CBMSC 노화에 대한 Cur-induced autophagy의 영향을 조사하기 위해

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cBMSC 노화에서 Cur의 보호 효과를 발휘하는 2.5.Autophagy Inovoloes

Cur-유도된 자가포식이 cBMSC 노화에 미치는 영향을 조사하기 위해 RAP(200nM) 또는 3-MA(5mM)를 사용하여 자가포식 수준을 조절했습니다.3-MA는 상당한 억제 작용을 발휘합니다. 미세소관 관련 단백질 1 경쇄 3(LC3), 자가포식 관련 유전자(ATG)7, ATG12 및 비유사 자가포식 활성화 키나제의 mRNA 발현의 유의한 하향조절에 의해 나타나는 자가포식 활성에 대한{12} {14}}(ULK1); 감소된 미세소관 관련 단백질 1 경쇄 3 유형 Ⅱ/I(LC{19}}I/I) 발현 비율; 및 대조군과 비교하여 p62의 증가된 발현(도 5A, B). 따라서 Cur 그룹과 비교하여 3-MA + Cur 그룹에서 자가포식 활성의 감소가 관찰되었습니다(그림 5A, B). 대조적으로, LC3, ATG12 및 ATG7의 상향조절된 mRNA 발현에 의해 입증된 바와 같이, 자가포식 활성의 증가가 RAP 그룹에서 관찰되었으며; LC{27}}I에서 LC{28}}II로의 전환 증가; 및 p62의 분해(그림 5A, B).

첫째, autophagic 활동을 체계적으로 조사했습니다. autophagic 액포(autophagosomes라고도 함)의 형성은 형태학적 관찰에 의해 평가되었으며, 결과는 대조군에 비해 Cur 그룹과 RAP 그룹에서 더 많은 autophagic 액포와 LC3 점이 있는 반면 autophagic 액포의 수와 감소된 수를 나타냅니다. 3-MA 및 3-MA + Cur 그룹에서 더 적은 수의 LC3 점이 관찰되었습니다(그림 5C, E). 또한, LysoTracker 염색은 cBMSC에서 RAP 및 Cur에 의해 리소좀 산성화가 강화되고 감소되었음을 나타냅니다. 3-MA 및 3-MA + Cur 그룹(그림 5D). 결과는 Cur와 RAP가 자가포식 활성화에 유사한 긍정적인 효과를 발휘하고 자가포식 활성이 3-MA에 의해 억제된다는 것을 보여줍니다.cistanche 남근 크기,그러나 자가포식에 대한 3-MA의 억제 효과는 Cur의 사용으로 부분적으로 구제될 수 있습니다.

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autophagy가 CB MSc 노화 조절에 참여하는지 확인하기 위해 약리학 적 치료를 통해 autophagy를 촉진하거나 억제 한 후 노화 관련 표현형을 추가로 조사했습니다. 결과는 Cur 및 RAP 그룹에서 SA{1}}갈양성 세포의 수가 감소한 반면 {{5} }대조군과 비교한 MA군. Cur 그룹과 비교하여 3-MA + Cur 그룹에서 SA- -gal-positive 세포의 수가 크게 증가한 것은 주목할 만합니다(그림). RT-qPCR 분석 결과, RAP 및 Cur 처리는 비교하여 SOX{10}} 및 Nanog의 발현 수준을 증가시키고 IL{11}}, TNF-a, p21 및 p16의 발현 수준을 감소시키는 것으로 나타났습니다. 통제 그룹과 함께. 그러나 3-MA에 의한 자가포식 억제는 p16, p21, TNF- 및 IL{19}}의 발현을 상향 조절했습니다(그림 6C-E). 또한, 대조군과 비교하여 Cur 및 RAP군에서 cBMSC의 집락 형성 효율이 증가한 반면, CFU-F의 수와 크기는 3-MA군에서 유의하게 감소하였다. 또한, cBMSC의 콜로니 형성 수에 대한 Cur의 강화된 효과는 3-MA를 사용한 전처리를 통해 폐지될 수 있는 것으로 나타났습니다(그림 6B).시스탄체 파우더이 증거는 RAP와 Cur가 cBMSC 노화를 개선할 수 있는 반면, 3-MA는 cBMSC 노화를 악화시키고 Cur가 발휘하는 유익한 효과를 약화시킬 수 있음을 나타냅니다.

