연장된 생체 외 정상 체온 신장 관류: 관류액 조성의 영향
Feb 26, 2022
추상적인
기증자의 정상 체온 기계 관류(NMP)신장 개선된 이식편 보존 및 객관적인 이식 전 생체 외 장기 평가를 위한 기회를 제공합니다. 현재, 신장 NMP에 대한 다수의 관류 용액이 존재합니다. 이 연구는 4가지 다른 관류 용액을 나란히 평가하고 측정된 다른 관류액 조성의 영향을 결정하는 것을 목표로 했습니다.신장관류 매개변수. 돼지신장도살장에서 혈액을 채취했습니다.신장4개의 다른 관류 용액(그룹당 n=5)으로 37˚C에서 7시간 동안 NMP를 받았습니다. 그룹 1은 적혈구(RBC)와 Williams' Medium E를 기반으로 한 관류 용액으로 구성되었습니다. 그룹 2는 적혈구, 알부민 및 균형 잡힌 전해질 조성으로 구성되었습니다. 그룹 3은 영국 임상 NMP 솔루션을 기반으로 하는 RBC 및 배지를 포함했습니다. 그룹 4는 24-시간 관류 실험에 사용된 RBC와 배지를 포함했습니다. 용액 1과 2에 대한 NMP 흐름 패턴은 유사했고, 용액 3과 4는 더 낮지만 더 안정적인 유속을 보여주었습니다. Thiobarbituric acid 반응성 물질은 용액 1과 용액 4에서 다른 그룹에 비해 유의하게 높았다. 손상 표지자 N-아세틸{16}}D 글루코사미니다제의 수준은 용액 3 및 4와 비교하여 용액 2에서 상당히 낮았습니다. 이 연구는 NMP 동안 관류액 조성이 측정된 관류 및 손상 매개변수에 상당한 영향을 미치므로 해석에 영향을 미친다는 것을 보여줍니다. 잠재적인 생존 마커. NMP 동안 가장 최적의 조건을 결정하고 궁극적으로 보편적인 장기 평가 기준을 개발하기 위해 주요 관류액 성분의 개별적인 영향을 조사하기 위한 추가 연구가 필요합니다.
키워드:신장 기능; 신장; 신장 손상; 신장 관류 ; 신세뇨관
CISTANCHE는 신장/신장 기능을 개선합니다
소개
전세계 표준 기증자신장보존 방법은 정적 냉장 보관(SCS)입니다. 그러나 네덜란드에서는 모든 사망한 기증자를 보존하기 위해 임상적으로 HMP(저체온 기계 관류)가 사용됩니다.신장.HMP는 지연된 이식편 기능이 감소하고 1- 및 3-년이 개선된 것으로 나타났습니다.신장SCS 보존과 비교하여 이식편 생존[1,2]. 기증자에 대한 수요와 공급의 실질적인 격차를 최소화하기 위해신장,최적이 아닌 사망한 기증자신장점점 더 많이 사용되고 있습니다. 최적의 품질보다 낮은 기증자의 사용 증가로 인해신장,견고하고 객관적인 이식 전 평가와 보존을 위해 더욱 최적화된 전략을 수립하는 것이 가장 중요합니다. 이러한 사망한 기증자에 대한 정상 체온 기계 관류(NMP) 사용신장점점 더 고려되고 있습니다. 전임상 연구는 NMP가 SCS 단독에 비해 더 나은 이식 결과를 초래할 수 있음을 보여주었습니다[3]. 심장사 후 기증 및 확장 기준 기증자로서신장표준 기준 기증자 절차에서 파생된 장기에 비해 저체온 저장에 대한 내성이 낮기 때문에 한계 품질 기증 장기는 NMP 보존의 이점을 얻을 수 있습니다[4,5]. 현재 1개 임상신장NMP 시험은 1시간의 비교적 짧은 이식 전 관류 기간으로 영국에서 수행되고 있습니다[6]. 그러나 적절한 장기 평가 및 소생을 위해서는 더 긴 NMP 시간이 필요할 수 있습니다[7]. 이 방법은 이식 전 장기 진단, 보존 개선, 이식 전 생체 외 개입을 통해 이식 후 개선을 위한 기회를 제공합니다.신장 기능. 