높은 항산화 수치, 자유 라디칼 소거 활성, 항 티로시나아제 및 항 콜라게나아제 활성을 가진 태국 식물
Mar 19, 2022
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Moragot Chatatikun1 및 Anchalee Chiabchalard2
추상적인
배경:햇빛의 자외선은 활성산소(ROS)의 과잉 생산을 유도하여 피부 광노화 및 색소 침착 장애를 유발합니다. 최근 천연물에서 유래한 새로운 미백 및 주름 방지 화합물에 대한 관심이 높아지고 있습니다. 이 연구의 목적은 14가지 태국 식물 추출물에서 ROS를 감소시키는 제품을 찾는 것이었습니다.
행동 양식:총 페놀과플라보노이드콘텐츠,항산화제활동,안티티로시나제활성 및 항 콜라게나제 활성에 대해, 우리는 다른 용매(석유 에테르, 디클로로메탄 및 에탄올)를 사용하여 제조된 14가지 태국 식물의 추출물을 비교했습니다.항산화제활성은 DPPH 및 ABTS 분석에 의해 결정되었습니다.
결과:14가지 태국 식물 추출물의 총 페놀 함량은 에탄올에서 가장 높은 수준으로 나타났으며, 그 다음으로 디클로로메탄 및 석유 에테르 추출물이 그 뒤를 이었습니다.플라보노이드함량은 일반적으로 디클로로메탄 분획에서 발견되었습니다. 소거 활성은 DPPH 및 ABTS 분석에 의해 평가된 대로 7-99% 소거 범위였습니다. Ardisia elliptica Thunb의 에탄올 잎 추출물. Cassia alata (L.) Roxb가 페놀 함량, 항산화 활성 및 콜라게나제 억제가 가장 높았습니다. 추출물이 가장 풍부했습니다플라보노이드콘텐츠. 흥미롭게도 Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb의 에탄올 분획인 세 가지 식물 추출물. 및 Senna alata(L.) Roxb. 높은항산화제콘텐츠와 활동을 모두 크게 억제했습니다.티로시나제및 콜라게나제.
결론:우리의 연구 결과는 Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb의 에탄올 분획이 있음을 보여줍니다. 및 Senna alata(L.) Roxb. 주름개선제, 미백제 등 화장품의 잠재적 원료로서의 가능성을 보여주고 있습니다.
키워드:Ardisia elliptica Thunb.,항산화제콘텐츠, 청소 활동,항티로시나제활성, 항콜라게나제 활성
배경
햇빛으로부터의 자외선(UVR)은 비흑색종 및 흑색종 피부암의 가장 중요한 위험인자입니다[1]. 햇빛, 특히 UVA 및 UVB에 대한 과다 노출은 지질, 단백질 및 디옥시리보핵산을 손상시키는 반응성 산소 종(ROS)의 과발현을 유도합니다. 콜라겐은 피부의 진피층에 있는 세포외 기질의 주요 기초입니다. 과도한 ROS는 콜라겐을 분해하는 프로테아제인 콜라게나아제의 발현을 증가시켜 피부의 광노화 및 주름을 유발할 수 있습니다[2]. 또한, 자외선 노출은 멜라닌 생성을 유도하여 과다색소침착을 유발합니다.티로시나제피부 색소 침착을 시작하는 핵심 효소입니다. 첫째, L-티로신은 티로시나제에 의해 3,{2}}디히드록시페닐알라닌(L-DOPA)으로 히드록실화됩니다. 이어서, L-DOPA는 티로시나제에 의해 DOPA 퀴논으로 산화됩니다. DOPA 퀴논은 5,{6}}디히드록시인돌(DHI) 또는 5,{8}}디히드록시인돌{9}}카르복실산(DHICA)[3]으로 전환될 수 있는 DOPA크롬으로 추가 전환됩니다. 현재의 피부노화 치료법은 표피층을 벗겨내는 하이드록실산, 거칠어진 피부를 감소시키는 레티노이드, 콜라겐을 피부에 주입하여 투여하는 피부 필러 등이 있다. 그러나 이러한 치료는 과색소침착, 염증, 세포독성, 자극, 세균 감염 등의 부작용이 있다[4]. 대표적인 미백제인 하이드로퀴논은티로시나제,하지만 부작용으로는 피부염, 부종, 알레르기 반응, 오크로노시스 등이 있다[5]. 최근 연구자들은 현재 치료의 대안으로 UV 유도 ROS를 억제하고 효소를 억제하며 멜라닌 형성을 감소시키는 천연물에 초점을 맞추고 있습니다. 예를 들어, 알부틴, 알로에신, 젠티신산과 같은 활성 식물 화합물,플라보노이드, 헤스페리딘, 감초, 나이아신아마이드, 효모 유도체 및 폴리페놀은 세포독성 토멜라노사이트 없이 멜라닌 생성을 억제합니다[6]. 따라서 식물은 햇빛 노출로 인한 주름 형성과 과색소침착을 줄일 수 있습니다.