종합하면, 이러한 결과는 3-MA로 자가포식을 억제하면 cBMSC 노화를 가속화하는 반면 Cur 및 RAP로 자가포식을 활성화하면 cBMSC 노화를 완화함을 시사합니다(그림 6F). 특히, Cur가 발휘하는 보호 효과는 3-MA로 전처리함으로써 약화되었으며(그림 6F), Cur-유도된 자가포식은 cBMSC 노화를 개선하기 위한 잠재적인 분자 메커니즘임을 시사합니다.

3. 토론

유기체는 다양한 조직과 기관에 광범위하게 존재하는 MSC의 독특한 기능적 특성으로 인해 손상된 조직을 지속적으로 복구하고 노화 관련 과정을 지연시킵니다[15]. 불행히도, 나이와 질병은 생체 내 MSC 노화의 핵심 요소이며, 세포 환경의 내부 및 외부 차이는 시험관 내 배양에서 MSC 노화를 가속화하며, 둘 다 면역 억제, 분화 및 이동 능력에 부정적인 영향을 미치고 궁극적으로 자기 효능을 감소시킵니다. -MSC의 수리 및 이식 [7,14,49-51].시스탄체 살사 추출물Oja와 동료들은 인간 BMSC가 임상 등급 배양의 5-9번째 계대에서 증식을 멈추고 비대 및 편평한 형태, 세포 주기 키나제 억제제 p16 및 p21의 활성화, 감소된 증식 속도와 같은 전형적인 노화 표현형을 나타냈다고 지적했습니다. , 그리고 SA- -gal의 향상된 활성 [52]. 분명히, 시험관 내 확장은 시험관 내 세포 노화 연구의 중요한 모델 시스템으로 간주되는 MSC에서 조기 노화를 유발합니다[42, A4, A5]. 우리의 현재 연구는 3차 계대 이전의 cBMSC가 균일한 형태를 나타내었지만 6차 계대 후에 세포 형태, 생리학 및 유전자 발현 측면에서 일련의 변화를 겪는 것으로 관찰되어 조기 노화와 일치함을 발견했습니다(그림 2 및 7). .

Cistanche 캔 안티 에이징

증가하는 증거는 약리학적 자극이 MSC를 노화로부터 구출하기 위한 유망한 접근법임을 나타냅니다[53,54]. 이를 염두에 두고 생체 내 및 시험관 내에서 항염, 항산화 및 항노화 가능성을 결정하기 위해 많은 천연 및 합성 화합물이 광범위하게 조사되었습니다[15,55]. 천연 발생 페놀 화합물로서 Cur는 MSC 생물학에 대한 유익한 효과로 인해 큰 주목을 받았습니다[36,37,56,57]. 그러나 MSC에 대한 Cur 노출의 복잡한 영향은 다른 생물 의학 연구를 실행하기 전에 신중하게 고려해야 합니다. Yang과 동료들은 고농도의 Cur(50 및 100 uM)가 시험관 내에서 인간 BMSC에서 급성 독성 효과를 유도할 수 있는 반면 Cur의 10uM에 대한 지속적인 노출(7일)은 인간 BMSC 증식을 억제하고 세포 사멸을 유도한다고 보고했습니다[58]. 흥미롭게도 다른 연구에서는 Cur(<20 um)for="" 5="" days="" ameliorates="" h,="" o,-induced="" oxidative="" stress="" in="" human="" adscs[56].="" additionally,="" cur="" preconditioning="" （1="" μm="" and5um）="" for="" 24="" or="" 48h="" can="" help="" to="" maintain="" cellular="" viability="" and="" improve="" the="" lifespan="" of="" rat="" adscs[36,57.="" our="" results="" demonstrated="" that="" cur(1="" um="" and="" 10="" μm）="" was="" able="" to="" maintain="" the="" viability="" of="" cbmscs="" and="" alleviate="" cbmsc="" senescence="" after="" exposure="" for="" 24="" h,="" while="" the="" colony-forming="" efficiency="" of="" cbmscs="" was="" significantly="" decreased="" at="" a="" dose="" of="" 10="" μm（figure="" 3）.="" therefore,="" the="" beneficial="" effects="" of="" cur="" （10="" umd="" may="" be="" attributed="" to="" short-term="" stimulation,="" and="" it="" can="" impair="" the="" proliferation="" potential="" of="" cbmscs="" in="" the="" long="">

