NOD/Shi-scid IL-2R null 마우스의 자발성 과립구 백혈병

추상적인:여기, 우리는 51-주된 남성 NOD/Shi-에서 자발성 과립구성 백혈병이 발생한 사례를 보고합니다.SCID는일-2R 널(NOG) 마우스. 마우스가 보여줬어요진행성 빈혈그리고거친 호흡 운동. 육안으로 보면 비장이 변색되고 비대해졌습니다. 조직학적으로 골수는흉골대퇴골은 세포질이 풍부하고 거의 모든 물질로 채워져 있습니다.신생물 세포. 신생물 세포의 핵은 크고 타원형에서 약간 불규칙한 형태였으며 소수의 세포가신장- 또는 고리 모양의 핵.종양성 세포장기에 광범위하게 침윤되었으며, 비장과 간이 두드러지게 침범되었습니다. 면역조직화학적으로 비장의 적색수질과 간의 굴모양체에 있는 대규모의 신생물 세포 집단은 다음과 같은 양성 반응을 보였습니다.골수과산화효소. 본 증례는 조직학적 소견을 토대로 다음과 같이 진단되었다.과립구 백혈병. 이 새로운 정보는자연 종양추가 연구에서 이 마우스 계통을 적절하게 사용하는 데 도움이 될 수 있습니다. (DOI: 10.1293/tox.2020-0092; J Toxicol Pathol 2021; 34: 241–244)

키워드: 과립구 백혈병, NOG 마우스, 자연 종양

신장 기능을 위한 25% 에키나코사이드와 9% 액테오사이드가 함유된 천연 유기농 시스탄체 추출물을 얻으려면 여기를 클릭하세요

Wecistanche의 지원 서비스 - 중국 최대의 cistanche 수출업체:

이메일:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/전화:+86 15292862950

더 많은 사양을 보려면 쇼핑하세요.

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

자발성 과립구 백혈병일부 마우스 계통에서는 화학 물질과 전리 방사선이 발생률을 증가시킬 수 있지만 여러 계통의 마우스에서는 거의 보고되지 않습니다. NOD/Shi-scid IL-2R null(NOG) 마우스는 심각한면역 결핍 동물IL-2 수용체 사슬(IL2R c)이 NOD-scid 계통으로 녹아웃되어 T-, B- 및 자연 살해 세포와 제대로 기능하지 않는 대식세포 및 수지상 세포에 결함이 나타납니다3. 이 마우스 계통은 이종 세포의 생착이 현저히 우수하기 때문에 인간 유래 세포/조직을 이용한 재생의학용 생물학적 제제의 품질과 안전성을 평가하기 위한 종양원성 시험과 같은 비임상 시험에 사용됩니다4-6. 면역 결핍 상태와 이종이식에 대한 영향이 잘 연구되었지만 흉선 림프종과 같이 이 마우스 계통에서 발생하는 자연 종양에 대한 정보는 거의 없습니다.유방선 선종/선암종, 기관지폐포암종, 횡문근육종및 기형종7. 여기에서는 51-주된 수컷 NOG 마우스에서 과립구성 백혈병이 발생한 사례를 보고합니다.

동물은 6주령에 In-Vivo Science Inc.(일본 가나가와)로부터 입수되었으며 아무런 치료도 받지 않은 상태로 유지되었습니다. 동물을 개별적으로 환기되는 케이지 시스템(Maxi Miser Caging System, Oriental Giken Inc., Tokyo, Japan)이 있는 플라스틱 케이지에 넣어서 환경적으로 제어된 차단 시스템실 내에서 사육했으며, 이 케이지는 22 ± 2도의 온도로 유지되었습니다. 습도 50 ± 20% 및 12-시간의 명암 주기. 마우스에게 고압멸균된 수돗물과 자유롭게 멸균된 펠릿 사료(CRF-1; Charles River Japan, Inc., Tokyo, Japan)를 먹였습니다. 동물은 AAALAC International의 인증을 받은 CMIC Pharma Science Co., Ltd.의 기관 동물 관리 및 사용 위원회가 승인한 프로토콜에 따라 처리되었습니다.