이 연구의 목적은 3가지 다른 용매로 추출한 14개의 태국 식물을 주름 개선 및 피부 미백 성분으로 분석하는 것이었습니다. 개수항산화제페놀 및플라보노이드자유 라디칼 소거 활성 및 항콜라게나아제와의 상관관계에 대해 평가되었습니다.항티로시나제활동. 추출물은항산화제프리라디칼을 제거하고 주름과 색소 형성에 관여하는 효소를 억제합니다. 우리는 Ardisia elliptica Thunb.,Annona squamosa L.을 식별하고 Senna alata(L.) Roxb는 화장품에 사용하기에 매우 유망한 후보입니다.
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행동 양식
화학물질 및 시약
Folin Ciocalteu's 페놀 시약, 탄산나트륨(Na2CO3), 갈산, 케르세틴, 10% 염화알루미늄, 에탄올, 2, 2-디페닐{5}}피크릴히드라질(DPPH), 아스코르비산, 2,2'-Azino- 비스({10}에틸벤즈티아졸린{11}}술폰산)(ABTS), 과황산칼륨, 코직산, 버섯 티로시나제(EC 1.14.18.1), 3,{17}디히드록시-L-페닐알라닌(L- DOPA), N-[3-(2-푸릴) 아크릴로일]-Leu-Gly-Pro-Ala(FALGPA), Clostridium histolyticum의 콜라게나제(EC3.4.24.3), 에피갈로카테킨 갈레이트(EGCG) , 염화나트륨, 염화칼슘 및 디메틸 설폭사이드(DMSO)는 Sigma-Aldrich Chemical Co.(St. Louis, MO, USA)에서 구입했습니다. 석유 에테르, 디클로로메탄, 무수 에탄올, 메탄올, 인산수소이나트륨 및 인산이수소나트륨은 Merck(Darmstadt, Germany)에서 구입했습니다. 모든 화학 물질과 시약은 분석 등급이었습니다.
식물 재료 및 추출
태국 라용성 HRH Princess Sirindhorn Herb Garden에서 13종의 태국 잎을 수집했습니다. 망고스틴은 태국 찬타부리 지방에서 입수했습니다. 이 식물들은 태국의 출라롱콘 대학교 이학부 식물학과 식물표본관에 인증되어 기탁되었습니다. 학명, 바우처 번호 및 식물 부분은 표 1에 나와 있습니다. 식물은 Soxhlet 장치를 사용하여 추출되었습니다. 간단히 말해서, 건조된 식물 10g을 석유에테르, 디클로로메탄 및 에탄올로 별도로 추출했습니다. MiVac Quattro 농축기를 사용하여 감압하에 진공 회전 증발기를 사용하여 용매를 제거하였다. 농축된 시료를 DMSO에 100mg/ml로 녹이고 사용할 때까지 -20도에서 보관했습니다. 건조 추출물의 수율은 건조 식물 재료의 퍼센트 w/w로 표 1에 제시되어 있습니다.
총 페놀 함량 측정
식물 추출물의 총 페놀 함량은 Folin-Ciocalteu 방법을 사용하여 평가되었습니다[7]. 간단히 말해서, 증류수 중 1 mg/ml의 추출물 5{8}} ul를 10% Folin-Ciocalteu 시약 50ul 및 0.1M Na2CO3 50ul와 혼합했습니다. 반응 혼합물을 암실에서 실온에서 1시간 동안 인큐베이션하였다. 750 nm에서의 흡광도는 마이크로플레이트 판독기(Biotek, USA.)로 측정되었습니다. 1.56 ~ 100 ug/ml의 갈산을 표준으로 사용했습니다. 추출물의 총 페놀 함량은 건조 식물 재료 g당 갈산 당량 mg(GAE)으로 표시됩니다. 모든 샘플은 삼중으로 분석되었습니다.