최근 Cur의 생물학적 활성은 특히 MSC의 생물학적 특성의 조절과 관련하여 다양한 in vitro 또는 in vivo 모델에서 광범위하게 보고되었습니다. Cur의 노화 방지 활성은 자주 논의되어 왔으며, Cur는 유기체 및 세포 수준에서 노화 및 노화 관련 질병에 유익한 효과를 나타내는 것으로 밝혀졌습니다. 그러나 Cur의 다양한 용량과 형태, 노화의 기전으로 인해 조절의 기본 메커니즘이 복잡합니다[19]. 분자 분해 및 세포 소기관 전환의 주요 세포 내 메커니즘으로서, 자가포식은 스트레스 조건으로부터 MSC를 보호하고 세포 항상성을 유지하는 데 중요한 역할을 합니다. 자가포식의 조절은 MSC 기능의 개선을 위한 새로운 전략으로 간주됩니다[59]. 실질적인 연구에서 수집된 데이터에 따르면 다양한 세포 모델에서 Cur에 의한 자가포식의 촉진 또는 억제는 만족스러운 세포 보호 효과를 발휘합니다[38-40].시스탄체 줄기우리의 데이터는 자가포식 관련 유전자(LC3, ULK1, Atg7, Atg12)의 상향조절, LC{5}}II의 생성, autophagic 액포와 산성 소포 소기관, 그리고 p62 단백질 수준의 상당한 감소(그림 4). 또한, 리소좀은 자가포식에 없어서는 안 될 소기관으로 여겨지며, MSC 노화 과정에서 리소좀 pH의 조절장애 및 액포 H plus -ATPase(v-ATPase) 활성의 변화가 관찰되어 리소좀 산성화 및 자가포식을 촉진하고 기여한다. MSC 노화 지연 [60]. Yan과 동료들은 Cur가 마우스 배아 섬유아세포(MEF)의 리소좀 기능을 활성화하고 중요한 생존 신호로 작용하는 자가포식을 유도할 수 있다고 지적했습니다[38]. 유사하게, 우리는 Cur 처리가 cBMSC에서 리소좀 산성화를 향상시키는 것을 관찰했으며(그림 4), 이는 Cur가 자가포식 활성을 향상시키는 데 필수적인 리소좀 기능 활성화에 관여할 수 있음을 시사합니다.

