Cistanche Deserticola의 효과적인 성분인 Echinacoside가 췌장 선암종 세포 성장을 일으키는 방식은 무엇입니까?

연락하다:joanna.jia@wecistanche.com

Echinacoside는 mitogen-activated protein kinase pathway를 통해 apoptosis를 유도하여 췌장 선암종 세포 성장을 억제합니다.

WEI WANG, JINBIN LUO, YINGHUI LIANG 및 XINFENG LI

추상적인.

중국 전통 의학에서 파생된 천연물의 임상 적용은 암 화학 요법에서 주목을 받았습니다.에키나코사이드(ECH), 페닐에타노이드 중 하나, 줄기에서 분리시스탄체살사(중국 약초)는 중추 신경계에 조직 보호 및 항세포사멸 효과가 있습니다. 그러나 여부는 여전히 불확실하다.에키나코사이드 종양 억제 활성을 가지고 있습니다. 본 연구에서는에키나코사이드활성산소의 생성과 미토콘드리아 막 전위의 교란을 유도하여세포자멸사. 게다가 밝혀졌다.에키나코사이드MAPK 활성 조절을 통해 종양 세포 성장을 억제합니다. 결론적으로, 이 연구는 암 발병을 예방하는 ECH의 새로운 기능을 밝히고,에키나코사이드 암에 대한 잠재적인 화학요법 전략이 될 수 있습니다.

감소하는 cistanche의 Echinacoside췌장 선암 세포 성장

소개

암은 생명을 위협하는 질병이며 전 세계적으로 사망의 주요 원인 중 하나입니다. 암세포는 억제되는 특징이 있습니다.세포자멸사, 통제되지 않은 성장과 증식, 그리고 전이(1). 종종 유전적 변형에 의해 시작되는 암의 발달은 복잡한 신호 네트워크를 형성하는 발암성 단백질과 종양 억제인자 사이의 상호작용을 포함하는 복잡한 과정입니다. 예를 들어, 종양유전자 Myc는 다양한 유형의 암에서 증폭되거나 과발현되는 것으로 밝혀졌으며 Myc로 인코딩된 종양단백질은 세포 주기 진행을 유도하고, 세포 성장을 자극하고, 혈관신생을 유도함으로써 종양 형성을 촉진할 수 있습니다(2). 그러나 Myc에 의해 유발된 발암성 신호는 발암성 E3-리가제 마우스 2분(MDM){6}}매개 p53 분해를 완화하는 종양 억제인자 ARF의 유도를 통해 p53 종양 억제인자 경로를 활성화할 수 있습니다( 삼). 이것은 세포가 악성 형질 전환을 방지하는 자동 조절, 자기 보호 메커니즘입니다. 특히, p53은 예를 들어 번역 침묵(4,5)을 위해 Myc mRNA를 표적으로 하는 miR{12}}을 전사적으로 활성화하여 Myc 활성을 억제하여 음성 피드백 조절 루프를 형성할 수 있습니다.

암을 치료하는 가장 간단하고 효과적인 전략은 암세포를 죽이는 것입니다. 시스플라틴(6), 악티노마이신 D(7), 아드리아마이신(8)과 같이 일반적으로 사용되는 항암제는 세포자멸사를 촉진하여 종양 성장을 억제하는 것으로 나타났습니다. 최근에 증가하는 증거는 많은 천연물 및 식물, 특히 중국 전통 의학(TCM)에 사용되는 약용 식물의 파생물이 암세포의 세포자멸사를 유도하여 종양 억제 기능을 나타내고 임상 적용 가능성이 있음을 보여줍니다. 암 치료에서 (9). 예를 들어, 한의학에서 분리된 천연 안트라퀴논 에모딘인 Radix rhizome Rhei는 수많은 유형의 암세포의 성장을 억제할 수 있습니다(10,11). 중국의 '행복한 나무'인 Camptotheca acuminate에서 파생된 Camptothecin은 topo I 매개 가닥 절단 후 DNA의 결찰을 억제하는 귀중한 천연 제품입니다(12). 총 729명의 진행성 유방암 환자를 대상으로 한 또 다른 집단 기반 코호트 연구에서 한의학 요법이 암 치료에 기여할 수 있다고 제안되었습니다. 이 코호트 중 115명의 환자는 TCM 사용자였으며 614명의 환자는 TCM을 사용하지 않았습니다. 다변수 분석은 비사용자와 비교하여 TCM 사용이 모든 원인으로 인한 사망 위험을 유의하게 감소시키는 것과 관련이 있음을 보여주었습니다(13). 앞서 언급한 모든 발견은 TCM이 암 치료에 사용될 수 있는 중요한 보완 대체 의학임을 나타냅니다.