플라보노이드 함량 측정
총플라보노이드함량(TFC)은 염화알루미늄(AlCl3) 비색 분석을 사용하여 결정되었습니다[7]. 간단히 말해서, 80% 에탄올 중 1mg/ml의 추출물 50ul를 96 벽판의 웰에 있는 2% AlCl3 용액 50ul와 혼합했습니다. 플레이트를 실온에서 15분 동안 인큐베이션하였다. 435 nm에서의 흡광도는 마이크로플레이트 리더를 사용하여 측정하였다. 1.56 ~ 100ug/ml의 케르세틴이 표준으로 사용되었습니다. 총 플라보노이드 함량은 건조 식물 재료 g당 퀘르세틴 당량 mg(QE)으로 표시됩니다. 샘플을 삼중으로 분석하였다.
DPPH 소거 활성
DPPH 소거 활성 분석은 Yamasaki et al. [8]. DPPH 용액은 각 분석에 대해 새로 준비되었습니다. 간단히 말해서, 96웰 플레이트에서 1{11}}0 ug/ml 추출물 또는 1.56 ~ 100 ug/ml 아스코르브산 표준을 무수 메탄올에 180 ul의 DPPH 시약과 혼합했습니다. 반응 혼합물을 암실에서 실온에서 30분 동안 인큐베이션하였다. 그런 다음 마이크로플레이트 리더로 517 nm에서의 흡광도를 측정하였다. 실험은 세 번 수행되었습니다. DPPH의 517 nm에서의 흡광도는 0.70 ± 0.02이었고 흡광도 감소는 소거 활성을 측정하였다. 소거능은 소거 활성(%)= 100 퍼센트 × [(대조군 Δ517 - 시료 Δ517)/대조군 Δ517]로 계산하였다. 추출물의 DPPH 소거 활성을 아스코르브산과 비교하여 mg비타민 C 당량으로 표시항산화제건조 플랜트 재료당 용량(VCEAC). IC5{1}}는 농도에 대한 억제율 그래프에서 결정되었습니다(각 추출물의 0.78–100 ug/ml).
ABTS 청소 활동
ABTS 자유 라디칼 소거 활성은 앞에서 설명한 대로 수행되었습니다[9]. ABTS• 플러스 작업 시약은 7mM ABTS•와 2.45mM 과황산칼륨을 8:12 부피/부피 비율로 혼합하여 준비했습니다. 작업 용액을 암실에서 실온에서 16-18시간 동안 보관하였다. ABTS• 플러스 용액을 무수 에탄올로 희석하여 734 nm에서의 흡광도가0.7{11}} ± 0.02가 되도록 했습니다. 그런 다음, 100 ug/ml 추출물 또는 1.56 ~ 100 ug/ml 무수 에탄올 중 아스코르브산 표준물을 96웰 플레이트의 웰에 있는 180 ul의 ABTS• 플러스 작업 시약에 첨가했습니다. 플레이트를 실온에서 45분 동안 인큐베이션하고 734 nm에서 흡광도를 측정했습니다. 실험은 삼중으로 수행되었습니다. 소거능은 소거 활성(%)= 100 × [(대조군의 Δ734 - 시료의 Δ734)/대조군의 Δ734]로 계산하였다. 추출물의 ABTS 소거능을 아스코르브산과 비교하여 비타민 C 등가량으로 제시항산화제건조 식물 재료 g당 용량(VCEAC). IC50은 농도에 대한 억제율 그래프에서 결정되었습니다(각 추출물의 15.62–1000ug/ml).