Autophagy는 주로 세포 보호 메커니즘이며 천연 및 합성 화합물의 노화 방지 특성이 autophagy 조절과 관련이 있다는 증거가 증가하고 있습니다[29,54,61,62]. 그러나 MSC 노화 및 해당 메커니즘에 대한 자가포식 조절의 효과는 아직 완전히 평가되고 조사되지 않았습니다. 초기 보고서에 따르면 자가포식은 주로 세포 보호 기전이며 자가포식 수준이 증가하면 독성 대사 산물의 축적을 줄이고 세포 소기관의 기능을 회복하여 세포 노화를 지연시킬 수 있다고 밝혔습니다[63]. 흥미롭게도 최근 조사에서는 MSC 노화 동안 자가포식 액포와 자가포식 관련 단백질(LC3-II, ATG7 및 ATG12)의 증가가 관찰된 반면 바필로마이신 A1 및 {{11 }}MA는 SA{12}}갈양성 세포의 비율과 p16 및 p21의 발현을 감소시키는 것으로 나타났습니다[35]. Cur-유도된 자가포식과 cBMSC노화에 대한 효과 사이의 관계를 추가로 설명하기 위해 자가포식은 라파마이신 또는 3-MA로 전처리하여 조절되었습니다. 분명히 자가포식 활성은 3-MA에 의해 약화되는 것으로 밝혀진 반면, RAP 및 Cur(1uM)는 자가포식을 유의하게 향상시키는 것으로 나타났습니다(그림 5). 이전 보고서[5]와 일치하게, 우리의 연구 결과는 3-MA에 의한 자가포식 억제가 cBMSC에서 세포 노화를 가속화한다는 것을 보여줍니다. 자가포식 활성화에 대한 거의 일관된 효과는 Cur(1uMand RAP)에 의해 발휘되었지만 유사한 세포 보호 효과는 cBMSC가 표시되었습니다. 따라서 자가포식이 3-MA에 의해 억제되면 Cur에 의해 발휘되는 보호 효과가 감소하여(그림) Cur에 의한 자가포식이 cBMSC 노화를 개선하기 위한 잠재적인 분자 메커니즘임을 시사합니다(그림 7).

생리학적 조건에서 자가포식은 세포 항상성을 유지하기 위해 모든 진핵 세포에서 기본 수준에서 발생합니다. 그러나 다양한 스트레스 조건은 autophagy가 최적의 수준으로 회복되지 않는 한 세포 운명에 영향을 미치는 비정상적인 autophagy를 유발할 수 있습니다 [41,44,64]. 우리의 증거는 Cur-유도된 자가포식이 cBMSC 노화의 조절에 유익한 효과를 나타낸다는 것을 확인했습니다. 이 시나리오에서 Cur 치료 전에 다양한 스트레스 생성 자극 및 세포외 설정을 신중하게 고려해야 하며 Cur-유도 자가포식이 미리 결정된 용량 및 기간에서 MSC의 기능을 선택적으로 개선할 수 있는지 조사하는 것이 흥미로울 것입니다. 또한, 나노기술 기반 커큐민 전달 시스템은 더 나은 수상 용해도와 생체이용률 수준을 나타냈습니다[65,66]. 그것은 MSC 노화를 지연시키고 대응하는 유망한 도구가 될 수 있습니다. autophagy가 MSC 노화를 지연시키는 기본 메커니즘인지 여부에 대한 질문에 대한 대답은 여전히 ​​미래 연구에서 제공될 더 많은 세부 사항이 필요합니다.

4. 재료 및 방법

4.1.동물

골수 샘플은 6마리의 건강한 성인 암컷 중국 시골 개({1}}개월)에서 수집되었습니다. 모든 연구는 Sichuan Agricultural University의 교수진 동물 관리 및 사용 위원회(승인 번호2020-0608)의 승인을 받았으며 중화인민공화국 동물 보호법의 윤리적 기준에 따라 수행되었습니다.

4.2. 커큐민 용액의 제조

Cur(HPLC 98% 이상, CAS 번호:458-37-7; Solar Science& Technology Co., Ltd., Beijing, China)를 DMSO에 20mmol/의 스톡 농도로 용해시켰다. 엘. 0.22 μm 유기 미세다공성 필터 멤브레인을 통해 여과하고 -80도에서 보관합니다. 시험관내 연구를 위한 배지에서 상이한 Cur 용액을 제조하였다.

4.3. 세포 배양 및 확장

cBMSC는 골수에서 얻었다. 세포는 저포도당 Dulbecco's Modified Eagle Medium(LG-DMEM, Gibco Grand Island, NY, USA), 10% 소태아혈청(FBS, TransGen Biotech Co., Ltd., Beijing, China)으로 구성된 완전배지에서 배양하였다. ), 및 1% 페니실린/스트렙토마이신. 80-90% confluence에서 부착 세포는 Trypsin Digestion Solution(Beyotime Biotechnology Co., Ltd., Shanghai, China)으로 방출되었고 1:{6}}:3의 비율로 추가로 확장되었습니다. [67 ].