에키나코사이드(ECH)는 의 줄기에서 분리된 페닐에타노이드입니다.시스탄체스살사, 항혈청 및 항피로제로 사용되는 중요한 생약 인 한약. 여러 페닐에타노이드가 자유 라디칼 소거 특성을 갖고 산화 스트레스로 인한 독성 상해로부터 보호하는 것으로 밝혀졌습니다(15). 또한 더 많은 생물학적 특성을에키나코사이드이후 해명되었습니다. 예를 들어, ECH는 증가된 수준의 염증성 사이토카인을 구출하고 급성 폐 손상이 있는 마우스에서 폐 조직병리학적 이상을 개선할 수 있습니다(16,17). 또한,에키나코사이드 신경 조직에 보호 효과가 있고 파킨슨병의 쥐 모델에서 행동 장애를 개선하는 것으로 나타났습니다(18). 특히, ECH가 세포 증식을 촉진하고 억제하는 것으로 밝혀졌습니다.세포자멸사마우스 장 상피 MODE-K 세포(19). 그러나 지금까지 암 예방에서 ECH의 잠재적인 역할에 대한 관심은 적었습니다.

이 연구에서는 여부를 조사했습니다.에키나코사이드 치료는 종양 세포의 성장과 증식에 영향을 미치며에키나코사이드세포 사멸을 유도하고 활성 산소 종(ROS)의 생산을 증가시키며 미토콘드리아 막 전위(MMP)를 감소시켜 결과적으로 종양 세포 성장을 억제합니다. 또한, 본 연구는 ECH 매개 세포 성장 억제를 담당하는 분자 메커니즘을 확인하는 것을 목표로 하고 있습니다.

재료 및 방법

세포주, 시약 및 항체.

SW1990 췌장 선암 세포(ATCC, Manassas, VA, USA)는 10% 소 태아 혈청, 50U/ml 페니실린 및 0.1mg/ml 스트렙토마이신이 보충된 Dulbecco의 변형 Eagle 배지에서 37˚C에서 배양되었습니다. 5% CO2 가습 대기.에키나코사이드Jrdun Biotechnology Corp.(중국 상하이)에서 구입했습니다. AKT, P-AKT, ERK, P-ERK, JNK, p-JNK, P38, p-P38 및 GAPDH에 대한 항체는 Cell Signaling Technology(Danvers, MA, USA)에서 구입했습니다. anti-Bax 및 anti-Bcl{8}}은 Santa Cruz Biotechnology Inc.(Santa Cruz, CA, USA)에서 구입했습니다. 항 Caspase{10}}는 Abcam(중국 상하이)에서 구입했습니다.

세포 생존력 분석.

종양 세포 성장 속도를 평가하기 위해 제조업체의 지침에 따라 Cell Counting kit{{0}}(CCK-8; Dojindo Molecular Technologies, Rockville, MD, USA)를 사용했습니다. 세포 현탁액을 96-웰 배양 플레이트에서 0, 12, 24, 48 또는 72시간 동안 ECH 처리로 웰당 5{3}}개의 세포로 시딩했습니다. 세포 성장 억제는 CCK-8 키트의 WST{10}} 시약을 각 웰에 최종 농도 10%로 첨가하여 결정했으며, 샘플의 흡광도는 마이크로플레이트 리더(Multiskan MK3; Multiskan MK3; Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA).

Hoechst 33342 염색.

세포(60% 합류)를 Hoechst 33342(Beyotime Institute of Biotechnology, Haimen, China)의 최종 농도로 처리하고, 37˚C 인큐베이터에서 15분 동안 배양하고, 인산 완충 식염수로 2회 세척하고, 고정했습니다. 실온에서 30분 동안 4% 파라포름알데히드에 넣고 슬라이드에 장착했습니다. 세포핵의 형태적 변화를 형광현미경(Olympus BX51, Melville, NY, USA)으로 관찰하였다. 정상 핵은 둥글고 밝은 파란색으로 염색된 반면, 세포사멸 핵은 수축되어 밝은 파란색으로 염색되었습니다.