버섯 티로시나아제 억제 결정
도파크롬 방법은 약간의 변형으로 수행되었다[10]. 간단히 말해서, 식물 추출물 또는 DMSO(대조군) 20ul, 버섯 티로시나제 203.3units/ml 20ul 및 pH 6.8에서 20mM 인산 완충액 140ul를 25도에서 10분 동안 사전 인큐베이션했습니다. 사전 인큐베이션 후, 20 ul의 2.5 mM L-DOPA를 첨가하고 샘플을 25도에서 추가로 20분 동안 인큐베이션하였다. 마이크로플레이트 리더로 492 nm에서 도파크롬의 양을 측정하였다. Kojic acid(KA)는 억제에 대한 양성 대조군으로 사용되었습니다. 티로시나제 활성의 퍼센트 억제(퍼센트)는 퍼센트로 표현되었습니다.티로시나제억제 {{0}} × [(대조군 Δ492 - 샘플 Δ492)/대조군 Δ492]. 추출물과 코직산의 최종 농도는 각각 1 및 0.1 mg/ml였다. IC50은 백분율 그래프에서 결정되었습니다.티로시나제농도에 대한 억제(각 추출물의 15.62–1000 ug/ml).
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콜라게나제 억제의 결정
콜라게나제 억제는 이전에 기술된 방법에 의해 결정되었다[11]. 간단히 말해서, 10mM CaCl2 및 400mM NaCl을 함유하는 50mM Tricine 완충액 중 0.25units/ml의 Clostridium histolyticum의 콜라게나제 40ul 및 50mM Tricine 완충액 10ul를 10ul와 혼합했습니다. 추출물 또는 DMSO(대조군). Epigallocatechin gallate(EGCG)는 양성 대조군으로 사용되었습니다. 실온에서 15-분 인큐베이션한 후 N-[3-(2-푸릴)아크릴로일]-Leu-Gly-Pro-Ala(FALGPA) 50ul를 첨가했습니다. 흡광도는 340 nm에서 즉시 20분 동안 지속적으로 측정되었습니다. 효소 활성은 시간 간격 동안 감소된 흡광도에 의해 평가되었습니다. 콜라게나아제 활성의 억제율은 100 × [(대조군 활성 - 시료 활성)/대조군 활성]으로 계산되었습니다. 추출물과 에피갈로카테킨 갈레이트의 최종 농도는 각각 1 및 0.1 mg/ml였다. IC50은 농도에 대한 콜라게나아제 억제 백분율 그래프에서 결정되었습니다(각 추출물의 15.62–1000 ug/ml).
통계 분석
모든 실험은 삼중으로 수행되었으며 결과는 평균 ± 표준 오차로 표시됩니다. 사이의 상관계수(R2)항산화제함량 및 항산화 활성은 SigmaPlotversion 12.2 소프트웨어를 사용하여 결정되었습니다. 두 평균 간의 차이는 스튜던트 t-검정을 사용하여 평가되었습니다. 차이는 P-값이 0.05보다 작을 때 유의미한 것으로 간주되었습니다.
결과
추출 수율
표 1은 이 연구에 사용된 14개의 태국 식물의 학명, 바우처 번호 및 식물 부분을 보여줍니다. 추출물의 퍼센트 수확량은 중량 기준으로 0.73퍼센트에서 31.11퍼센트 사이였습니다(표 1). 아디시아 엘립티카 툰브. 석유 에테르(19.89%)와 에탄올 추출물(31.11%)에서 가장 높은 수율을 보인 반면 가르시니아 망고스타나(Garcinia mangostana)는 수율을 보였다. 디클로로메탄 추출(11.07%)에서 가장 높은 퍼센트 수율을 가졌다.
14가지 태국 식물의 페놀 함량
따라서 식물의 총 페놀 함량은 Folin-Ciocalteu 방법으로 결정되었습니다. 추출물은 표 2에 나타난 바와 같이 페놀의 수에 있어서 넓은 범위를 보였고, 추출물 사이에 33-배 정도 값이 다양하였다. Ardisiaelliptica Thunb. 세 가지 유형의 추출물 모두에서 페놀 함량이 가장 높았고 Stemona curtissi Hook에서 페놀 함량이 가장 낮았습니다. 에프. 석유 에테르 추출물.