4.4. 세포 성장 퀴리

계대(P)3,6 및 9에서 cBMSC의 증식 능력을 결정하기 위해 세포를 3개의 48-웰 플레이트(2500개 세포/웰)에 접종했습니다. 48시간 인큐베이션 후, 세포를 트립신 소화 용액으로 방출하고 혈구계로 계수하였다. 세포 계수 절차는 48시간마다 반복되었고 14일 동안 지속되었습니다.

4.5.유세포분석에 의한 cBMSC의 면역표현형 검출

3차 계대에서 cBMSC를 PBS로 세척하고 트립신 처리하였다. 세포(3 x 105 cells/mL)를 염색 완충액에 재현탁하고 세포 현탁액(100μL)을 표면 항원 CD45, CD34 및 ITGB1(eBioscience, San Diego, CA, USA) 및 비형광 표지된 CD31, CD90 및 CD105(Biosynthesis biotechnology Co.Ltd. Beijing, China) 4도에서 15분 동안. 세포를 PBS로 세척하고 FITC-컨쥬게이션된 염소 항-토끼 IgG와 함께 4도에서 15분 동안 인큐베이션하였다. 표면 항원은 유세포 분석법(FACS Calibur, Becton Dickinson, San Jose, CA, USA)에 의해 검출되었습니다. 데이터 분석은 CytExpert 소프트웨어로 수행되었습니다.

4.6. 시험관 내 분화 분석

cBMSC를 6-웰 플레이트에 5x104개 세포/mL의 밀도로 플레이팅했습니다. 70-80% confluence에서 완전 배지를 골형성 또는 지방형성 분화 유도 배지로 교체하고 3일마다 교체했습니다(Cvagen, Suzhou, China). 칼슘 침착은 골형성 유도 3주 후 Alizarin Red S 염색(Solarbio, Beijing, China)에 의해 검출되었고, 지방 형성 유도 2주 후에 Oil Red O 염색(Solarbio, Beijing, China)을 사용하여 지질 방울 축적이 관찰되었습니다.

4.7. 세포 생존율에 대한 Cur의 효과

cBMSC의 세포 생존력은 CCK{0}키트(Vazyme Biotech Co., Ltd., Nanjing, China)를 사용하여 결정되었습니다.cistanche tubulosa의 이점과 부작용cBMSC를 96-웰 ​​플레이트에서 24시간 동안 사전 배양했습니다. cBMSC를 다양한 농도(0.1, 0.5, 1, 5, 1{ {14}} umol/L) 12시간, 24시간, 48시간 및 72시간 동안. 세포를 0.1%의 DMSO로 처리하여 대조군으로 사용하였다. 웰당 10μL의 CCK{17}} 용액으로 2시간 동안 인큐베이션한 후, 450 nm에서 마이크로플레이트 판독기로 광학 밀도를 측정하였다(Thermo Scientific, 미국 매사추세츠주 월섬). 상대 세포 생존율은 제조업체의 지침에 따라 계산되었습니다.

4.8. 콜로니 형성 분석

cBMSC의 자가 재생 효율은 집락 형성 단위 섬유아세포(CFU-F) 분석을 사용하여 감지되었습니다. cBMSC를 6-웰 플레이트에 접종했습니다(3×10² 세포/웰). 2주 배양 후 세포를 4% paraformaldehyde로 30분간 고정하고 1% crystal violet으로 10분간 염색한 후 도립현미경(LX73, Olympus Corporation, Tokyo, Japan)으로 관찰하였다. CFU-F의 경우 50개 이상의 세포가 계산되었습니다. CFU-F 효율은 다음과 같이 계산되었습니다.