형광 활성 세포 분류(FACS) 분석.

의 평가를 위해세포자멸사, 플루오레세인 이소티오시아네이트(FITC)-아넥신 V아폽토시스검출 키트(BD Biosciences, Shanghai, China)는 제조업체의 지침에 따라 사용되었습니다. 간단히 말해서, 5x1{3}}4 세포를 빙냉 PBS로 세척하고 0.1ml 결합 완충액(Beyotime Institute of Biotechnology)에 재현탁하고 10ml의 FITC-컨쥬게이션된 Annexin V(10mg/ml) 및 10ml로 염색했습니다. ml 요오드화 프로피듐(PI)(50 mg/ml). 암실에서 실온에서 15분 동안 인큐베이션하고 400ml 결합 완충액을 첨가한 후, 세포를 유세포 분석기(C6; BD Biosciences, Shanghai, China)로 분석했습니다.

활성산소종(ROS) 측정.

ROS의 생산을 평가하기 위해 Reactive Oxygen Species Assay Kit(Vigorous Biotechnology, Beijing, China)를 제조업체의 지침에 따라 사용했습니다. 간단히 말해서, 세포(80% 합류)를 수확하고 PBS로 세척한 후 디하이드로에티듐(DHE) 용액(Beyotime Institute of Biotechnology)으로 염색했습니다. 그런 다음 세포를 유세포 분석으로 분석했습니다.

미토콘드리아 막 전위(MMP) 측정.

테트라메틸로다민 메틸 에스테르(TMRM) 분석 키트(ImmunoChemistry Technologies, Bloomington, MN, USA)를 사용하여 MMP의 변화를 감지했습니다. 간단히 말해서, 세포(80% 합류)를 수확하고 PBS로 세척하고 37˚C 인큐베이터에서 15-20분 동안 TMRM으로 염색했습니다. 그런 다음 세포를 PBS로 한 번 세척하고 유세포 분석을 수행했습니다.

면역 블로팅 분석.

세포(8% 합류)를 수확하고 50mM Tris-HCl, pH 7.4로 구성된 RIPA 완충액(Jrdun Biotechnology)에서 용해했습니다. 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1% NP-40, 1% 소듐 데옥시콜산 및 0.1% SDS, 새로 추가된 프로테아좀 억제제. 동일한 양의 투명 세포 용해물을 이전에 설명한 대로 면역블롯팅 분석에 사용했습니다(20).

통계 분석.

정량적 데이터는 평균 ± 표준 편차로 표시됩니다. 통계적 차이는 통계적 SPSS 15.{2}} 소프트웨어를 사용하여 쌍을 이루지 않은 스튜던트 t-검정에 의해 평가되었습니다. 피<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

결과

에키나코사이드 종양 세포 성장을 억제합니다. 라고 보고되었음에도 불구하고에키나코사이드 억제하여 보호역할을 한다.세포자멸사신경 세포 및 장 상피 세포({0}})와 같은 체세포의 염증 신호와 관련하여 ECH가 암 세포 성장 및 증식을 제어하는지 여부는 여전히 파악하기 어렵습니다. 이를 테스트하기 위해 2등급 췌장 선암종에서 유래한 SW1990 세포를 그림 1과 같이 적정 용량의 ECH로 처리하여 세포 생존 분석을 수행했습니다. 특히, ECH는 용량에서 종양 세포 증식을 유의하게 지연시키는 것으로 입증되었습니다. 5-일 배양 기간 동안 -의존적 방식(그림 1).

에키나코사이드 아폽토시스를 유발합니다. 손실로세포자멸사이것은 췌장암 세포의 통제되지 않은 증식을 뒷받침하는 주요 원인 메커니즘 중 하나이며(21), 본 연구는 ECH가 세포자멸사를 유발하는지 여부를 결정하기 위해 일련의 실험을 수행했습니다. 첫째, Hoechst 33342로 종양 세포의 핵을 염색하여 ECH가세포자멸사용량 의존적 방식으로(그림 2A). 또한 Annexin V/PI 염색을 사용하여 FACS 분석을 수행하여 ty의 세포 사멸 효과를 추가로 확인했습니다.에키나코사이드 (그림 2B). 세포사멸 세포의 평균 백분율은 정상 배양 조건에서 1.1%인 반면, 이 백분율은 용량 의존적 방식으로 ECH 처리에 반응하여 10.6, 21.4 및 51.3%로 유의하게 증가했습니다(그림 2C). 이러한 결과는 그림 1에 표시된 세포 생존력 분석과 함께 다음을 입증합니다.에키나코사이드을 유발하여 종양 세포의 증식을 억제하는 치료세포자멸사.