오늘날 많은 이식 센터에서 이 유망한 정상 체온 생체 외 관류 전략에 투자하기 시작했습니다. 이러한 센터에는 다양한 NMP 관류 솔루션이 있습니다. 구성의 큰 이질성은 균일하고 강력한 NMP 평가 기준을 정의하는 궁극적인 목표를 방해할 수 있습니다. 이러한 이질성은 NMP 솔루션의 정확한 공식이 무엇이어야 하는지에 대한 현재 제한된 이해에 의해 부분적으로 주도됩니다. 일반적으로 정상 온도 관류 용액은 산소 운반체, 콜로이드 및 균형 잡힌 전해질 조성을 포함해야 합니다[8]. 더 긴 기간의 관류는 전체 관류 전반에 걸쳐 안정한 생리학적 환경을 유지하기 위해 최적화된 관류액 조성물을 필요로 하기 때문에 조성은 또한 NMP의 지속 기간에 따라 달라질 것입니다. 이 연구에서는 4가지 다른 정상온 관류 솔루션, 즉 일반적으로 사용되는 3가지 기존 솔루션에 변경 사항이 없고 새로 설계된 솔루션 1가지를 평가했습니다. 우리는 돼지에서 장기간(7h) NMP를 수행했습니다.신장기부 모델. 우리의 목표는 서로 다른 관류액 조성이 전해질 균형에 어느 정도 영향을 미치는지 분석하는 것이었습니다.신장 기능, 및 NMP 동안 측정된 부상 마커.
재료 및 방법
신장 및 혈액 채취생존 가능한 돼지신장국내 랜드레이스 돼지(암퇘지; 유형 Topigs 20)에서 채취한 혈액과 지역 도축장(Kroon Vlees, Groningen, 네덜란드)에서 채취했습니다. 돼지는 일시적인 전기 충격으로 기절한 후 정상적인 도축장 절차에 따라 출혈을 일으켰습니다. 자가 혈액을 수집하고 헤파린(5000 국제 단위/ml(IU), LEO1 pharma, Ballerup, Denmark)을 추가하여 혈액이 응고되는 것을 방지했습니다.신장돼지의 순환 사망 후 신속하게 회수되어 냉장 보관 전에 약 20분 동안 온성 허혈(WI)이 발생했습니다. WI 기간 이후,신장플러싱하고 4˚C에서 염화나트륨(NaCl)(0.9%)(Baxter BV, 네덜란드 위트레흐트) 18{1}}ml로 냉각하여 냉허혈(CI)의 시작을 표시했습니다.신장과도한 지방 조직 없이 절개되어 혈관이 노출되었습니다. 다음,신장에 연결되었다신장Assist Transport HMP 장치(Organ Assist, Groningen, the Nether-lands). 이 HMP 기계 보존신장차가운({0}}–4˚C) UW 기계 관류 용액(Belzer UW-MP 용액, Bridge to Life Ltd, Columbia, SC)으로 평균 동맥압 25mmHg에서 산소 박동성 HMP를 사용하여 2~4시간 . 헤파린 처리된 자가 혈액은 백혈구 필터(BioR 02 plus BS PF, Fresenius Kabi, Zeist, 네덜란드)를 사용하여 백혈구를 제거하고 원심분리한 후 상층액 혈장을 제거했습니다.
관류 솔루션4개의 실험 그룹이 정의되었으며(그룹당 n=5), 각 그룹에서 다른 NMP 솔루션이 사용되었습니다. 앞서서신장검색을 통해 실험 중에 사용할 관류 용액이 결정되었습니다. 4가지 관류 용액 모두 자가 돼지 적혈구(RBC)를 포함했지만 각 NMP 배지의 조성은 달랐습니다(표 1). 우리 연구실에서는 돼지의 관류에 대한 충분한 경험을 얻었습니다.신장및 Williams' Medium E(WME)를 사용한 설치류 간(Life Technologies Ltd, Bleiswijk, Netherlands) [9–11]. 이 관류액에는 혈관 확장제가 포함되어 있지 않으므로 만들지 않기로 결정했습니다.