CFU-F 효율=CFU-F 수/시드 수(300개 세포)[68].

4.9. 베타-갈락토시다아제 염색 분석

cBMSC에서 노화 관련 -갈락토시다아제(SA- -gal)의 활성은 제조업체의 지침에 따라 SA- -gal 염색 키트(Beyotime Biotechnology Co., Ltd., Shanghai, China)를 사용하여 추정되었습니다. . 염색 후 세포를 도립현미경으로 관찰하였다. 세포 노화를 평가하기 위해 양성으로 염색된 세포를 계수하였다.

4.10.역전사 실시간 정량적 PCR(RT-qPCR)

Trizol 시약 방법을 사용하여 세포 펠릿에서 전체 RNA를 추출했습니다. cDNA는 gDNA Eraser(Takara, Shiga, Japan)가 있는 PrimeScriptTM RT 시약 키트를 사용하여 합성되었습니다. 이전 연구[67]와 관련하여 GAPDH 외에 PCR 프라이머(표 2)는 cDNA 서열을 기반으로 하는 Primer Express 소프트웨어(Applied Biosystems, Foster City, CA, USA)를 사용하여 설계되었습니다. qPCR은 CFX96 Touch Real-time PCR Detection System(Bio-Rad, Richmond, CA, USA)에서 TB Green PCR Mix(Takara, Shiga, Japan)를 사용하여 수행되었습니다. 반응 조건은 3{16}}초 동안 95도, 5초 동안 95도 및 30초 동안 60도의 39 사이클이었습니다. 용융 곡선 분석은 10초 동안 95도에서 시작하여 65도에서 95도 범위에서 매 사이클마다 0.5도씩 증가하여 수행되었습니다. GAPDH를 내부 대조군으로 사용하여 모든 데이터를 정규화하고 상대 발현을 비교 Ct(Cycle Threshold) 방법을 통해 계산했습니다.

4.11. LysoTracker를 사용하여 Lusosomal UI 추적

Lyso-Tracker Red(Beyotime Biotechnology Co., Ltd., Shanghai, China)는 리소좀 산성화 시 증가된 형광 강도를 나타낼 수 있는 리소좀을 추적하는 데 사용되었습니다. cBMSC를 12-웰 ​​플레이트에 파종하고 Cur로 24시간 동안 처리한 다음 세포를 Lyso-Tracker(60nM) 및 Hoechst 33,342(2ug/mL)로 20분 동안 처리했습니다. PBS로 세척한 후 도립형광현미경을 이용하여 형광을 관찰하였다.

4.12. 면역형광

cBMSC(2×1{5}}4 세포/슬라이드)를 슬라이드에 접종하고 30분 동안 4% 파라포름알데히드로 고정했습니다. 5분 동안 0.5% Triton X-100와 함께 배양한 후(Solarbio, Beijing, China), 섹션을 30분 동안 차단 용액에 담가두었습니다. 봉입된 액체를 제거하고 세포를 항LC3B 항체(1:1000, Abcam, Cambridge, MA, USA)와 함께 4도에서 밤새 배양한 다음 형광색소 결합 이차 항체(Abcam, Cambridge, MA, USA)와 함께 배양하였다. 37℃에서 50분 동안. 마지막으로, 세포를 DAPI(Beyotime Biotechnology, Shanghai, China)로 대조염색하고 공초점 현미경으로 모니터링하였다.