14가지 태국 식물의 플라보노이드 함량
페놀과 유사하게 총플라보노이드함량은 건조 물질 g당 2.{2}}4 ± 0.16에서 31.38 ± 0.81mg QE 범위로 식물 종에 따라 상당히 다양했습니다(표 2). 일반적으로 디클로로메탄 추출은 가장 높은플라보노이드다른 용제에 비해 수준입니다. 모든 추출물 중에서 가장 높은 플라보노이드 함량은 Senna alata(L.) Roxb 잎의 에탄올 추출물에서 발견되었습니다(31.38 ± 0.81 mg QE perg dry material). 한편, Ardisia elliptica Thunb.(23.14 ± 1.10 mg QE/g 건조 물질). 디클로로메탄 분획에서 가장 풍부한 플라보노이드 함량을 가졌다. 또한, Ipomoea pes-caprae (L.) R.br. 석유 에테르 추출물 중 플라보노이드 함량이 가장 높았습니다(건조 물질 g당 27.48 ± 2.59 mg QE). 가장 낮은 검출 가능한 플라보노이드 수준은 Daturametel L의 에탄올 추출물에서였습니다. 극명한 대조로,플라보노이드Stemona curtisii Hook.f.의 석유 에테르 및 디클로로메탄 추출물과 Streblus asper Lour의 석유 에테르 추출물에서는 발견되지 않았습니다. 및 Phyllanthus acidus (L.) Skeels. 총 플라보노이드 함량은 총 페놀 함량과 상관관계가 없습니다(R{0}}.0284, 그림 1a).
14가지 태국 식물 추출물의 DPPH 라디칼 소거 활성
DPPH를 지표로 하는 활성산소 소거활성은 기본항산화제분석 [12]. 표 3에서 볼 수 있듯이 추출물의 소거 활성은 7.11 ± 0.59%에서 96.17 ± 0.05% 범위로 크게 다양했습니다. Ardisia ellipticaThunb 에탄올 추출물은 96%에서 가장 높은 소거 활성을 보였습니다. 게다가 그 다음으로 강한항산화제 activities (>Stemonacurtisii Hook.f., Annona squamosa L., Phyllanthus acidus(L.) Skeels의 에탄올 분획에서 90%가 관찰되었습니다. 가르시니아 망고스타나 린. 다른 용매의 경우 Ardisia elliptica Thunb도 석유 에테르 분획 중에서 가장 풍부한 소거 활성을 보였고, Garcinia mangostana L.는 디클로로메탄 분획에서 가장 높은 항산화 활성을 나타냈다. 가장 낮은 소거 능력은 석유 에테르 분획의 Croton sublyratus Kurz에서 감지되었습니다. 7개의 석유 에테르 추출물과 2개의 디클로로메탄 추출물에서 소거 활성이 검출되지 않았다.
14가지 태국 식물 추출물의 ABTS 라디칼 소거 활성
항산화제식물에서 수성 및 지질상의 활성도는 ABTS를 사용한 탈색 분석에 의해 평가되었습니다[13]. 다시 말하지만, 아스코르브산이 표준으로 사용되었습니다.항산화제. As with the DPPH assay, scavenging activity in the ABTS assay varied greatly among the plant preparations with a similarly broad range from 8.03 ± 0.54% to 99.84 ± 0.07% (Table 4). Furthermore, the next strongest scavenging activities (> 90%) were observed in the same 4 ethanol fractions as shown by the DPPH assay. In addition, no scavenging activity was found in the same 5 petroleum ether extracts. In general, the values obtained with the ABTS assay were higher than the DPPH values. Hence, activity in the ethanol extract from Senna alata (L.) Roxb. was now observed as >90%, 스캐빈저 활성은 모든 디클로로메탄 추출물과 Annona squamosa L. 및 Ipomoea pes-caprae(L.) R.br의 석유 에테르 추출물에서 검출되었습니다. DPPH 분석에서는 검출되지 않았습니다.