초기 솔루션 변경. 그룹 2의 관류 용액은 생리학적 농도의 전해질을 함유하고 사구체막에 생리학적 콜로이드 삼투압을 가하기 위해 우리 그룹에 의해 개발되었습니다. 그룹 3 관류액은 임상적으로 사용되는 영국식 NMP 용액으로, 현재 1시간 NMP와 인간 사망한 기증자의 SCS를 비교하는 무작위 대조 시험에서 사용됩니다.신장영국에서 [12]. 그룹 4의 경우 이 용액이 덴마크 오르후스(Aarhus)의 돼지 자가이식 연구에서 성공적으로 사용되었습니다[13]. 버려진 인간을 관류시킨 Weissenbacher et al.이 디자인한 관류액을 기반으로 합니다.신장24시간 동안 [7]. 상기 언급된 성분들에 더하여, 그룹 1의 관류액은 농도가 4mmol/l 이하로 떨어졌을 때 포도당으로 보충되었다. 생성된 소변은
매시간 WME로 대체됩니다. 그룹 2에서 주사기 주입 펌프는 총 비경구 영양(SmofKabiven)(Fresenius Kabi Nederland BV, Zeist, Netherlands)을 0.5ml/손 인슐린(10{{1{ {12}}}}0 IU, Novo Nordisk A/S) 0.005ml/h의 속도로 매 시간 후, 안정적인 전해질 균형을 유지하기 위해 그룹 2에서 소변 생산이 재순환되었습니다. 세 번째 그룹에서는 170ml의 순수한 적혈구를 120ml의 식염수, 아데닌, 포도당 및 만니톨(SAG-M)과 혼합하여 0.5-0.65l/l의 헤마토크릿을 생성하여 일반적으로 임상적으로 사용되는 단위의 구성을 모방했습니다. RBC(영국 임상 NMP 관류액에서 사용됨). 이 실험 동안 3개의 주사기 주입 펌프를 사용하여 Flolan(GlaxoSmithKline BV, Zeist, Netherlands)을 5ml/h의 속도로, 포도당 5%(Baxter BV, Utrecht, Netherlands)를 4ml/h의 속도로 주입했습니다. h 및 150ml의 Synthamin{19}} 퍼센트(Baxter Healthcare Ltd., Norfolk, United Kingdom), 6ml의 중탄산나트륨(NaHCO 3 ) 8.4%(B. Braun Melsungen AG, Melsungen, Germany)의 혼합물 , 30 IU 인슐린 (1000 IU, Novo Nordisk A/S, Bagsværd, Den-mark) 및 Cernevit (Baxter BV, 네덜란드 위트레흐트), 현재 영국 임상 연구의 프로토콜에 따라 20 ml/h의 속도로. 소변 생산은 시간당 Ringers lactate(또한 Baxter BV)로 대체되었습니다. 네 번째 그룹의 NMP 동안 주사기 주입 펌프는 0.3 ml/h의 속도로 식염수에 용해된 베라파밀(2.5 mg/ml, 또한 Sandoz BV)을 주입했습니다. 이 그룹에서는 안정적인 전해질 균형을 유지하기 위해 매 시간마다 소변 생산도 재순환되었습니다. 각 그룹의 샘플 볼륨은 다른 구성 요소로 수정되었습니다. 그룹 1의 부피는 WME로, 그룹 2는 관류 배지로, 그룹 3은 Ringers lactate로, 그룹 4는 Sterofundin1(또한 B. Braun)으로 대체되었습니다.
NMP 설정관류 설정은 이전에 우리 그룹이 설명한 것과 동일했습니다[14]. 그만큼신장모든 실험 동안 분당 60펄스의 주파수, ata set, 비 피드백 조절, 110/70mmHg의 압력 및 95% 산소/5% 이산화탄소(탄소)로 산소를 공급하는 asinusoid pulsatile 방식으로 관류되었습니다. 이 초생리학적 산소 수준은 기존의 네 가지 프로토콜 모두에서 표준 절차입니다. 관류는 맞춤형 전자 인터페이스 및 제어 소프트웨어(LabView Software, National Instruments Netherlands BV, Woerden, Netherlands)로 제어되었습니다. 상온 관류 회로의 개략도가 그림 1에 나와 있습니다.
