네트워크 약리학 및 동물 실험을 기반으로 염증성 장 질환에 대한 시스탄체 총 배당체의 작용 메커니즘 탐색 Ⅲ

3 결과 및 분석

3.1 Cistanche tubeulosa 총배당체 표적 및 질병 표적 분석

3차원 구조 파일 가져오기활성 성분PharmMapper 데이터베이스에 저장하여 다양한 성분에 해당하는 대상 지점을 얻습니다. 각 타겟에 해당하는 단백질명과 유전자명 정보를 얻기 위해 UniProt 데이터베이스를 사용하였다. 7가지 구성요소에 해당하는 목표점을 합치면 총 354개의 목표점이 얻어졌다. GeneCards 데이터베이스에서 "염증성 장질환"이라는 키워드를 이용하여 관련 유전자를 검색하였고, 검색 결과를 정리하여 최종적으로 7851개의 타겟을 획득하였다. 이벤트를 사용하여 온라인으로 벤 다이어그램을 그려 Cistanche tubeulosa의 활성 성분 표적과 IBD의 표적 지점의 교차점을 얻습니다. 도 1에 도시된 바와 같이, 254개의 활성 성분의 표적시스탄체 튜불로사IBD에 대한 보호 효과가 있는 것으로 나타났습니다.

그림 2. 공통 대상의 PPI 네트워크 다이어그램

그림 5 구성요소-표적-경로 네트워크

그림 7 Cistanche tubeulosa의 총 배당체는 IBD 마우스에서 TGF- 및 mTOR 신호 전달 경로의 mRNA를 하향 조절합니다.

3.4 Cistanche tubeulosa 총 배당체는 DSS 유발 DAI 점수를 향상시킵니다.

테스트 결과, CZ 그룹을 제외한 다른 세 그룹에서는 체중 감소 정도와 대변 잠혈 정도가 다양한 것으로 나타났습니다(그림 6). 그 중 DSS 대조군은 체중감소율이 가장 높았고, 대변혈이 가장 심했고, DAI가 가장 높았으며, 6일째 대변출혈이 뚜렷했다. Cistanche tubeulosa 총 배당체 개입 후 DAI 점수가 점차 감소하고 잠혈 상황도 점차 감소했습니다. HZ 그룹은 체중 감소율이 가장 낮았고, 대변에 숨은 혈액의 양도 가장 낮았습니다. 결과는 Cistanche tubeulosa 총 배당체가 염증성 장 질환으로 인한 생리적 반응을 개선한다는 것을 보여주었습니다.

IBD 치료용 CISTANCHE 보충제 PHGS75% ECH 30% ACT 12%

3.5 Cistanche tubeulosa 총 배당체는 IBD를 하향 조절합니다.

마우스 비장에서 mTOR 및 TGF-신호전달 경로의 발현 mTOR 및 TGF-신호전달 경로는 염증 반응을 활성화하는 두 가지 중요한 신호전달 경로입니다. 쥐의 비장 조직에서 mTOR 및 TGF-의 발현은 qRT-PCR에 의해 검출되었습니다. 그 결과, DSS 대조군 마우스에서 mTOR 및 TGF-의 mRNA 발현이 정상 마우스에 비해 유의하게 증가한 것으로 나타났다. DSS 대조 마우스와 비교하여 Cistanche tubeulosa와 비교하여 마우스에서 mTOR 및 TGF-의 발현은 Cistanche tubeulosa 개입 후 크게 감소했습니다. 그 중 고용량군에서 가장 유의한 감소가 나타났으며, 발현 수준은 기본적으로 정상군과 일치하였다(Figure 7). 결과는 Cistanche tubeulosa 총 배당체가 mTOR 및 TGF 신호 전달 경로의 발현을 하향 조절한다는 것을 보여주었습니다.

그림 8 PICRUSt2-기능 풍부 클러스터링의 히트맵

3.6 PICRUSt2 기능 주석 분석

PICRUSt2는 Greengene 데이터베이스의 생물학적 16S rRNA, ASV 트리 및 ASV 유전자 정보를 기반으로 메타게놈 기능을 예측하기 위한 생물정보학 도구입니다. 기능적 예측을 위해 Select COG 데이터베이스가 사용되었으며, 결과에 따르면 장내 세균총의 기능은 주로 RNA 처리와 관련이 있는 것으로 나타났습니다. 염색질 구조 및 역학; 세포 주기 조절, 세포 분열, 염색체 분할; 방어 체계; 세포벽/세포막/외막 생물 발생 신호 전달; 세포 세포외 구조와 같은 20가지 이상의 기능을 가지고 있습니다. 세포내 수송, 분비 및 소포 수송; 에너지 생산 및 전환; 탄수화물 수송과 대사. 각 샘플에서 가장 풍부한 상위 15개 특징과 해당 특징의 풍부함 정보를 선택합니다.정보에 대한 히트 맵(그림 8)이 그려지고 다양한 기능 수준에서 클러스터링됩니다.

CZ 그룹과 비교하여, DZ 대조군 마우스는 COG1132(ABC형 다중약물 수송 시스템), COG0745(DNA 결합 반응 조절인자), COG1131(ABC형 다중 약물 수송 시스템), COG1961(위치 특이적 DNA 재조합 효소 관련)을 나타냈다. DNA 인버타제 핀), COG0438(글리코실트랜스퍼라제 관련세포벽 생합성에서), COG0534(Na+-구동다약물 유출 펌프), COG0642(신호전달 히스티딘 키나제), COG1595(DNA-지시 RNA 중합효소 특화 시그마 서브유닛), COG0463(엔도뉴클레아제), COG4974(부위 특이적 재조합 XerD), COG2207(AraC 유형 DNA 결합 도메인 및 AraC - 단백질 함유), COG1136(ABC형 지질단백질 수출 시스템) 및 COG1309(DNA 결합 전사 조절인자) 기능성 유전자 발현 이상. 이들 유전자는 주로 다음에 관여합니다: V: 방어 메커니즘; T: 신호 변환 메커니즘; M: 세포벽/세포막/외막 생물발생; I: 지질 수송 및 대사; K: 전사; L: 복제, 재조합 및 수리.

이들 6가지 기능에 시스탄체 튜불로사(Cistanche tubeulosa)의 총 배당체가 부여된 후, 이러한 다양한 생리적 기능의 발현은 정상 그룹의 발현과 유사했습니다. CZ 및 DZ 그룹의 마우스와 비교하여, HZ 그룹의 마우스는 COG1028(단쇄 알코올 탈수소효소 계열) 및 COG0451(뉴클레오사이드-인산-당 에피머라제) 유전자의 발현이 높았습니다. 이 두 유전자는 I, 즉 지질 수송과 대사와 관련이 있습니다. 그리고 M: 세포벽/세포막/외막 생물 발생 기능은 밀접하게 연관되어 있습니다. 따라서 Cistanche tubeulosa 총 배당체는 생쥐의 지질 대사, 포도당 대사 및 관련 방어 신호 전달 메커니즘을 조절하여 IBD 생쥐의 손상을 조절할 수 있다고 추측됩니다.