4.13.웨스턴 블로팅 분석

세포 샘플을 얼음처럼 차가운 PBS로 세척한 후 프로테아제 억제제를 함유한 조직 및 세포 용해물(Solarbio, Beijing, China)로 용해시켰다. 시료당 15ug의 단백질을 함유하는 세포 용해물을 sodium-dodecyl sulfate-polyacrylamide(SDS-PA)(Solarbio, Beijing, China) 겔에 넣고 전기영동으로 분리하였다. 폴리비닐리덴 플루오라이드(PVDF) 멤브레인에 단백질을 옮긴 후, 후자는 실온에서 1시간 동안 5% 무지방 분유(Solarbio, Beijing, China)로 비특이적으로 차단되었습니다. 막을 1차 항체인 항-LC3B(1:2{27}}00, Abcam, Cambridge, MA, USA), 항-p62/SQSTM1(1:4000, Novus Biologicals, Littleton, NH, USA)과 함께 밤새 배양했습니다. ), 항액틴(1:1000, Abcam, Cambridge, MA, USA)을 4도에서 처리하고, 블롯을 TBST(Solarbio, Beijing, China)로 세척한 후 이차 항체(1 :2000, Abcam, Cambridge, MA, USA) 37도에서 1시간 동안. 그 후, 화학발광 시약(Millipore, Billerica, MA, USA)에 노출시켜 막을 개발하고 ChemiDocTM Imaging Systems(Tanon{24}}, Shanghai, China)로 시각화했습니다. 밴드 밀도는 각 그룹에 대해 Image-Pro Plus 6.0 소프트웨어(Media Cybernetics, Silver Spring, MD, USA)를 사용하여 정량화하고 -actin으로 정규화했습니다.

4.14. 투과전자현미경(TEM)

세포 펠렛을 소화하여 1.5mL 원심분리 튜브에 수집한 다음 2.5% 글루타르알데히드(Solarbio, Beijing, China)로 실온에서 2시간 동안 고정하였다. 샘플을 PBS로 세척한 후 1% osmium tetroxide로 1시간 후 고정한 다음 아세톤 용액에서 단계적으로 탈수를 증가시키고 812 에폭시 수지(Beijing Zhongjingkeyi Technology Co., Ltd., Bejing, 중국). 이어서, 울트라 마이크로톰(EM UC7, Leica Microsystems Co., Ltd., Heidelberg, Germany)에서 50 nm 섹션을 얻었다. 절편을 10-15분 동안 우라닐 아세테이트(Zhongjingkevi, Bejing, China)로 염색하고 납 시트레이트(Zhongjingkei, Beijing, China)로 2분 동안 염색했습니다. 모든 표본은 TEM(EM{14}}PLUS, JEOL, Akishima, Tokyo, Japan)에서 관찰했습니다.

4.15. 통계 분석

결과는 3개의 독립적인 실험에서 얻었고 모든 데이터는 평균 ± 표준 편차(SD)로 표시되었습니다. 통계 값은 IBM SPS Statistics 25를 사용하여 분석하고 GraphPad Prism 9를 사용하여 설명했습니다.0(GraphPad Software, San Diego, CA, USA). 통계적으로 유의한 차이는 일원 분산 분석(ANOVA) 및 스튜던트 t-검정을 사용하여 수행된 것을 사용하여 결정되었습니다. p 값<0.05 were="" considered="" to="" be="" significant="">

5. 결론

우리의 연구 결과는 Cur, cBMSC 노화 및 자가포식 사이의 관계에 대해 밝힙니다. 우리 연구의 데이터는 Cur가 자가포식을 활성화하고 리소좀 산성화를 촉진하면서 cBMSC의 노화 상태를 완화할 수 있음을 시사합니다. 더욱이, 추가 증거는 Cur-유도된 자가포식이 cBMSC 노화를 개선하기 위한 잠재적인 메커니즘임을 입증했습니다. Cur는 MSC의 기능을 개선하기 위한 유망한 활성화제이자 보존제가 될 수 있습니다. 노화에 대한 Cur의 긍정적인 효과는 무시할 수 없습니다. 향후 연구는 조직 손상 및 퇴행성 및 염증성 질환과 같은 다양한 질병에서 MSC의 치료 잠재력을 향상시키기 위해 MSC 운명에 대한 Cur 조절의 효과에 초점을 맞춰야 합니다.

이 기사는 Int에서 발췌했습니다. J. 몰. 과학. 2021, 22, 11356. https://doi.org/10.3390/ijms222111356 https://www.mdpi.com/journal/ijms