소변 및 관류액 분석매시간 동맥 관류액과 소변 샘플을 채취했습니다. 소변이 재순환된 그룹 2와 4에서는 소변 재순환 전에 관류액 샘플을 채취했습니다. 관류액의 동맥혈 가스 샘플은 0, NMP 240분 및 420분 후에 분석되었습니다. 관류 매개변수를 30분마다 문서화했습니다. 젖산 탈수소효소(LDH) 및 아스파르테이트 아미노전이효소(ASAT), 나트륨, 칼륨, 포도당 및 크레아티닌의 농도는 관류액에서 표준 임상 분석으로 측정되었습니다. 크레아티닌 청소율, 100g당 크레아티닌 배설 분율(FE creatinine/100g), 나트륨 배설 분율(FENa plus)을 계산하여 결정했습니다.신장 기능. 방정식은 S1 부록에서 찾을 수 있습니다. N-아세틸- -D 글루코사미니다제(NAG)(또한 Sigma-Aldrich)의 마커로서신장관상 동맥 기능 장애/손상 및 티오바르비투르산 반응성 물질(TBARS)(Lipid Peroxidation-malondialdehyde(MDA)) Assay Kit, Sigma-Aldrich BV, Zwijndrecht, Netherlands)를 관류액에서 측정하여 산화 스트레스를 정량화했습니다.
조직학상부의 바늘 생검신피질NMP가 시작되기 전에 찍은 것입니다. 각 실험이 끝날 때 상부 피질에서 수술 조직 샘플을 수집했습니다. 이러한 생검은
통계 분석데이터 분석은 GraphPad Prism 버전 8.3.1(GraphPad software Inc., La Jolla, CA, USA)을 사용하여 수행되었습니다. ASAT 및 LDH와 같은 모든 연속 세로 측정 변수에 대해 곡선 아래 면적(AUC)을 계산했습니다. 데이터가 정규 분포를 따르고(Shapiro Wilk 테스트) 분산의 균질성이 있는 경우(Bartlett 테스트를 통해 테스트) 다중 비교가 있는 일원 분산 분석을 사용하여 그룹 간의 AUC 값을 비교했습니다. 데이터가 이러한 가정에 실패하면 Dunn의 다중 비교 테스트와 함께 Kruskal-Wallis 테스트가 사용되었습니다. 0.05 이하의 양측 p-값은 통계적 유의성을 나타내는 것으로 간주되었습니다.
결과
관류 매개변수표 2에서 온난 및 한랭 허혈에 대한 데이터(평균, 최소 및 최대), HMP 지속 기간 및 NMP 시작 전 및 후 체중 및 델타 중량(t=420 대 t {{2에서의 체중 차이 }}) 안녕하세요. 델타 가중치는 그룹 2에 비해 그룹 1에서 유의하게 더 높았습니다(p=0.041). 모든 실험군의 값 사이에 다른 유의한 차이는 없었다. NMP 중신장동맥류는 그룹 1과 2에서 재관류의 처음 60분 동안 증가했습니다. 60분 후 유량은 일반적으로 감소하기 시작했습니다. 그룹 3과 4의 관류는 낮은 유량 값으로 시작했지만 NMP 전체에 걸쳐 보다 일정한 유량을 보였습니다. NMP 7시간 후 최종 값은 모든 그룹에서 약 75ml/min/100g이었습니다(그림 2).