식물 추출물에 의한 Tyrosinase 활성 억제
태국 식물의 화합물이 버섯을 억제하는 능력티로시나제L-DOPA를 기질로 사용하여 시험관 내 분석을 사용하여 활성을 평가했습니다. Kojic acid는 알려진 억제제로 작용하여 93.38 ± 1.63%의 최대 효소 억제를 유발했습니다. 표 5에 나타난 바와 같이 에탄올 추출물만이 Ardisia elliptica Thunb와 함께 tyrosinase 활성을 유의하게 억제하였다. 준비는 예외입니다. Ardisia elliptica Thunb의 석유 에테르 및 디클로로메탄 분획. 약 20% 정도 tyrosinase 활성을 억제했습니다. Rhinacanthus nasutus(L.) Kurz의 에탄올 분획물(IC 50 값 271.50ug/ml)은 가장 강력한 티로시나제 억제제였으며 Ardisia ellipticaThunb의 에탄올 추출물이 뒤를 이었습니다. 및 Phyllanthus acidus (L.) Skeels. 다른 에탄올 분획은 효소 활성을 20% 이상 크게 감소시킨 반면(표 5), 나머지 추출물은 검출 가능한 억제 활성을 나타내지 않았습니다(데이터는 표시되지 않음).
14개 식물에 의한 Collagenase 활성 억제
추출물은 Clostridium histolyticum collagenase와 N-[3-(2-furyl)acryloyl]-Leu-Gly-Pro-Ala(FALGPA)를 기질로 사용하여 항콜라게나제 활성을 테스트했습니다. 에피갈라테카테킨 갈레이트는 알려진 콜라게나제 억제제와 효소 활성을 90.51 ± 2.79% 감소시켰습니다. 표 5에 나타낸 바와 같이, 4개의 에탄올 추출물만이 검출가능한 콜라게나제 억제 활성을 함유하였다. 억제를 일으키는 것 중 Ardisia elliptica Thunb. (IC 50 값 157.78 ug/ml)이 가장 높은 콜라게나아제 억제 수준을 보였고, Annona squamosa L.(IC 50 값 426.67 ug/ml), Senna alata(L.) Roxb., Croton sublyratusKurz 순이었다. 주문하다. 다른 식물 추출물은 이 연구에서 사용된 반응 조건에서 콜라게나제 활성을 유의하게 억제하지 않았습니다(데이터는 표시되지 않음).
논의
태양 복사는 피부 손상의 중요한 환경 요인이며 피부암을 유발할 수 있습니다[14]. 자외선은 염증 반응, 세포외 기질 분해 및항산화제고갈 [15, 16]. UV는 과색소침착과 콜라게나제 발현을 유도하는 활성산소종(ROS)의 형성을 유발합니다[17, 18]. 우리 연구에서는 주름 개선 및 피부 미백 성분으로서의 잠재력에 대해 3가지 다른 용매로 추출한 14개의 태국 식물을 조사했습니다. 이 연구에서 우리는 Soxhlet 장치를 사용하여 식물 추출을 위해 석유 에테르, 디클로로메탄 및 에탄올을 사용했습니다. 아디시아 엘립티카 툰브. 석유 에테르와 에탄올 추출물에서 가장 높은 수율을 보인 반면 Garcinia mangostana L.는 디클로로메탄 추출에서 가장 높은 수율을 보였습니다. 이 용매는 극성이 증가하는 일련의 유기 용매입니다. 퍼센트 수확량의 변화는 식물 종에 따라 다르며 아마도 식물의 화학적 조성의 차이를 반영했을 것입니다.
페놀은 식물에서 발견되는 가장 큰 파이토케미컬 그룹이며 인간을 포함한 동물에서 다양한 생물학적 활성을 가지고 있습니다[19]. 식물의 총 페놀 함량은 Folin Ciocalteu 방법으로 측정했습니다. 전반적으로 에탄올 분획의 페놀 함량이 가장 높았고 디클로로메탄이 그 뒤를 이었습니다. 반면 극성이 낮은 석유 에테르는 다른 용매에 비해 페놀 함량이 가장 낮았습니다. 이 연구에서 Ardisia elliptica Thunb. 세 가지 유형의 추출물 모두에서 페놀 함량이 가장 높았습니다. 이전 연구에서 Ardisia elliptica Thunb의 디클로로메탄 잎 추출물의 페놀 함량은 건조 식물 재료 g당 101 ± 1.3 mg GAE로 나뭇가지 추출물의 함량보다 많습니다[20]. 또한, 잘 익은 아디시아 열매의 메탄올 추출물은 추출물 100g당 5.64±0.37g의 GAE를 함유했습니다[21]. 따라서 Ardisia ellipticaThunb의 잎과 열매. 메탄올, 디클로로메탄, 에탄올로 쉽게 추출할 수 있는 페놀 함량이 높습니다.