에키나코사이드 활성산소종(ROS)의 생성을 촉진합니다. 독소루비신(doxorubicin) 및 시스플라틴(cisplatin)과 같은 여러 암 화학요법 약물은 생리학적 및 병리학적 조건에서 세포자멸사 유도에 중요한 역할을 하는 ROS의 강력한 생성자로 밝혀졌습니다(22). 따라서 ECH 처리가 ROS 생산도 조절할 수 있는지 여부를 조사했습니다. 이를 테스트하기 위해 산화되어 DNA와 삽입되는 에티듐을 생성할 수 있는 DHE를 본 연구에서 사용하여 ROS 생성을 평가했습니다. 다른 항암제와 마찬가지로에키나코사이드 또한 ECH 처리 시 증가된 형광 강도에 의해 나타난 바와 같이 용량 의존적 방식으로 ROS 생성을 자극합니다(그림 3).

에키나코사이드MMP를 감소시킵니다. 미토콘드리아 기능 장애는 세포 사멸 유도와 관련이 있는 것으로 나타났습니다. 미토콘드리아 투과성 전이 기공의 개방은 막횡단 전위의 탈분극과 세포자멸사 촉진 인자의 방출을 유도하는 것으로 입증되었습니다(23). 따라서 다음 여부를 테스트했습니다.에키나코사이드 TMRM 형광의 강도는 막 전위에 비례하기 때문에 잘 확립된 접근 방식인 TMRM 분석을 수행하여 종양 세포에서 MMP의 손실을 유도할 수 있습니다. 라는 것이 증명되었다.에키나코사이드 치료는 용량 의존적 방식으로 MMP를 유의하게 감소시킵니다(그림 4).

에키나코사이드 미토겐 활성화 단백질 키나제(MAPK)를 통해 종양 세포 성장을 제어하지만 AKT 신호는 제어하지 않습니다. 의 분자적 기초를 더 조사하기 위해에키나코사이드-매개된 종양 세포 사멸, 세포 생존 및 사멸을 제어하는 ​​MAPK 및 AKT(24,25)와 같은 여러 중요한 신호 전달 경로의 활성을 조사했습니다. MAPK는 세포외 신호 조절 키나제(ERK), c-Jun NH{6}}말단 키나제(JNK) 및 세 가지를 통해 활성화되는 p38 계열 구성원을 포함하여 진화적으로 보존된 프롤린 유도 Ser/Thr 단백질 키나제입니다. -계층 키나제 신호 전달 캐스케이드(26,27). 이 연구에서는 MAPK와 AKT의 발현과 활성화된 인산화 형태를 평가했으며 다음과 같은 사실이 밝혀졌습니다.에키나코사이드 JNK 및 ERK1/2 활성을 현저하게 억제하지만 p38 활성을 향상시킵니다(그림 5). 특히, 세포 증식에 ​​결정적으로 중요한 AKT 활성이 ECH 처리에 의해 영향을 받지 않는다는 것이 입증되었다(도 5). 또한 ECH 처리는 Bax 및 Caspase-3의 발현을 증가시키는 반면 Bcl-2의 발현은 감소시키는 것으로 나타났으며(그림 5), 이는 그림 2와 일치한다. 따라서 결과는 다음과 같다.에키나코사이드MAPK 경로를 통해 종양 세포 사멸을 유발합니다.

시스탄체에키나코사이드항 세포 사멸에

논의

우리가 아는 한, 이것은 다음을 보여주는 최초의 연구입니다.에키나코사이드 유발하여 종양을 억제하는 기능이 있습니다.세포자멸사(그림 2), ROS 생성 촉진 (그림 3), 미토콘드리아 막 전위 탈분극 유도 (그림 4), 결과적으로 종양 세포 성장 억제 (그림 1). 또한, ECH 매개 종양 세포 사멸의 분자적 기초는 MAPK 신호 전달 경로를 조절함으로써 발생하는 것으로 나타났습니다(그림 5). 이러한 발견은 종양 형성을 예방하는 ECH의 새로운 기능을 입증하고 따라서 그것이 암 치료를 위한 후보 약제가 될 수 있음을 시사합니다.