소변 및 관류액 분석관류 전반에 걸친 기능 및 부상 매개변수에 대한 개별 데이터는 표 3에서 찾을 수 있습니다.신장 기능.그룹 3은 가장 높은 수준의 소변 배출을 보여주었습니다(그림 3). 그룹 3의 누적 이뇨는 그룹 1(p=0.{7}}03), 그룹 2(p < 0.001)="" 및="" 그룹="" 4(p="0.008)에" 비해="" 유의하게="" 더="" 높았습니다.="">신장그룹 2에서 t=180 및 t=300에서 소변을 생성하지 않았으므로 t=360 및 t=420에서 평균 누적 소변 생성 수준이 낮아졌습니다. 나트륨과 칼륨 수치는 그룹 간에 상당히 달랐습니다(그림 4). t=0의 수준은 관류 시 초기 시작 값을 나타냅니다. 특히 그룹 3은 높은
관류 동안 그룹 3의 pH는 안정화 없이 감소한 반면 다른 그룹은 NMP 7시간 후에 약 7.4의 보다 균형 잡힌 수준에 도달했습니다(그림 5). 크레아티닌 청소율은 모든 그룹에서 낮았습니다(그림 6A 및 6B). 그럼에도 불구하고 그룹 2에 비해 그룹 3보다 유의하게 높았다(p=0.039). 100g당 크레아티닌의 분율 배설(그림 6C 및 6D)은 그룹 1(p{16}}.026), 그룹 2(p{19}}.017) 및 그룹 4( p=0.045). FENa plus는 모든 그룹에서 높았으며, 이는 허혈성 손상된 이들에서 세뇨관 기능이 심하게 손상되었음을 나타냅니다(그림 6E 및 6F).신장. 그룹 3의 FENa plus는 그룹 2(p=0.037) 및 그룹 4(p=0.019)에 비해 유의하게 더 높았습니다. 다른 모든 그룹은 크게 다르지 않았습니다.신장 손상.NMP 동안의 ASAT 수준은 일반적인 세포 손상에 대한 마커로 분석되었습니다(그림 7A 및 7B). 평균 AUC는 각 그룹에 대해 결정되었습니다. 그룹 4의 수준은 그룹 1(p=0.022) 및 그룹 2(p=0.011)에 비해 유의하게 더 높았습니다. LDH 수준은 또한 일반적인 손상 마커로서 관류액에서 측정되었습니다(그림 7C 및 7D). 그룹 1과 2에서 가장 낮은 수준의 LDH를 나타내는 AUC가 계산되었습니다. 그룹 2는 그룹 4에 비해 상당히 낮았습니다(p=0.020). 그룹 1은 그룹 4에 비해 유의하게 낮은 수준을 보였습니다(p=0.022). NAG 수준은 그룹 1(p{23}}.043) 및 그룹 2(p{26}}.006)에 비해 그룹 3에서 유의하게 더 높았습니다(그림 8A 및 8B). 말론디알데히드(MDA)의 농도인 TBARS는 지질 과산화에 대한 마커로서 네 그룹 모두에서 측정되었습니다(그림 8C 및 8D). MDA 수준은 그룹 2(p{34}}.003) 및 그룹 3(p < 0.001)에="" 비해="" 그룹="" 1에서="" 유의하게="" 더="" 높았습니다.="" 그룹="" 2는="" 그룹="" 4에="" 비해="" 유의하게="" 낮은="" mda="" 수준을="" 보여주었습니다(p="0.006)." 그룹="" 3은="" 그룹="" 4에="" 비해="" 유의하게="" 낮은="" 수준을=""><>
조직학
그림 9의 도트 플롯은신장NMP 시작 전(t {0}}) 및 NMP 7시간 후(t=420) 세뇨관 손상/ATN, 세뇨관 확장 및 사구체 확장 점수. 조직학적 괴사와 세뇨관 확장의 초기 값은 종점 점수에서 약간의 차이만 있는 그룹 간에 비슷했습니다. t=420에서의 사구체 팽창은 다른 3군에 비해 2군에서 현저히 낮았다. 그룹당 조직학적 수치는 S1 그림에서 찾을 수 있습니다. Bax 및 Bcl{8}} 배수 유도, 각각 pro- 및 anti-apoptotic 유전자 발현에 대한 지표는 둘 다 t=0 (그림 10). Delta Bax 유전자 발현(t=0과 t=420 사이의 차이)은 모든 그룹에서 계산되었으며 그룹 2(p=0.046), 그룹 3에 비해 그룹 1에서 유의하게 더 높았습니다. (p < 0.001)="" 및="" 그룹="" 4(p="0.003)." bcl{26}}="" 발현은="" 관류="" 7시간="" 후="" 모든="" 그룹에서="" 감소했으며="" 그룹="" 간에="" 유의한="" 차이가="">
논의
에 대한 일반적인 관심신장정상 체온 생체 외 기계 관류 기술이 증가하고 있지만 임상 증거는 현재 진행 중인 임상 NMP 시험 하나만으로 제한적입니다. NMP의 가능성을 조사하는 광범위한 전임상 연구가 수행되었습니다. 다양한신장normalothermic perfusates는 다른 연구 그룹에 존재합니다. 그러나 관류 구성이 어느 정도 영향을 미치는지에 대한 질문은신장 기능잠재적인 생존 가능성 마커의 해석에 영향을 미치는 방법은 남아 있습니다. 따라서 이 연구에서는 4가지 다른 정상 체온 생체 외 관류 용액이 병에 미치는 영향을 평가했습니다.신장 기능그리고신장 손상돼지를 사용하여 NMP를 연장하는 동안신장순환 사망 모델 후 기증.