플라보노이드꽃, 잎, 과일 및 종자에 있는 안료입니다. 이 화합물은 식물의 2차 대사산물이며 식물 종에 널리 분포되어 있습니다. 우리의 결과는 Senna alata (L.) Roxbleaves의 에탄올 추출물에서 가장 높은 플라보노이드 양이 발견되었음을 보여주었습니다. 이전 연구에서는 Senna alata(L.) Roxb의 물(100g당 4.25mg QE)과 메탄올 분획(100g당 3.97mg QE)에서 높은 플라보노이드 함량이 발견되었습니다.[23]. 따라서 Senna alata(L.) Roxb 제제는 에탄올, 메탄올 및 물을 포함한 극성이 높은 용매로 추출할 때 플라보노이드 함량이 높습니다. Ardisiaelliptica Thunb. 디클로로메탄 분획에서 가장 풍부한 플라보노이드 함량을 가졌다. 이 식물의 열매는 또한 추출물 g당 36.91 ± 2.37 mg QE의 높은 플라보노이드 함량을 가지고 있습니다[24]. 따라서 Ardisia elliptica Thunb의 열매와 잎. 리친 플라보노이드입니다. 총 플라보노이드 함량은 총 페놀 함량과 상관관계가 없었습니다. 하지만,플라보노이드UVB 차단[25], 항염[26], 항간독성[27] 및 항암[28]과 같은 많은 생물학적 활성을 가지고 있습니다.
DPPH 및 ABTSassay를 사용한 자유 라디칼 소거 활성. DPPH 분석에서 DPPH는 수소 원자를항산화제[29]. 우리는 Ardisiaelliptica Thunb 에탄올 추출물이 가장 높은 소거 활성을 가지고 있음을 발견했습니다. 다른 연구자들은 또한 Ardisia elliptica Thunb의 디클로로메탄 분획을 보고했습니다. 잎과 줄기에는 높은 수준의항산화제활성은 DPPH 분석에 의해 결정되며, 따라서 이 식물은 한방 치료로서 추가로 조사하는 것이 매우 흥미롭습니다[20]. 극성이 높은 에탄올 분획의 추출물이 더 잘 나타남항산화제활성다이클로로메탄과 석유 에테르를 포함하는 극성이 낮은 분획보다. 에탄올 추출물은 다른 추출물에 비해 활성산소 소거 활성이 가장 높았고 모든 에탄올 추출물이 활성을 나타냈다. ABTS 분석에서 ABTS는 과황산칼륨을 첨가하여 라디칼 양이온으로 전환됩니다. 항산화제가 존재하면 반응성 ABTS 양이온(또는 ABTS• plus )은 무색의 자연적 형태로 전환됩니다[9]. DPPH 분석과 일치하게, 에탄올 추출물은 다른 추출물과 비교하여 가장 높은 수준의 소거 활성을 함유했습니다. 다시 말하지만, DPPH 분석에서 나타난 바와 같이 에탄올, 디클로로메탄 및 석유 에테르 추출물에서 가장 높은 소거 활성이 동일한 식물에서 나타났습니다. DPPH 및 ABTS 분석 결과는 예상대로 높은 상관관계가 있었습니다(그림 1f).
그러나 총플라보노이드식물 추출물의 함량은 DPPH 분석법(그림 1c) 또는 ABTS 분석법(그림 1e)에 의해 검출된 자유 라디칼 제거제 활성과 상관관계가 없었습니다. 사이에 유의미한 관계가 없다는 우리의 발견플라보노이드ABTS 분석을 사용한 내용 및 소거 활성은 다른 조사자의 결과와 일치합니다[30]. 대조적으로, 식물 제제의 총 페놀 함량은 이전 연구와 일치하지 않는 두 분석(그림 1b 및 d)에 의해 측정된 소거 활성과 양의 상관 관계가 있습니다. 특히, 소거 활성은 총 페놀 함량과 에탄올 및 디클로로메탄과 같은 극성이 높은 용매에 따라 달라집니다. 이러한 결과는 페놀 함량이 주요 성분임을 시사합니다.항산화제14개의 태국 공장에서 활동합니다.