대부분의 항암제는 종양 세포 사멸, 노화 및/또는 세포 주기 정지를 유도하여 종양 세포 성장 및 증식을 억제할 수 있습니다. 세포 주기 정지는 복제 DNA 합성 또는 유사분열을 시작하기 전에 세포가 손상된 DNA를 복구할 수 있도록 하는 약한 스트레스 신호에 대한 세포 반응이며, 반면에 회복할 수 없거나 악성 세포를 제거하는 스트레스 신호에 대한 반응으로 세포자살 및 노화(영구적 세포 주기 정지)가 발생합니다. 28,29). 따라서 의 apoptotic 효과 만에키나코사이드 암세포를 죽이는 것이 항암제의 효능을 평가하는 주요 기준이기 때문에 이 연구에서 종양 세포에 대한 효과가 평가되었습니다. 특히, ECH는 종양 억제인자 p53에 의해 전사적으로 활성화되는 pro-apoptotic 유전자인 Bax(그림 5)의 발현을 유도한다는 것이 입증되었습니다(30). 따라서 다음 여부를 테스트할 가치가 있습니다.에키나코사이드 p53 신호 전달 경로를 활성화할 수 있습니다. 그렇다면 ECH는 p{1}}의존적 세포 주기 정지, 노화, 세포자멸사 또는 자가포식을 유도할 수도 있습니다. 본 연구에서는 SW1990 췌장 선암종 세포주에서 ECH의 종양 억제 기능을 규명하였다. 그러나 더 많은 췌장암 세포주를 관찰하는 추가 연구가 필요합니다. 발암성 단백질인 RAS와 종양 억제인자 p53의 돌연변이가 췌장암 발병과 관련이 있는 것으로 나타났습니다(31). 그러나 SW1990 세포주는 IARC p53 데이터베이스에 따르면 p53 돌연변이를 보유하지 않으므로 다음 여부를 조사하는 것이 중요합니다.에키나코사이드 다른 p53 돌연변이를 가진 다른 췌장암 세포주의 성장과 증식에 영향을 줄 수 있습니다. 또한 ECH가 세포자살을 촉진하고 다른 유형의 종양의 성장을 억제할 수 있는지 여부를 결정하는 것이 흥미로울 것입니다.

ROS 상승 및 MMP 감소,에키나코사이드 치료에 필수적인 것으로 나타났다.세포자멸사유도(22). 또한, ROS는 MMP의 파괴로 인해 세포사멸의 중간체인 사이토크롬 c의 방출에 기여하는 미토콘드리아 기공의 산화를 유도할 수 있다는 것이 밝혀졌습니다(22). 따라서 ECH가 ROS의 유도를 통해 간접적으로 MMP를 방해하는지 여부를 결정해야 합니다. 또한, ROS 유발 산화 스트레스는 p53, NF-κB, HIF 및 PI3K를 포함한 수많은 세포 성장 제어 신호를 조절하는 데 관여하는 것으로 나타났습니다(32). ECH가 이러한 중요한 신호 전달 경로를 조절하는지 여부와 만약 그렇다면 어떻게 조절하는지 결정해야 합니다. 특히, 산화 스트레스는 높은 산소 소모량, 약한 항산화 시스템, 중추 신경계의 말단 분화 특성으로 인해 다양한 신경 퇴행성 질환을 유발합니다(33). 그러나 여러 연구에 따르면에키나코사이드신경 조직에 대한 보호 및 항 세포 사멸 효과가 있습니다. 이와 관련하여 ECH가 말단 분화 신경 세포에서 ROS 생성을 감소시킬 수 있다고 가정하는 것이 합리적입니다. 따라서 ECH에 의한 ROS 생산의 조절이 세포 분화 상태에 의존하는지 여부도 결정해야 합니다. 따라서 현재의 결과는 다른 연구와 함께 널리 사용되는 한의학인 ECH가 신경 퇴행성 질환뿐만 아니라 악성 암종의 치료에 중요한 화학 요법 전략이 될 수 있음을 보여줍니다.