고립된 평가신장 기능이식 전. Hosgood와 동료들은 이식 기간 동안 이식 전 생존력 평가의 타당성에 대한 최초의 임상 증거를 제공했습니다.신장NMP. 그들의 관류 솔루션은 현재 NMP 동안 가장 널리 사용되며 처음에는 평가하기 위해 개발되었습니다.신장 기능이식 전 1~2시간 이내[16].신장이 용액으로 관류하면 일반적으로 높은 소변 생산량을 보입니다[17]. 실제로, 이 임상 영국 관류액을 기반으로 한 그룹 3에서 가장 높은 소변 생산량이 관찰되었으며, 이는 NMP 7시간 동안 이 그룹에서 순환하는 관류액의 완전한 소변 배설 이상으로 이어집니다. 순환 관류액 부피의 지속적인 손실은 이 관류 용액에 대한 임상 프로토콜에 따라 유사한 부피의 Ringer's lactate를 간헐적으로 추가하여 보상해야 했습니다. 우리의 연구에서, 이것은 소변이 재순환되지 않았기 때문에 전해질 조성과 pH에 상당한 변화를 가져왔습니다. 이러한 높은 소변 생산량은 이 관류 용액에만 콜로이드가 없기 때문일 가능성이 큽니다. 다른 세 그룹의 관류 용액에는 상당한 양의 알부민이 포함되어 있습니다. 혈관내 공간에서 알부민은 정상적인 콜로이드 삼투압을 유지하는 주성분이다[18]. 정수압과 콜로이드 삼투압 사이의 균형은 사구체막에 대한 생리학적 한외여과율을 초래합니다[19]. Kaths et al. NMP 동안의 소변 생산은 이식 후 기능과 상관관계가 없음을 보여주었습니다. 그들은 소변 생산이 관류액 구성, 특히 종양 압력과 삼투압에 의해 크게 영향을 받는다고 가정했는데, 이는 우리의 결과와 일치합니다[20].
CISTANCHE는 신장/신부전을 개선할 것입니다
전해질 조절을 담당하는 주요 기관은신장그러나 다음과 같은 증거가 있습니다.신장그 자체는 또한 전해질의 균형으로부터 이익을 얻습니다. 칼륨, 특히 저칼륨혈증의 불균형은 신체의 다양한 변화를 일으킬 수 있음이 입증되었습니다.신장 기능세뇨관 수송 장애, 요농축 능력 장애, 나트륨 재흡수 장애, 세포내 산증 등을 포함합니다[21-23]. 중요한 관류액 전해질의 불가피한 요실금을 설명하기 위해 Weissenbacher et al. NMP 동안 소변 재순환의 사용을 제안했습니다. 그들은 그것이 버려진 인간의 관류량과 항상성의 적절한 유지를 촉진한다는 것을 보여주었습니다.신장, NMP의 24시간 후에도 [7]. 관류액에서 측정된 알부민 농도는 관류 동안 시간이 지남에 따라 감소했습니다. 이러한 감소는 플라스틱 관류 회로 튜브에 알부민이 부착되어 발생할 가능성이 가장 높으며, 다른 NMP 연구에서도 관찰되는 생성된 소변의 손실로 인해 소량만이 발생할 수 있습니다[24]. 이러한 알부민의 요 소실은 NMP 동안 관찰된 알부민뇨 수준과 일치하는 단백뇨를 초래하는 필터 격막의 파괴와 함께 내피 세포에 대한 온난한 허혈 유발 손상으로 설명될 수 있습니다[25].