피부와 모발의 주요 색소인 멜라닌은 멜라노솜 내의 멜라닌 세포에서 합성됩니다. 피부의 멜라닌 과잉 생성 및 축적은 색소 침착 장애 및 미적 문제를 유발할 수 있습니다. 과다색소침착은 피부의 태양에 노출된 부위에서 발생합니다[32]. 멜라닌 생성에서,티로시나제L-티로신이 L-DOPA로 수산화되어 DOPAquinone으로 추가 산화되는 속도 제한 단계의 핵심 효소입니다. 이후 멜라닌 합성의 기질인 DOPAchrome으로 전환된다[3]. 하향 조절티로시나제활동은 감소된 멜라닌 생성에 대한 책임이 있는 것으로 제안되었습니다. 최근 천연물로부터 새로운 미백 식물화학물질의 개발이 증가하는 추세입니다. 우리의 발견은 Rhinacanthus nasutus (L.) Kurz의 에탄올 분획이 가장 강력한 티로시나제 억제제였으며 Ardisia elliptica Thunb의 에탄올 추출물이 그 뒤를 이었습니다. 및 Phyllanthus acidus (L.) Skeels. 분명히, 14개 식물에서 7개 식물, 특히 Ardisiaelliptica Thunb가 높은 페놀 함량을 보였습니다. 및 Annona squamosa L. 또한, Senna alata(L.) Roxb. 가장 부유했다플라보노이드내용티로시나아제 활성을 억제할 수 있습니다. 알부틴, 알로에신, 젠티스산, 플라보노이드, 헤스페리딘, 감초, 나이아신아미드, 효모 유도체, 폴리페놀과 같은 식물의 활성 화합물은 멜라닌 세포에 대한 세포 독성 없이 멜라닌 생성을 억제할 수 있습니다[6].
콜라게나아제는 콜라겐의 X-Gly 결합을 절단하는 막횡단 아연 펩티다아제입니다. 콜라겐은 풍부한 구조 단백질과 세포외 기질 성분입니다[33]. 감소된 콜라겐과 엘라스틴 섬유는 나이가 들면서 증가하고 주름진 피부를 유발하는 UV 방사선에 의한 손상입니다[34]. 콜라게나제 억제는 피부 노화를 방지하기 위해 제안되었습니다. 우리 연구에서 억제를 일으키는 것들 중 Ardisiaelliptica Thunb. 콜라게나제 억제 수준이 가장 높았고 Annona squamosa L., Senna alata(L.) Roxb., Croton sublyratus Kurz가 그 뒤를 이었습니다. 이전 연구에서 코코아 꼬투리 추출물에는 페놀산과플라보노이드엘라스타제와 콜라게나제 활성을 억제하는 것으로 나타났습니다[35]. 특히 3가지 에탄올 추출물(Ardisia elliptica Thunb., Annona squamosa L. 및 Senna alata(L.) Roxb.티로시나제및 콜라게나제. 이 식물은 또한 페놀과 플라보노이드 수치가 높았으며,항산화제활동. 흥미롭게도 이 추출물은 화장품 성분으로 사용할 수 있습니다.
결론
우리의 결과는 14가지 태국 식물의 추출물이 다양한 정도의 총 페놀과플라보노이드추출 용매에 따라 함량 및 자유 라디칼 소거 활성. DPPH 및 ABTS 분석에 의해 평가된 바와 같이 총 페놀 함량과 자유 라디칼 소거 활성 사이에는 높은 상관관계가 있었습니다. Ardisia ellipticaThunb의 에탄올 분획. 페놀 함량은 Annona squamosa L이 그 뒤를 이었습니다. 두 식물 모두 tyrosinase와 collagenase 활성을 유의하게 억제한 반면 Rhinacanthusnasutus (L.) Kurz는 가장 높은 tyrosinase 억제를 보였습니다. 또한, Senna alata(L.) Roxb. 플라보노이드 함량이 가장 풍부하고티로시나제및 콜라게나제 억제 행동. Annona squamosa L., Ardisia elliptica Thunb, Senna alata (L.) Roxb.의 세 가지 식물의 에탄올 분획은 주름 개선 및 피부 미백을 위한 화장품 성분이 될 가능성이 있습니다. 이러한 추출물의 활성 성분과 안전성을 조사하기 위해서는 추가 연구가 필요합니다.
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