭취량은 유의한 변화를 보이지 않았습니다(표 1). 흥미롭게도 상대 가중치는신장그리고 간DSF에서 (돌리칸드론 세룰라타 꽃)300 및 600 처리 동물은 대조군과 비교할 때 유의하게 감소했습니다(P < 0.05).
표 1. 대조군과 DSF 간의 체중, 고환, 부고환 + 정관, 신장 및 간 장기 중량의 비교 (돌리칸드론 세룰라타 꽃)-아만성 독성 연구 48일 후 쥐를 처리했습니다.
3.2. 생화학적 매개변수에 대한 D.serrulata 꽃 추출물의 효과
혈청 분석 후, 간 기능을 나타내는 생화학적 매개변수는 DSF가 (돌리칸드론 세룰라타 꽃)대조군에 비해 알라닌 아미노전이효소(ALT) 및 알칼리성 인산분해효소(ALP) 수치가 유의하게 감소했습니다(P<0.05, table="" 2).="" by="" contrast,="" creatinine="" levels="" which="">신장 기능, DSF의 (돌리칸드론 세룰라타 꽃)100 및 DSF (돌리칸드론 세룰라타 꽃)300군은 대조군에 비해 유의하게 증가하였다(P<0.05, table="" 2).="" interestingly,="" no="" difference="" in="" renal="" function="" was="" indicated="" by="" aspartate="" aminotransferase="" (ast),="" albumin,="" and="" blood="" urea="" nitrogen(bun)levels="" in="" all=""> (돌리칸드론 세룰라타 꽃)처리된 그룹이 관찰되었습니다.
표 2. 아만성 독성 연구 48일 후 대조군과 처리된 쥐 사이의 혈청 내 생화학적 매개변수 수준 비교
3.3.쥐의 고환, 꼬리 부고환, 신장 및 간에서 콜라겐 섬유 발달에 대한 D.serrulata 꽃 추출물의 효과
고환의 조직 절편, 꼬리 부고환,신장, 그리고 간Masson's trichome으로 염색한 결과 그림 1-4에서 볼 수 있듯이 대조군과 처리군 간에 콜라겐 섬유 두께에 차이가 없었습니다. 대조적으로, 풍부한 콜라겐 섬유와 섬유아세포는 정소상피 아래의 기저층에서 발견되었다(그림 1의 파란색 화살표). 또한 꼬리 부고환은 관상 벽 및 세뇨관 공간과 함께 미세한 콜라겐 섬유를 보여줍니다(그림 2의 검은색 별 ). 신장에서 콜라겐 섬유는 신장 세뇨관의 기저막과 보우만 공간에 존재합니다(그림 3의 파란색 화살표). 더욱이, 모든 그룹의 간 조직은 간동맥, 문맥 및 담관을 포함하는 문맥 삼합체를 둘러싸고 있는 소량의 콜라겐 섬유를 보여주었다(그림 4의 파란색 화살표).
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그림 1. Masson의 통제 트리코메로 염색된 고환의 대표적인 조직학: (A), DSF100(B), DSF300(C) 및 DSF600(D) 그룹. 빨간색 화살표=콜라겐 섬유; SG=정자; RS=둥근 정자. | 그림 2. Masson의 제어 트리코메로 염색된 꼬리 부고환의 대표적인 조직학: (A), DSF100(B), DSF300(C) 및 DSF600(D) 그룹. 검은 별=콜라겐 섬유. |
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그림 3. Masson의 제어 트리코메로 염색된 신장의 대표적인 조직학: (A), DSF100(B), DSF300(C) 및 DSF600(D) 그룹. 파란색 화살표=콜라겐 섬유; RT=신세뇨관. | 그림 4. Masson의 제어 트리코메로 염색된 포털 트라이어드를 보여주는 간의 대표적인 조직학: (A), DSF100(B), DSF300(C) 및 DSF600(D) 그룹. 파란색 화살표=콜라겐 섬유. |
4. 토론
이 연구는 DSF가 (돌리칸드론 세룰라타 꽃)추출물은 영향을 미치지 않았습니다간, 신장, 및 48일 동안 투여 후 생식 기관 구조. 그러나 DSF (돌리칸드론 세룰라타 꽃)약간 변경간과 신장 기능, 그러나 그들의 혈청 수준은 여전히 표준 값과 일치하는 정상 범위 내에 있었습니다. 이 식물의 동일한 종의 고용량(500 mg/kg BW)은 정자 생산을 억제하는 것으로 보고되었습니다(Azuet al., 2010). 그러나 고용량의 DSF (돌리칸드론 세룰라타 꽃)(600 mg/kg BW) 생식 기관 무게 또는 조직학적 구조를 변경하지 않았습니다. 이 결과는 DSF 후 증가된 부고환 정자 농도와 질을 보여주는 이전 연구와 일치했습니다. (돌리칸드론 세룰라타 꽃)치료(Chaimontri et al., 2021). 또한 DSF는 1형 당뇨병 쥐에서 정자 수와 생리학, 고환 조직병리학을 개선했습니다(Yannasitinon et al., 2021). 우리의 결과와 함께 이러한 조사는 수성 DSF가 (돌리칸드론 세룰라타 꽃)추출물은 남성 생식 기관에 아만성 독성이 없습니다. 이것은 수성 DSF로 인해 설명될 수 있습니다. (돌리칸드론 세룰라타 꽃)항산화 활성을 나타내며 테르페노이드 성분을 포함한 총 페놀 함량을 포함합니다(Chaimontri et al., 2021). 실제로 문헌에서 에탄올 또는 메탄올로 추출한 D.serrulata의 많은 부분이 항산화 능력과 알칼로이드, 플라보노이드, 배당체, 페놀 화합물, 사포닌 및 탄닌과 같은 물질을 가지고 있는 것으로 나타났습니다(Chatchanayuenyong 및 Sujayanont, 2020; Khaing et al, 2018, Kiratipaiboon et al., 2012, Sinaphet et al, 2006, Sittiwet, 2009). DSF의 이러한 항산화 능력 (돌리칸드론 세룰라타 꽃)2형 DM 처리 쥐의 테스토스테론 수치가 증가하면 높은 공복혈당(FBG) 수치와 고환 말론디알데히드(MDA) 수치가 감소할 수 있습니다(Yannasithinon et al., 2021).