최근, 암 치료에 TCM을 사용하는 것이 점점 더 주목받고 있습니다. TCM에서 사용되는 약용 식물의 천연 제품의 잠재력은 서구 세계에서도 과학계에 의해 인정되었습니다(9). 이러한 천연물의 근본적인 작용 기전을 밝히기 위한 노력이 필요하며, 이는 궁극적으로 암 치료를 위한 효율적이고 안전한 의약품의 개발로 이어질 수 있습니다.

결론적으로, 본 연구는 의 종양 억제 기능을 입증했습니다.에키나코사이드 또한 분자 기반을 자세히 설명합니다.에키나코사이드- 매개된 종양 억제, 따라서 잠재적인 임상 적용을 제안합니다.에키나코사이드 암 치료에서.

에키나코사이드시스탄체에서

감사의 말

이 연구는 FMU의 과학 연구 핵심 프로그램(보조금 번호 09ZD014)의 지원을 받았습니다. 저자는 원고 편집에 도움을 준 Biomedworld(중국 상하이)에 감사드립니다.

에서에키나코사이드유도하여 췌장 선암종 세포 성장을 억제합니다.세포자멸사WEI WANG, JINBIN LUO, YING HUI LIANG 및 XINFENG LI에 의한 mitogen-activated protein kinase pathway를 통해

---분자 의학 보고서 13: 2613-2618, 2016 DOI: 10.3892/mmr.2016.4867

참고문헌

1. Hanahan D 및 Weinberg RA: 암의 특징: 차세대. 셀 144: 646-674, 2011.

2. Alderton GK: 전사: MYC의 전사 효과. Nat Rev Cancer 14: 513, 2014.

3. Zindy F, Eischen CM, Randle DH, Kamijo T, Cleveland JL, Sherr CJ 및 Roussel MF: ARF 종양 억제제를 통한 Myc 신호는 p{1}}의존성을 조절합니다.세포자멸사그리고 불멸화. Genes Dev 12: 2424-2433, 1998.

4. Sachdeva M, Zhu S, Wu F, Wu H, Walia V, Kumar S, Elble R, Watabe K 및 Mo YY: p53은 종양 억제제 miR{3}}의 유도를 통해 c-Myc를 억제합니다. Proc Natl Acad Sci USA 106: 3207-3212, 2009.

5. Liao JM, Cao B, Zhou X 및 Lu H: 표적 microRNA를 통한 p53 기능에 대한 새로운 통찰력. J Mol Cell Biol 6: 206-213, 2014.

6. Zamble DB 및 Lippard SJ: 암 화학 요법에서 Cisplatin 및 DNA 복구. Trends Biochem Sci 20: 435-439, 1995.

7. Kleeff J, Kornmann M, Sawhney H 및 Korc M: 액티노마이신 D 유도세포자멸사그리고 췌장암 세포의 성장을 억제합니다. Int J 암 86 399-407, 2000.

8. Tacar O, Sriamornsak P 및 Dass CR: Doxorubicin: 항암 분자 작용, 독성 및 새로운 약물 전달 시스템에 대한 업데이트. J Pharm Pharmacol 65: 157-170, 2013.

9. Efferth T, Li PC, Konkimalla VS 및 Kaina B: 중국 전통 의학에서 합리적인 암 치료로. Trends Mol Med 13: 353-361, 2007.

10. Yim H, Lee YH, Lee CH, and Lee SK: Rheum palmatum의 뿌리줄기에서 분리한 anthraquinone 유도체인 Emodin은 경쟁억제제인 casein kinase II의 활성을 선택적으로 억제한다. Planta Med 65: 9-13, 1999.

11. Zhang L, Chang CJ, Bacus SS 및 Hung MC: emodin에 의한 HER{1}}/neu 과발현 유방암 세포의 억제된 형질전환 및 분화 유도. Cancer Res 55: 3890-3896, 1995.

12. Pommier Y: Topoisomerase I 억제제: Camptothecins 및 그 이상. Nat Rev Cancer 6: 789-802, 2006.

13. Lee YW, Chen TL, Shih YR, Tsai CL, Chang CC, Liang HH, Tseng SH, Chien SC 및 Wang CC: 진행성 유방암 환자의 생존을 향상시키는 중국 전통 의학의 보조 요법: 인구 기반 연구. 암 120: 1338-1344, 2014.