이 마우스는 49주에서 51주령 사이에 빈혈, 거친 호흡 운동, 체중 감소 등 쇠약의 임상 징후를 보였습니다. 동물은 51주령에 안락사되었습니다. 부검에서 비장은 변색되고 비대해졌습니다. 다른 기관에서는 명백한 비정상적인 육안 소견이 관찰되지 않았습니다. 흉선과 림프절은 정상적인 NOG 생쥐와 유사하게 위축되었습니다.

모든 장기 및 조직 샘플은 정기적으로 수집되어 10% 중성 완충 포르말린에 고정되고 파라핀에 포매되어 약 3μm로 절단되었습니다. 그의 병리학적 검사를 위해 절편을 헤마톡실린 및 에오신(HE)으로 염색하였다. 비장 및 간 절편을 골수 세포 마커인 토끼 항-인간 골수과산화효소(MPO) 다클론 항체(Dako Japan, Tokyo, Japan), 토끼 항-인간 CD3 단일클론 항체(Nichirei Biosciences Inc., Tokyo, Japan)에 대해 면역조직화학적으로 염색했습니다. )를 T 세포 마커로 사용하고 토끼 항-인간 Pax-5 단일클론 항체(Abcam Inc., Cambridge, UK)를 B 세포 마커로 사용합니다8. 절편을 실온에서 1시간 동안 항체와 함께 인큐베이션하고, 발색원으로서 3,3'-디아미노벤지딘/H2O2를 갖는 Histofine® MOUSESTAIN KIT(Nichirei Biosciences Inc.)를 사용하여 면역검출을 수행했습니다. 면역염색된 부분은 다음과 같았다.헤마톡실린으로 대조염색됨.

조직병리학적으로 흉골과 대퇴골의 골수는 세포질이 풍부하고 거의 전적으로 종양성 세포로 채워져 있습니다(그림 1A). 지방조직이 완전히 옮겨졌습니다. 때때로 골수에 적혈구 및 거핵구 요소로 구성된 세포 초점이 있었는데, 이는 의 잔재로 간주되었습니다.정상적인 조혈. 대부분의 종양성 세포는 큰 타원형에서 약간 불규칙한 모양의 핵과 하나 이상의 눈에 띄는 핵소체를 포함하는 망상 염색질을 특징으로 하는 폭발적인 외관을 보였습니다. 신장 모양이나 고리 모양의 핵을 가진 세포가 소수 있었고, 잎 모양의 핵을 가진 세포도 몇 개 있었습니다(그림 1B). HE로 염색된 부분에서는 종양성 세포의 세포질 내 과립이 뚜렷하지 않았습니다. 골수에서는 수많은 유사분열 모양이 발견되었으며, 간헐적으로 세포사멸체가 관찰되기도 했습니다. 종양성 세포는 골막과 주변 골격근을 현저하게 침범했습니다. 종양성 세포가 다른 기관 및 조직으로 광범위하게 침윤되었으며, 비장과 간이 두드러지게 침범되었습니다. 비장에서는 적색수질 전체에 걸쳐 종양성 세포가 관찰되었다(그림 2). 종양성 세포의 피막 침윤이 분명했습니다. 소수의 적혈구 계열과 거핵구가 관찰되었습니다. 세포질에 하나 이상의 골수 세포를 포함하는 거대핵세포가 때때로 관찰되었는데, 이는 emperipolesis를 암시합니다. 간에서는 신생물 세포가 글리슨 피막과 간 동양혈관에 광범위하게 침투했습니다(그림 3). 신장 또는 고리 모양의 핵을 가진 종양 세포도 일부 혈관에서 뚜렷이 나타났습니다. 눈에 띄는 종양성 세포 침윤이 있는 문맥 주위 일부 간세포는 변성 또는 괴사를 보인 반면, 간 소엽의 정상적인 구조는 그대로 유지되었습니다. 종양성 세포 침윤은 폐의 폐포벽 및 혈관주위 영역, 신장의 인터 스타디움, 부신의 동양동체, 위관(위 및 장)의 점막 및 점막하층을 포함한 다른 기관에서도 발견되었습니다. 면역조직화학적으로, 비장의 적색수질(그림 4)과 간의 동양혈관에 있는 대규모의 신생물 세포 집단은 MPO에 대해 양성이었습니다. CD3 및 Pax-5 양성 세포는 검출되지 않았습니다. CD3 및 Pax{11}} 면역염색 결과는 조직학적으로 저형성이었으며 CD3 또는 Pax{13}} 양성 세포가 없는 정상 NOG 마우스의 비장의 결과와 유사했습니다.