우리는 우리가 관찰한 그룹 간의 차이의 메커니즘을 완전히 설명할 수 없습니다.신장NMP 동안 체중 증가. 조직학적 검사는 가능한 부종 형성 부위에 대해 결정적이지 않았습니다. 사용된 관류 용액과 관련하여 체중 증가의 잠재적인 다인자 메커니즘을 명확히 하기 위해 추가 조사가 필요합니다. 다양한 관류 매개변수가 측정되었으며, 여기서신장흐름이 가장 두드러진 차이를 보였다.신장그룹 3과 4의 흐름은 7-시간 NMP 기간 동안 가장 안정적인 수준을 유지했습니다. 이 그룹의 솔루션은 혈관 확장제로 보충되었지만 처음 두 그룹의 솔루션은 그렇지 않았습니다. 내인성 혈관 확장제는 혈관 평활근 이완을 촉진하여 국소 혈류를 조절합니다[26]. 1군과 2군은 혈관 확장제를 보충하지 않았기 때문에 혈관 경련으로 인해신장동맥류. 또한, 골수와 피질의 흐름이 개별적으로 조절될 수 있다는 증거가 있습니다[27,28]. NMP 동안 정확하고 정량적인 기능적 MRI(ASL) 흐름 측정을 기반으로 한 우리 그룹의 미공개 예비 데이터는 이 메커니즘을 강력하게 지원합니다. 그 실험들에서,신장NMP의 첫 번째 시간 동안의 흐름은 주로 수질이며, 한 시간 이상의 관류 후에는 피질 흐름으로 이동합니다. 흐름의 이러한 지역적 재분배는 그룹 1과 2의 관류에서 볼 수 있는 피크를 설명할 수 있으며, 아마도 첫 번째 시간 동안의 골수 단락으로 인한 것일 수 있습니다. NMP 시작 시 혈관 확장제를 추가하면 NMP 시작 시 즉시 피질 미세관류가 우세하게 향상되어 그룹 3과 4에서 관찰된 것처럼 보다 안정적인 흐름이 나타날 수 있습니다. NMP 동안 관류가 필요한 경우 관류 용액에 혈관 확장제를 추가하는 것이 좋습니다. 또는 관류 전에 적혈구를 반복적으로 세척하면신장RBC의 혈관수축 활성을 감소시켜 혈관수축을 감소시킨다[29].
신장 기능NMP 동안 모든 돼지에서 현저하게 손상되었습니다.신장, 아마도 초기 온열 허혈성 손상과 항이뇨 호르몬 및 알도스테론에 의해 유도되는 것과 같은 생리학적 체액 조절 기전의 결여 때문일 수 있습니다. 크레아티닌 청소율은 낮았고 모든 그룹에서 Fena plus의 높은 값이 관찰되었습니다. 그룹 2에서 NMP를 3시간 투여한 후 FENa 플러스가 갑자기 증가한 것은 여러 그룹에서 소변 생성이 없었기 때문일 수 있습니다.신장t=240 및 t=300에서 관류 종료 시신장다시 소변을 보기 시작했습니다. FENa plus의 상승된 값은 이전 연구에서도 보고된 바와 같이 아마도 세뇨관 괴사의 결과일 것입니다[30,31]. 또한 생체 내 크레아티닌 청소율과 FENa 플러스 수치는 체액 조절에 의해 크게 영향을 받습니다. 체액 조절로
NMP 실험 중에 부족했던 생리학적 크레아티닌 청소율과 FENa 플러스 수준은 NMP 설정에서 예상되지 않습니다.