이전 연구에서는 당뇨병 고환의 콜라겐 섬유 침착물(Ismail et al.2017), 고혈압 부고환(Mazen and Zidan, 2017), 간 성상 세포 분포(Nishimura et al, 2012; Towne)에 대한 식물 추출물을 포함한 많은 물질의 독성을 보고했습니다. et al., 2015), 그리고만성 신장 질환환자(Allon et al, 2019). 이 최근 연구에서 입증된 바와 같이 Masson's trichrome으로 염색된 고환, 꼬리 부고환, 간 및 신장 조직에 존재하는 콜라겐 섬유의 강도는 대조군과 DSF 간에 차이를 보이지 않습니다. (돌리칸드론 세룰라타 꽃)치료 그룹. 이러한 결과는 DSF가 (돌리칸드론 세룰라타 꽃)추출물은 생체 및 생식 조직에서 축적된 콜라겐 섬유인 조직병리학적 섬유증을 유발하지 않았습니다. 이러한 결과는 DSF 섭취가 (돌리칸드론 세룰라타 꽃)아만성 기간 동안 추출물은 생식 기관이나 중요한 기관에서 섬유증을 일으키지 않았습니다. DSF 중 보우만낭의 두께가 (돌리칸드론 세룰라타 꽃) 처리군은 대조군과 비교하여 뚜렷한 변화를 보이지 않았다. 또한, 이들 기관의 무게는 그룹 간에 유의한 차이가 없었으며, 이는 급성 독성 기간 동안 치료된 마우스를 관찰한 이전 연구와 일치했습니다(Katisart and Konsue, 2019).
간과 신장미세 구조는 DSF 후 명백한 변경을 나타내지 않았습니다. (돌리칸드론 세룰라타 꽃)모든 용량의 투여. 그러나 ALT와 ATP 수치의 감소로 인해 기능이 약간 바뀌었고 크레아티닌 수치는 크게 증가했습니다. 이러한 기능적 변화는 DSF에서 발견되는 사포닌의 활성으로 설명될 수 있습니다. (돌리칸드론 세룰라타 꽃)이전 연구(Kiratipaiboon et al. 2012)에서 설명한 대로 조 추출물. 이 기전은 사포닌 함량이 간과 관련된 혈청 매개변수의 변화를 초래하는 태양 인삼 치료에서 관찰되는 것과 유사할 수 있습니다.신장기능ALT, ALP, 크레아티닌 수치와 같은 수치(Kim et al.2013). 그러나 이러한 생리학적 변화는 간과 간을 심하게 손상시키기에는 충분하지 않았습니다.신장구조. 표 2와 같이; DSF의 혈청 내 생화학적 매개변수 (돌리칸드론 세룰라타 꽃)처리군은 대조군과 비교하여 변경되었지만, 그 수준은 여전히 ALT[{0}}U/L], ALP 62-230 U/L] 및 크레아티닌을 포함한 정상 범위 내에 있었습니다. [0.2-0.5 mg/dl(이전에 동물 모델에서 보고됨)(Hayakawa et al., 2013; Pereira et al., 2017). 연구 한계로 DSF의 기타 독성 물질 (돌리칸드론 세룰라타 꽃)조직의 세포 사멸 마커는 장기간 사용 및 소비에 대한 안전성을 결정하기 위해 추가 조사가 필요합니다.
5. 결론
이 연구는 수성 DSF가 (돌리칸드론 세룰라타 꽃)꽃 추출물은 중요한 기관과 남성의 생식 조직에 독성이 없었지만,간과신장기능.
6. 향후 전망
이 기사의 결과를 바탕으로 DSF의 안전성은 (돌리칸드론 세룰라타 꽃)신장 및 간 미세 구조에 대한 장기간의 소비가 입증되었습니다. 특히, DSF (돌리칸드론 세룰라타 꽃)추출물은 고환과 부고환에 독성이 없는 것으로 나타났습니다. 바라건대, DSF (돌리칸드론 세룰라타 꽃)추출물은 남성 생식 건강을 위한 건강 보조 식품으로 더 개발될 수 있습니다.
참고문헌
ABA, PE 및 AMADI, AU,2019. 암컷 흰둥이 쥐에서 Averrhoa carambola 주스 추출물의 간독성 및 신독성 가능성 평가.Journal of Basic and Clinical Physiology and Pharmacology,vol.31,no.1.https:// doi.org/10.1515jbcpp-2019-0042.PMid:31536032.
ALLON,M.,LITOVSKY,SH,TEYJ,SUNDBERG,CA.,ZHANG,Y,CHEN,Z.,FANG,Y.,CHEUNG,AK.및 SHIU,YT,2019.혈관 조직학 및 콜라겐 섬유 구성의 이상 진행된 환자만성 신장 질환.The Journal of Vascular Access, vol. 20, 1번, pp.31-40.http://dx. 도이. org/10.1177/1129729818773305.PMid:29742957.
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