면역조직화학 조사에 따르면 종양성 세포는 골수성 세포 계통에서 유래한 것으로 나타났습니다. 일부 관련 부위, 특히 비장과 간에서는 소수의 세포가 골수 계열을 구별하는 신장, 고리 또는 잎 모양을 가졌습니다. 이러한 발견은 신생물 세포가 미성숙 과립구로부터 유래되었음을 시사합니다. 심각한 골수생성증의 경우 백혈병에서는 미성숙 세포가 우세한 것과는 대조적으로 모든 유형의 골수성 계열이 발달하는 것으로 분명해질 수 있습니다. 또한, 진행성 빈혈은 과립구 백혈병의 흔한 임상 징후이며, 적혈구 및 거핵구 세포의 증가는 좋지 않습니다1. 명백한 염증 없이 영향을 받은 부위에 잎 모양의 핵을 가진 소수의 과립구 집단은 현재 사례의 소견이 신생물이고 반응성 골수 생성이 아님을 나타냅니다.

과립구 백혈병에서는 골수가 미성숙 및 성숙한 골수 세포로 대체될 수 있습니다. 다른 계통의 쥐에 대한 이전 보고서에서 이러한 종양 세포는 간, 비장, 림프절 등에 완전히 침투했으며, 비장과 간에 있는 이러한 세포는 주로 적색 수질과 글리슨 캡슐 주변에 위치했습니다1. 따라서 본 사례의 백혈병 세포 분포는 이전 사례와 동일했습니다. 세포의 형태에 따라 생쥐의 과립구성 백혈병은 인간 급성 골수성 백혈병과 유사한 청소년형과 인간 만성 골수성 백혈병과 유사한 성숙형의 두 가지 유형으로 분류됩니다1. 청소년의 경우 골수, 비장 및 간의 종양 세포가 제대로 분화되지 않은 세포에 의해 지배되는 반면, 다양한 성숙도를 나타내는 골수성 요소를 볼 수 있으며 일부 성숙한 경우에서는 골수모세포의 비율이 낮습니다2, 9. 현재의 경우, 백혈병 세포는 크고 타원형에서 약간 불규칙한 모양의 핵을 가진 미성숙 형태가 지배적이었습니다. 또한, 진행성 빈혈, 호흡곤란 등 전반적인 건강악화가 급격히 진행되었다는 임상소견을 고려하여, 따라서 본 사례는 청소년형으로 추정된다.

그림 1. 대퇴골 골수의 조직학적 이미지. A: 종양성 세포가 광범위하게 증식하여 골수를 대체합니다. B: 핵은 크고 타원형에서 약간 불규칙한 모양이다. 소수의 세포에는 신장형(노란색 화살촉), 고리형(녹색 화살촉) 또는 엽형(흰색 화살촉) 모양의 핵이 있습니다. 유사분열 수치는 흰색 화살표로 표시됩니다. 그는 얼룩이 진다. 검정색 막대=50 μm(A), 10 μm(B).

NOG 마우스에 대한 이전 간행물에서 종양성 병변은 일반적으로 흔하지 않았습니다. 그러나 흉선 림프종은 16주에서 40주 사이의 연령군에서 0.82%로 보고되었습니다7, 10. 우리가 아는 한, 자발적 과립구 백혈병은 이전에 NOG 마우스에서 보고된 적이 없습니다. B6C3F1 및 BALB/c를 포함한 여러 계통의 생쥐에서는 과립구 백혈병이 거의 발생하지 않았으며2, 11 생후 12개월 이하의 생쥐에서는 보고된 바가 없습니다. 본 증례는 상대적으로 어린 나이인 51주령에 과립구백혈병이 발생하였다. 자연 종양에 대한 이 새로운 정보는 추가 연구에서 이 마우스 계통을 적절하게 사용하는 데 도움이 될 수 있습니다.