부상을 정량화하기 위해신장세포, ASAT 및 LDH 수준을 측정했습니다. 가장 높은 수준은 3군과 4군에서 관찰되었으며, 이는 대부분의 부상이 이 두 군에서 발생했음을 시사합니다. Kaths et al. NMP 동안 증가된 ASAT 수준은 이식 후와 상관관계가 있음을 보여주었습니다.신장 기능따라서 ASAT는 중요한 장기 생존력 평가 바이오마커가 될 수 있습니다[20]. 측정된 ASAT 수준에 대한 다양한 관류액 구성의 영향은 전 세계적으로 NMP 데이터를 일관되게 해석할 수 있도록 이식 센터 간에 NMP 프로토콜을 조화시키는 것의 중요성을 강조합니다. 변경된 세뇨관 무결성 및 세뇨관 손상에 대한 마커인 NAG 수준[32,33]은 그룹 3에서 가장 높았으며, 이는 대부분의 세뇨관 손상이 이 그룹에서 발생했음을 나타냅니다. 관류 중 산화 스트레스를 정량화하기 위해 TBARS 수준을 측정했습니다. 1군과 4군에서 가장 높은 수치를 보였고,신장이 그룹에서 가장 높은 산화 스트레스를 경험했으며, 이로 인해 세포 기능이 손상될 수 있었습니다[34]. NMP 전 생검과 비교하여 NMP 7시간 후 Bax/Bcl{1}} 비율의 변화는 아마도 NMP 동안 발생하는 잠재적인 손상 효과가 아니라 초기 온난한 허혈 기간의 결과일 것입니다. 결과적인 재관류에 따른 허혈성 손상은 조절 세포자살 캐스케이드를 유도하며, 이는 손상된 근위 세뇨관의 복구 과정에서 핵심적인 역할을 합니다[35]. 많은 정상 체온 손상 마커가 제안되었지만 현재까지 강력한 임상 시험에서 검증된 것은 없습니다. 이식 후 NMP 동안 측정된 유망한 부상 마커 배열을 연관시키는 연구신장 기능어떤 잠재적 바이오마커가 정상 체온 생체 외 생존력 평가 기준에 통합되어야 하는지를 설명해야 합니다.
CISTANCHE는 신장/신장 감염을 개선할 것입니다
NMP 설정은 DCD의 돼지 모델과 함께 사용되었습니다.신장어느 도살장에 기부신장활용되었다. 이 연구의 한계는 도축장 절차가 방혈 후 심장 마비를 기반으로 하기 때문에 순환 정지가 심장 허혈 및/또는 부전으로 인해 발생하는 실제 DCD 모델과 약간 다르다는 것입니다. 그러나 우리는 다음을 관찰했습니다.신장우리 연구에서 DCD 후에 발생한 것과 유사한 허혈성 손상을 보였다[36,37]. 따라서 우리는 현재 도축장 DCD 모델이 필수적인 신뢰성과 재현성을 유지하면서 실험 동물의 사용을 줄이는 데 도움이 될 것이라고 생각합니다. 실험 그룹은 상대적으로 작았지만 그룹 크기는 다른 돼지의 그룹 크기와 비슷합니다.신장기계 관류 연구 [17,38-40]. Hosgood 등이 사용한 영국 임상 관류 용액을 기반으로 한 그룹 3에서 기록한 NMP 관류 매개변수는 이전에 Leicester/Cambridge 그룹에서 보고된 결과와 완전히 비교할 수 없습니다[6,12]. 우리 연구에서,신장NMP의 훨씬 더 긴 기간을 겪었고 더 높은 평균 동맥압으로 관류되었습니다. 뿐만 아니라,신장Hosgood et al. 기계 관류 후 이식되었습니다. 4가지 관류 솔루션 간의 완전히 신뢰할 수 있는 비교를 위해 향후 연구에는 다음과 같은 이식이 포함되어야 합니다.신장NMP 이후에는 생체 내에서 실제 후속 조치 및 기능 평가가 가능하기 때문입니다.
결론적으로 돼지의 관류신장테스트한 4가지 솔루션 모두에서 실현 가능성이 입증되었습니다. 그러나 전해질 수준 간에는 상당한 차이가 있었고,신장 기능매개변수 및 4개 그룹의 부상 마커. 그룹 간에 적용된 관류 솔루션의 현재 이질성과 함께 이러한 차이는 표준화된 NMP 평가 기준의 개발을 방해합니다. 우리는 실험 및 임상 NMP 모두에서 관류 및 관류 프로토콜에서 필요한 조정을 요구할 수 있으므로 NMP의 정확한 목적과 원하는 기간을 신중하게 사전 지정하는 것이 필수적이라고 생각합니다. 이 연구는 개별적인 관류액 구성요소의 역할을 조사하기 보다는 측정된 결과에 대한 전체적인 기존 관류액의 영향에 초점을 맞추었다는 점을 강조하는 것이 중요합니다. NMP 동안 각 관류액 성분의 개별적인 영향과 장점을 설명하기 위해서는 추가 연구가 필요합니다.