14. Xiong Q, Hase K, Tezuka Y, Namba T 및 Kadota S: Acteoside 억제세포자멸사D-갈락토사민 및 lipopolysaccharide로 인한 간 손상. Life Sci 65: 421-430, 1999.

15. Gao JJ, Igarashi K 및 Nukina M: Caryopteris incana에서 페닐프로파노이드 배당체의 라디칼 소거 활성. Biosci Biotechnol Biochem 63: 983-988, 1999.

16. Zhang Y, Xing J, Ai T, Wen T, Guan L, Zhao J: 보호에키나코사이드쥐의 올레산으로 인한 급성 폐 손상에 대해. 자유 라디칼 해상도 41: 798-805, 2007.

17. Li X, Gou C, Yang H, Qiu J, Gu T 및 Wen T:에키나코사이드D-갈락토사민과 lipopolysaccharide로 인한 쥐의 급성 간 손상을 억제하여 개선세포자멸사및 염증. Scand J Gastroenterol 49: 993-1000, 2014.

18. Zhao Q, Gao J, Li W 및 Cai D: 신경 영양 및 신경 구조 효과에키나코사이드파킨슨병의 아급성 MPTP 마우스 모델에서. Brain Res 1346: 224-236, 2010.

19. Jia Y, Guan Q, Guo Y 및 Du C:에키나코사이드변형 성장 인자-1 발현을 상향 조절하여 장 상피 MODE-K 세포에서 세포 증식을 자극하고 세포 사멸을 방지합니다. J Pharmacol Sci 118: 99‑108, 2012.

20. Liao P, Wang W, Shen M, Pan W, Zhang K, Wang R, Chen T, Chen Y, Chen H 및 Wang P: EBP2와 c-Myc 사이의 양성 피드백 루프는 rDNA 전사, 세포 증식, 및 종양 형성. 세포 죽음 Dis 5: e1032, 2014.

21. Westphal S 및 Kalthoff H: Apoptosis: 췌장암의 표적. Mol Cancer 2: 6, 2003.

22. Simon HU, Haj-Yehia A 및 Levi-Schaffer F: 활성 산소 종(ROS)의 역할세포자멸사유도.아폽토시스5: 415-418, 2000.

23. Ly JD, Grubb DR 및 Lawen A: 세포자멸사에서 미토콘드리아 막 전위(델타 psi(m)); 업데이트.아폽토시스8: 115-128, 2003.

24. Munshi A 및 Ramesh R: Mitogen-activated protein kinases와 방사선 반응에서의 역할. 유전자 암 4: 401-408, 2013.

25. Abraham AG와 O'Neill E: 암에서 p53의 PI3K/Akt 매개 조절. Biochem Soc Trans 42: 798-803, 2014.

26. Tournier C: 암에서 JNK 신호의 두 가지 얼굴. 유전자 암 4: 397-400, 2013.

27. Koul HK, Pal M 및 Koul S: 고형 종양에서 p38 MAP 키나아제 신호 전달의 역할. 유전자 암 4: 342-359, 2013.

28. Brady CA와 Attardi LD: p53 개요. J Cell Sci 123: 2527-2532, 2010.

29. Carvajal LA 및 Manfredi JJ: 종양 억제기 p53에 의한 도로 생사 결정의 또 다른 분기점. EMBO 담당자 14: 414-421, 2013.

30. Miyashita T 및 Reed JC: 종양 억제인자 p53은 인간 Bax 유전자의 직접적인 전사 활성화제입니다. 셀 80: 293-299, 1995.

31. Morton JP, Timpson P, Karim SA, Ridgway RA, Athineos D, Doyle B, Jamieson NB, Oien KA, Lowy AM, Brunton VG 등: 돌연변이 p53은 췌장암의 전이를 유도하고 성장 정지/노화를 극복합니다. Proc Natl Acad Sci USA 107: 246-251, 2010.

32. Schieber M 및 Chandel NS: 산화 환원 신호 및 산화 스트레스에서 ROS 기능. Curr Biol 24: R453-R462, 2014.

33. Li J, OW, Li W, Jiang ZG 및 Ghanbari HA: 산화 스트레스 및 신경 퇴행성 장애. Int J Mol Sci 14: 24438-24475, 2013.